Summary

Caratteristiche dei cambiamenti del dolore nei ratti con lesione nervosa entro 24 ore dall'intervento Tuina una tantum

Published: January 26, 2024
doi:

Summary

Presentiamo un protocollo che utilizza il simulatore di manipolazione del tuina per eseguire la terapia tuina “a tre manipolazioni e tre agopunti” per ratti con lesioni da costrizione cronica minori e valutiamo i punti temporali analgesici efficaci del tuina entro 24 ore testando i cambiamenti del dolore attraverso l’analisi comportamentale e i cambiamenti nell’espressione dei fattori infiammatori utilizzando il saggio di immunoassorbimento enzimatico.

Abstract

Il tuina, come metodo di trattamento esterno della medicina tradizionale cinese, ha dimostrato di avere un effetto analgesico sul dolore neuropatico periferico (pNP) nella ricerca clinica e di base. Tuttavia, il momento ottimale per l’effetto analgesico del tuina può variare in base alle diverse sensazioni di lesione, influenzando l’esplorazione del meccanismo di inizio dell’analgesia del tuina.

La ricerca ha utilizzato ratti modello di lesione cronica da costrizione minore (CCI minore) per simulare la pNP e ha utilizzato il simulatore intelligente di manipolazione del tuina per simulare i tre metodi (pressione del punto, spiumatura e impasto) e tre punti di agopuntura (Yinmen BL37, Chengshan BL57 e Yanglingquan GB34) per l’esecuzione della terapia tuina. Lo studio ha valutato i cambiamenti del dolore entro 24 ore e il punto temporale ottimale per l’efficacia dell’analgesia del tuina nei ratti con modelli CCI minori testando la soglia di sensibilità al freddo (CST), la soglia di prelievo meccanico (MWT) e la latenza di ritiro termico (TWL). Inoltre, lo studio ha valutato i cambiamenti di espressione di IL-10 e TNF-α attraverso il rilevamento di Elisa. I risultati mostrano che il tuina ha effetti analgesici sia immediati che prolungati. Per le tre diverse soglie di sensibilità al danno di CST, MWT, TWL e due citochine di IL-10 e TNF-α, l’efficacia analgesica di tuina entro 24 ore dall’intervento è significativamente diversa in diversi punti temporali.

Introduction

Il dolore neuropatico periferico (pNP) si riferisce al dolore causato da una lesione o malattia del sistema nervoso somatosensoriale periferico, manifestato come una serie di sintomi e segni, con l’iperalgesia come uno dei sintomi principali 1,2. L’iperalgesia è un’esperienza intensificata di dolore causato da uno stimolo nocivo, tra cui puntura di spillo, freddo e caldo3. Sono stati condotti ampi studi epidemiologici, che mostrano che la pNP è la più comune, con un tasso di prevalenza del 6,9%-10% nel dolore neuropatico4. La pNP può essere causata da molteplici malattie, tra cui lesioni del nervo, nevralgia post-erpetica, polineuropatia diabetica dolorosa, sclerosi multipla, ictus, cancro, ecc.5. Al giorno d’oggi, il metodo principale per il trattamento della pNP sono i farmaci, ma l’effetto non è ideale; e gli effetti collaterali sono significativi, il che è la ragione principale dell’elevato onere economico per gli individui e la società6.

Tuina è un metodo di trattamento esterno ecologico, economico, sicuro ed efficace della medicina tradizionale cinese7. Molti studi clinici hanno dimostrato l’effetto analgesico del tuina sulla pNP e studi di base hanno verificato gli effetti analgesici immediati e cumulativi del tuina 8,9. Il principale meccanismo analgesico cumulativo del tuina è quello di ridurre i livelli di fattori infiammatori e inibire l’attivazione delle cellule gliali10,11. La ricerca precedente ha confermato l’effetto analgesico cumulativo del tuina e ha trovato geni differenzialmente espressi (DEG) nei gangli della radice dorsale (DRG) e nel corno dorsale spinale (SDH) di ratti con lesione del nervo sciatico dopo 20 volte il trattamento con tuina, principalmente correlati al legame proteico, alla risposta alla pressione e alla proiezione neuronale12. In studi recenti, è stato confermato che il tuina ha un effetto analgesico immediato e che l’intervento 1-time del tuina potrebbe alleviare l’iperalgesia dei ratti CCI minori e soprattutto facilitare l’iperalgesia termica in modo più efficace13. Tuttavia, il momento ottimale per l’effetto analgesico del tuina può variare a seconda della sensazione di lesione (freddo, caldo, meccanica), influenzando l’esplorazione del meccanismo di inizio dell’analgesia del tuina.

