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JoVE Journal İmmünoloji ve Enfeksiyon
Simultaneous Study of the Recruitment of Monocyte Subpopulations Under Flow In Vitro

Estudo simultâneo do recrutamento de monócitos subpopulações sob fluxo In Vitro

DOI:
10.3791/58509-v

•

09:16 min

•

November 26, 2018

•

, , , ,
1Hematology service, Centre Médical Universitaire (CMU), Medical faculty,University of Geneva, 2Department of Pathology and Immunology, Centre Médical Universitaire (CMU), Medical faculty,University of Geneva, 3Department of Cell Physiology and Metabolism, Centre Médical Universitaire (CMU), Medical faculty,University of Geneva

Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 00:54Human Umbilical Vein Endothelial Cell (HUVEC) Staining and Human Pan Monocyte Isolation
  • 03:20Fluidic System Preparation
  • 05:04Time-lapse Imaging of Monocyte Recruitment Under Flow and Image Analysis
  • 06:56Results: Representative Monocyte Transmigration Analysis
  • 08:25Conclusion

Özet

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Aqui, apresentamos um protocolo integrado que mede subpopulação de monócitos tráfico sob fluxo in vitro pelo uso de marcadores de superfície específicas e microscopia de fluorescência confocal. Este protocolo pode ser usado para explorar etapas sequenciais de recrutamento, bem como perfil de outros subtipos de leucócitos usando outros marcadores de superfície específicos.

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Monocyte SubpopulationsLeukocyte AdhesionTrans-endothelial MigrationHematopoietic CellsHUVECCMFDADensity Gradient SeparationPAN Monocyte IsolationTransmigrationAdhesionM199 MediumBSA

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