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FRET de haute précision au niveau d'une molécule pour la détermination de la structure biomoléculaire
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
High Precision FRET at Single-molecule Level for Biomolecule Structure Determination
DOI:

11:24 min

May 13, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:07Preparation of Materials
  • 02:57Pulsed Interleaved Excitation-Multiparameter Fluorescence Detection (PIE-MFD) Instrument Setup
  • 06:14Burst Integration Fluorescence Lifetime Analysis of Standards
  • 07:34dsDNA and Protein Sample Measurements and Analysis
  • 09:28Results: Inter-dye Distance Determination in Single Molecules
  • 10:54Conclusion

Summary

Automatic Translation

Un protocole pour les expériences FRET de haute précision au niveau de la molécule unique est présenté ici. En outre, cette méthodologie peut être utilisée pour identifier trois états conformationnels dans le domaine de liaison au ligand du récepteur N-méthyl-D-aspartate (NMDA). La détermination de distances précises est la première étape vers la construction de modèles structurels basés sur des expériences FRET.

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