I mediatori dell’infiammazione possono sensibilizzare e attivare i recettori del dolore, portando a una diminuzione delle soglie di scarica e delle scariche ectopiche, contribuendo così alla sensibilizzazione periferica14,15. Dopo la lesione dei nervi periferici, il TNF-α è un iniziatore della risposta infiammatoria, che può promuovere la sintesi di fattori infiammatori come IL-10 e IL-1β, causando lesioni infiammatorie tissutali dirette, stimolando le terminazioni nervose locali e causando dolore 16,17,18. Tuina può ottenere effetti analgesici riducendo l’espressione di fattori infiammatori come TNF-α, IL-10, IL-6 e IL-1β 19,20,21. Lo studio ha selezionato ratti modello CCI minori per simulare la pNP clinica e ha selezionato diversi punti temporali per i test comportamentali del dolore da stimolazione fredda, termica e meccanica dopo un intervento tuina 1 volta per soglia di sensibilità al freddo (CST), soglia di prelievo meccanico (MWT), latenza di prelievo termico (TWL) e scegliere IL-10 e TNF-α nel siero mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA), Al fine di selezionare il punto temporale in cui l’effetto analgesico di Tuina è significativo, fornendo una base per lo studio del meccanismo di inizio dell’analgesia di Tuina nella fase successiva.

Protocol

Il Comitato per la protezione e l’uso degli animali dell’Università di Medicina Cinese di Pechino (BUCM-4-2022082605-3043) ha approvato tutte le procedure utilizzate in questo studio. 1. Animali e disegno dello studio Procurarsi 49 ratti maschi di Sprague-Dawley (SD) di 8 settimane, del peso di 200 ± 10 g. Utilizzando un metodo della tabella dei numeri casuali, dividere i ratti in un gruppo di operazioni fittizie (n = 7),…

Representative Results

CST: Rispetto al gruppo modello, il numero di sollevamenti del piede nel gruppo 6 ore dopo il tuina era significativamente ridotto e la differenza era statisticamente significativa (P < 0,05). Rispetto al gruppo sham, il numero di sollevamenti del piede nel gruppo modello è stato significativamente aumentato e la differenza è stata statisticamente significativa (P < 0,05) (Tabella 3, Figura 3). <…

Discussion

Lo studio ha utilizzato il modello CCI minore per simulare la pNP causata da una lesione clinica del nervo sciatico. Il modello minore di CCI prevede la compressione e la restrizione continua e cronica del tronco nervoso attraverso la legatura, accompagnata dal graduale rigonfiamento della legatura, con conseguente edema all’interno del nervo sciatico e formazione di dolore cronico stabile in 3-5 giorni27,28. Nello studio prelimi…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Gli autori hanno ricevuto finanziamenti per la ricerca, la scrittura e la pubblicazione di questo articolo dalla National Natural Science Foundation of China (n. 82074573 e 82274675) e dalla Beijing Natural Science Foundation (n. 7232278).

Materials

Anesthesia machine Ruiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, China R500 Animal respiratory anesthesia related equipment
Chromic intestinal suture Shandong Boda Medical Products Co., Ltd., China BD210903 An absorbable surgical suture mainly made from collagen protein processed from the intestines of healthy young goats
Electronic Von Frey instrument Bioseb, USA BIO-EVF5 An instrument for detecting mechanical withdrawal threshold
Intelligent cold and hot plate pain detector Anhui Zhenghua Biological Instrument Equipment Co., Ltd,China. ZH-6C An instrument for detecting cold sensitivity threshold
Isoflurane Ruiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, China R510-22-10 An anesthetic
Multi-function full-wavelength microplate reader Molecular Devices (Shanghai) Co., Ltd. SpectraMax M2 An instrument for detecting optical density (OD)
Thermal analgesia device Chengdu Techman Software Co., Ltd., China PL-200 An instrument for detecting thermal withdrawal latency

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Yang, Z., Wu, S., Yu, T., Chen, J., Zhang, R., Wang, H., Zhang, Y. Characteristics of Pain Changes in Rats with Nerve Injury Within 24 hours After One-Time Tuina Intervention. J. Vis. Exp. (203), e65593, doi:10.3791/65593 (2024).

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