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Ensayo de Competencia Oligopeptídica para la Determinación del Sitio de Fosforilación
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Oligopeptide Competition Assay for Phosphorylation Site Determination
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Ensayo de Competencia Oligopeptídica para la Determinación del Sitio de Fosforilación

DOI:
10.3791/55708-v

•

09:16 min

•

May 18, 2017

•

, , , ,
1College of Pharmacy and Research Institute of Pharmaceutical Sciences,Seoul National University, 2College of Pharmacy and Institute of Pharmaceutical Science and Technology,Hanyang University

Bölümler

  • 00:05Başlık
  • 01:05Site-directed Mutagenesis of pGEX-Nrf2
  • 03:45In Vitro Competitive 5′ Adenosine Monophosphate-activated Protein Kinase (AMPK) Assay
  • 06:13In Vitro AMPK Activity Assay with a Site-specific Mutant
  • 07:39Results: In Vitro AMPK Assays with Competitive Oligopeptides or a Site-specific Mutant Protein
  • 08:31Conclusion

Özet

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Los ensayos de competición de péptidos se usan ampliamente en una variedad de experimentos moleculares e inmunológicos. Este documento describe un método detallado para un ensayo de quinasa que compite con oligopéptido in vitro y los procedimientos de validación asociados, que pueden ser útiles para encontrar sitios de fosforilación específicos.

Etiketler

Oligopeptide Competition AssayPhosphorylation Site DeterminationCell SignalingPost-translational ModificationsSite-directed MutagenesisPCRDpnI DigestionBacterial TransformationDNA SequencingProtein Expression And Purification

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