Summary

Modelo de cirurgia de lesão nervosa poupada modificada de dor neuropática em camundongos

Published: January 25, 2022
doi:

Summary

A cirurgia modificada é um método simplificado para o modelo de lesão nervosa poupada de camundongo ou rato que requer apenas uma ligadura e um corte para lesionar os nervos fibular e sural comuns.

Abstract

A lesão do nervo poupado (SNI) é um modelo animal que imita os sintomas cardinais da lesão do nervo periférico para estudar o mecanismo molecular e celular da dor neuropática em camundongos e ratos. Atualmente, existem dois tipos de modelo de SNI, um para cortar e ligar os nervos fibular comum e tibial com nervo sural intacto, que é definido como SNIs neste estudo, e outro para cortar e ligar os nervos fibular comum e sural com nervo tibial intacto, que é definido como SNIt neste estudo. Como o nervo sural é puramente sensorial, enquanto o nervo tibial contém fibras motoras e sensoriais, o modelo SNIt tem muito menos déficit motor do que o modelo SNIs. No modelo tradicional de camundongo SNIt, os nervos fibular comum e sural são cortados e ligados separadamente. Aqui, um método de cirurgia SNIt modificado é descrito para danificar os nervos fibular e sural comuns com apenas uma ligadura e um corte com um tempo de procedimento mais curto, o que é mais fácil de realizar e reduz o risco potencial de alongamento dos nervos ciático ou tibial, e produz hipersensibilidade mecânica semelhante ao modelo SNIt tradicional.

Introduction

A dor neuropática induzida por lesão nervosa após cirurgia ou trauma tem um ônus econômico significativo que prejudica a qualidade de vida. Uma série de modelos de lesão nervosa, incluindo ligadura do nervo espinhal (SNL)1, lesão por constrição crônica (CCI)2 no nervo ciático, ligadura parcial do nervo ciático (pSNL)3, transação do nervo ciático (SNT)4 e lesão do nervo poupado (SNI)5,6,7,8, foram desenvolvidos com sucesso para imitar os sintomas cardinais da lesão do nervo periférico em ratos e camundongos para estudar o mecanismo molecular e celular de dor neuropática 6,7,8,9,10. No entanto, cada modelo cirúrgico tem seus benefícios e limitações, portanto, atenção especial deve ser dada à exploração e desenvolvimento dos modelos cirúrgicos10.

O modelo SNI de roedores produz hipersensibilidade de longo prazo à estimulação mecânica. No entanto, é um pouco confuso porque existem dois modelos SNI diferentes. O modelo inicial de SNI foi desenvolvido no laboratório de Woolf, no qual os nervos fibular comum e tibial foram lesados, deixando o nervo sural intacto 5,6. O segundo modelo de SNI foi desenvolvido no laboratório de Basbaum, no qual os nervos fibular comum e sural foram lesados, deixando o nervo tibial intacto 7,8. O modelo inicial de Woolf é definido como SNIs aqui porque o nervo sural é deixado intacto, e o modelo de Basbaum é definido como SNIt aqui porque o nervo tibial é deixado intacto. Como o nervo sural é puramente sensorial, enquanto o nervo tibial contém fibras motoras e sensoriais, o modelo SNIt tem muito menos déficit motor do que o modelo SNIs. No entanto, ao contrário do modelo SNIs, os camundongos no modelo SNIt não desenvolvem hipersensibilidade térmica, mas a hipersensibilidade mecânica se desenvolve em ambos os modelos. Embora o modelo SNIt seja um procedimento relativamente fácil, ele requer a ligadura dos nervos sural e fibular comum separadamente, com o risco potencial de estiramento dos nervos ciático ou tibial 6,7,8,9.

Os nervos fibular, tibial e sural comum são três ramos do nervo ciático e podem ser claramente identificados na borda superior do músculo gastrocnêmio (Figura 1): o nervo tibial passa por baixo do músculo gastrocnêmio e o fibular comum (lado cefálico) e o nervo sural (lado caudal) estão acima do músculo gastrocnêmio11. Com base em suas características anatômicas, um procedimento de cirurgia SNIt de camundongo modificado foi desenvolvido para ligar os nervos fibular e sural comuns juntamente com apenas uma ligadura nervosa e um corte de nervo, o que resulta em menor tempo de procedimento.

Protocol

Os experimentos com animais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da UCSF e foram conduzidos de acordo com o Guia do NIH para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório. Camundongos C57BL/6 adultos pesando 20-30 g foram usados neste estudo. A avaliação de von Frey foi realizada entre 13:00 e 15:00 horas. 1. Anestesia e preparação do camundongo Coloque um camundongo em uma câmara de plástico che…

Representative Results

A comparação do tempo de procedimento entre métodos modificados e tradicionais.O tempo de procedimento desde o início do corte da pele até o final do fechamento da pele foi registrado em 5 camundongos com a abordagem modificada e 5 camundongos com a abordagem tradicional, respectivamente. Um número mínimo de animais foi utilizado para obter resultados com significância estatística. Em comparação com o controle da abordagem tradicional</su…

Discussion

Comparado ao método tradicional SNIt de camundongo que liga o nervo fibular comum e o nervo sural separadamente 6,7,8,9, o modelo SNIt modificado tem três vantagens: (1) tem menos risco de contrair ou esticar os nervos ciático ou tibial; (2) não há necessidade de remover os cotos do nervo distal após o corte do nervo porque, ligando o nervo fibular comum …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Z.G. é apoiado pelo NINDS R01NS100801.

Materials

6-0 suture Henry Schein 9007482 Nerve ligation and close the muscular layer
Iris Scissors Integra Miltex 12460598 Cut muscle and fascia
Mayo dissecting scissors Fisherbrand 895120 Cut skin incision
Micro forcep Fisherbrand 16100110 Blunt dissection biceps femoris muscle
Micro Scissors Excelta 17467496 Cut nerve
Microdissection Forceps Fisherbrand 16100123 Separate the common peroneal and the sural nerves from the neighboring tissues
Needle Holder Fisherbrand 8966 Hold 6-0 needle
Prism software Graph Pad version 8.0 Statistical analysis software
Wound clips Roboz Surgical NC1878744 Close skin incision

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Cite This Article
He, L., Zhao, W., Zhang, L., Ilango, M., Zhao, N., Yang, L., Guan, Z. Modified Spared Nerve Injury Surgery Model of Neuropathic Pain in Mice. J. Vis. Exp. (179), e63362, doi:10.3791/63362 (2022).

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