/
/
High Precision FRET på enkeltmolekyliveau for biomolekylstrukturbestemmelse
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:07Preparation of Materials
- 02:57Pulsed Interleaved Excitation-Multiparameter Fluorescence Detection (PIE-MFD) Instrument Setup
- 06:14Burst Integration Fluorescence Lifetime Analysis of Standards
- 07:34dsDNA and Protein Sample Measurements and Analysis
- 09:28Results: Inter-dye Distance Determination in Single Molecules
- 10:54Conclusion
En protokol til høj præcision FRET eksperimenter på det enkelte molekylniveau er præsenteret her. Derudover kan denne metode anvendes til at identificere tre konformationelle tilstande i det ligandbindende domæne af N-methyl-D-aspartat (NMDA) -receptoren. Fastlæggelse af præcise afstande er det første skridt i retning af opbygning af strukturelle modeller baseret på FRET eksperimenter.
