Summary

マウスの神経因性疼痛の改良温存神経損傷手術モデル

Published: January 25, 2022
doi:

Summary

この修正手術は、マウスまたはラットの温存神経損傷モデルのための簡略化された方法であり、一般的な腓骨神経と腓骨神経の両方を損傷するために1回の結紮と1回の切断のみが必要です。

Abstract

Spared nerve injury (SNI) は、末梢神経損傷の主要な症状を模倣した動物モデルで、マウスとラットの神経因性疼痛の分子的および細胞的メカニズムを研究しています。現在、SNIモデルには2種類あり、本研究ではSNIと定義する総腓骨神経と脛骨神経を無傷の腓骨神経で切断して結紮するものと、本研究ではSNItと定義する総腓骨神経と腓腹神経を無傷で切断して結紮するモデルがあります。腓腹神経は純粋に感覚神経であるのに対し、脛骨神経には運動線維と感覚線維の両方が含まれているため、SNItモデルはSNIsモデルよりも運動障害がはるかに少ないです。従来のSNItマウスモデルでは、総腓骨神経と腓腹神経を別々に切断して結紮します。ここでは、修正されたSNIt手術法が説明されています 一般的な腓骨神経と腓腹神経の両方を損傷します 1回の結紮と1回の切断で 短い処置時間で、これにより実行が容易になり、坐骨神経または脛骨神経を伸ばす潜在的なリスクが軽減され、従来のSNItモデルと同様の機械的過敏症が生じます。

Introduction

手術や外傷後の神経損傷による神経障害性疼痛は、生活の質を損なう大きな経済的負担を伴います。脊髄神経結紮術(SNL)1、坐骨神経の慢性狭窄損傷(CCI)2、部分的な坐骨神経結紮術(pSNL)3、坐骨神経取引(SNT)4、予備神経損傷(SNI)5,6,7,8を含む多くの神経損傷モデルが、ラットとマウスの末梢神経損傷の主要な症状を模倣するために開発され、分子的および細胞的メカニズムを研究しました。神経因性疼痛 6,7,8,9,10.ただし、各手術モデルには利点と制限があるため、手術モデル10の探索と開発には特に注意を払う必要があります。

げっ歯類のSNIモデルは、機械的刺激に対して長期的な過敏症を引き起こします。ただし、2つの異なるSNIモデルがあるため、やや混乱します。最初のSNIモデルはウルフの研究室で開発され、総腓骨神経と脛骨神経が損傷し、腓腹神経が無傷のまま残されました5,6。2番目のSNIモデルはバスバウムの研究室で開発され、総腓骨神経と腓腹神経が損傷し、脛骨神経は無傷のまま残されました7,8。最初のウルフのモデルは、ここでは腓腹神経が無傷のままであるためSNIと定義され、バスバウムのモデルは脛骨神経が無傷のままであるため、ここではSNItと定義されています。腓腹神経は純粋に感覚神経であるのに対し、脛骨神経には運動線維と感覚線維の両方が含まれているため、SNItモデルはSNIsモデルよりも運動障害がはるかに少ないです。ただし、SNIsモデルとは異なり、SNItモデルのマウスは熱過敏症を発症しませんが、両方のモデルで機械的過敏症を発症します。SNItモデルは比較的簡単な手順ですが、腓腹神経と総腓骨神経を別々に結紮する必要があり、坐骨神経または脛骨神経を伸ばす潜在的なリスクがあります6,7,8,9。

総腓骨神経、脛骨神経、および腓腹神経は坐骨神経の3つの枝であり、腓腹筋の上端で明確に識別できます(図1):脛骨神経は腓腹筋の下にあり、総腓骨神経(頭側)と腓腹神経(尾側)は腓腹筋11の上にあります.その解剖学的特徴に基づいて、一般的な腓骨神経と腓腹神経を結紮する改良マウスSNIt手術手順が開発されました。また、神経結紮と神経切断が1つだけであるため、処置時間が短縮されます。

Protocol

動物実験は、UCSFのInstitutional Animal Care and Use Committeeによって承認され、NIHの実験動物の世話と使用に関するガイドに従って実施されました。この研究では、体重20〜30 gの成体C57BL / 6マウスを使用しました。フォン・フレイの評価は、午後1時から午後3時の間に行われました。 1.麻酔とマウスの準備 マウスをO2 に2%イソ?…

Representative Results

修正された方法と従来の方法の間の処置時間の比較。皮膚の切断開始から皮膚の閉鎖終了までの処置時間は、修正アプローチで5匹、従来アプローチで5匹のマウスでそれぞれ記録されました。統計的に有意な結果を得るために、最小限の動物を使用しました。SNItを実行するための従来のアプローチ7,14の制御…

Discussion

一般的な腓骨神経と腓腹神経別々に結紮する従来のマウスSNIt法6,7,8,9と比較して、修正されたSNItモデルには3つの利点があります:(1)坐骨神経または脛骨神経を収縮または伸ばすリスクが少ない。(2)総腓骨神経と腓腹神経を一緒に結紮することにより、遠位神経断端が近?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Z.G.はNINDS R01NS100801によってサポートされています。

Materials

6-0 suture Henry Schein 9007482 Nerve ligation and close the muscular layer
Iris Scissors Integra Miltex 12460598 Cut muscle and fascia
Mayo dissecting scissors Fisherbrand 895120 Cut skin incision
Micro forcep Fisherbrand 16100110 Blunt dissection biceps femoris muscle
Micro Scissors Excelta 17467496 Cut nerve
Microdissection Forceps Fisherbrand 16100123 Separate the common peroneal and the sural nerves from the neighboring tissues
Needle Holder Fisherbrand 8966 Hold 6-0 needle
Prism software Graph Pad version 8.0 Statistical analysis software
Wound clips Roboz Surgical NC1878744 Close skin incision

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Cite This Article
He, L., Zhao, W., Zhang, L., Ilango, M., Zhao, N., Yang, L., Guan, Z. Modified Spared Nerve Injury Surgery Model of Neuropathic Pain in Mice. J. Vis. Exp. (179), e63362, doi:10.3791/63362 (2022).

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