Um protocolo para avaliar a evolução do tempo do arrastamento neural aos estímulos repetitivos externos é apresentado. As gravações de estado estacionário da mesma condição experimental são adquiridas e médias no tempo-domínio. A dinâmica do estado estacionário é analisada traçando a amplitude da resposta em função do tempo.
A arrastamento neural refere-se à sincronização da atividade neural com a periodicidade dos estímulos sensoriais. Esta sincronização define a geração de respostas evocadas de estado estacionário (ou seja, oscilações na fase de eletroencefalograma-bloqueado para os estímulos de condução). A interpretação clássica da amplitude das respostas evocadas de estado estacionário assume uma resposta neural invariante do tempo estereotipada mais flutuações de fundo aleatórias, de tal forma que a média de apresentações repetidas do estímulo recupera a resposta estereotipada. Essa abordagem ignora a dinâmica do estado estacionário, como no caso da adaptação eliciada por exposições prolongadas ao estímulo. Para analisar a dinâmica das respostas de estado estacionário, pode-se supor que a evolução temporal da amplitude de resposta seja a mesma em diferentes execuções de estimulação separadas por pausas suficientemente longas. Com base nessa suposição, é apresentado um método para caracterizar a evolução temporal das respostas de estado estacionário. Um número suficientemente grande de gravações é adquirido em resposta à mesma condição experimental. As execuções experimentais (gravações) são médias em coluna (ou seja, as execuções são médias, mas a época dentro das gravações não é calculada com os segmentos anteriores). A média em coluna permite a análise de respostas de estado estacionário em gravações com proporções notavelmente elevadas de sinal-ruído. Portanto, o sinal de média fornece uma representação exata da evolução do tempo da resposta do estado estacionário, que pode ser analisada nos domínios de tempo e frequência. Neste estudo, uma descrição detalhada do método é fornecida, usando o estado estacionário visualmente evocado potenciais como um exemplo de uma resposta. As vantagens e as advertências são avaliadas com base em uma comparação com métodos de teste único projetados para analisar a arrastamento neural.
Quando gravado a partir do couro cabeludo, atividade elétrica cerebral é observada como mudanças contínuas e regulares em tensões ao longo do tempo. Esta atividade elétrica é chamada eletroencefalograma (EEG) e foi descrita pela primeira vez por Hans Berger no final dos anos vinte do século passado1. Os estudos seminal subseqüentes descreveram o EEG como uma série composta do tempo, em que os testes padrões rítmicos ou repetitivos diferentes podem ser observados2,3,4. Atualmente, o EEG é tipicamente dividido em cinco bandas de frequências bem estabelecidas, Delta, Theta, alfa, beta e gama, que estão associadas ao processo sensorial e cognitivo diferente.
Durante anos, o estudo das oscilações cerebrais utilizando EEG foi restrito a qualquer análise do espectro na atividade em andamento ou mudanças na atividade oscilatória provocada por eventos sensoriais não periódicos. Nas últimas décadas, diferentes metodologias têm sido implementadas para a modulação das oscilações contínuas do EEG e para a exploração dos efeitos de tais modulações nos processos perceptuais e cognitivos, incluindo a apresentação da estimulação sensorial rítmica para induzindo o arrastamento neural. O termo arrastamento neural refere-se à sincronização da atividade neural com as propriedades periódicas dos estímulos sensoriais. Esse processo leva à geração de potenciais evocados de estado estacionário (i.e., oscilações do EEG bloqueadas às propriedades periódicas dos estímulos de condução). Os potenciais evocados de estado estacionário são os mais comumente elicitados pela estimulação visual, auditiva e vibrotátil, usando estímulos transitórios apresentados a uma taxa constante ou estimulação contínua modulada em amplitude na frequência de interesse. Considerando que os potenciais evocados somatosensory do estado estacionário (ssseps) são gravados em resposta à estimulação tátil repetitiva5,6, potenciais visualmente evocados de estado estacionário (ssveps) são geralmente eliciados pelo periódico apresentação de luminância Flickers, imagens e faces7,8. As respostas auditivas de estado estacionário (ASSRs) são geralmente geradas por trens de estímulos acústicos transitórios ou pela apresentação contínua de tons amplitude-modulados9,10.
A extração de potenciais evocados de estado estacionário do EEG medido baseia-se essencialmente na média dos epochs de EEG adquiridos subseqüentemente tempo-Locked ao estímulo11. Devido à periodicidade das respostas, elas podem ser analisadas nos domínios de tempo e frequência. Após a transformação de frequência-domínio, a resposta sensorial é observada como picos de amplitude na taxa de apresentação ou frequência de modulação dos estímulos externos, e seus correspondentes harmônicos. Estes procedimentos (média do tempo-domínio e a subsequente transformação do domínio de frequência) têm sido essenciais para o desenvolvimento de um teste auditivo baseado na detecção de métodos de ASSR com finalidades clínicas12,13,14 ,15,16.
Além disso, a média do tempo-domínio clássico de epochs de EEG tem sido extremamente útil para analisar processos fisiológicos tais como a geração e a extinção de ssvep17,18. Apresentando trens consecutivos de luzes de cintilação e média de épocas subseqüentes dentro de uma gravação, Wacker et al.19 observaram que o índice de bloqueio de fase do SSVEP aumentou rapidamente durante os primeiros 400 MS de estimulação e permaneceu alto depois . Igualmente relataram que o arrastamento visual robusto estêve estabelecido entre 700-1 100 ms após o início do estímulo. Um certo grau de arrastamento permaneceu efetivo após o deslocamento do trem de estimulação, que durou aproximadamente três períodos da resposta oscilatória17,18. Esses comportamentos têm sido interpretados como o efeito envolvente/desengajamento das oscilações observadas, o que é consequência do processamento de informações não lineares no sistema visual humano17. Alternativamente, sabe-se que determinadas condições experimentais, a estimulação da cintilação pode eliciar em-respostas no começo, e fora-respostas na extremidade de trens da estimulação em vez do arrastamento neural18.
A suposição principal a média consecutivamente adquiriu epochs de EEG é que o sinal de EEG representa uma combinação linear da resposta sensorial e do ruído de fundo20. Além disso, presume-se que a amplitude, a frequência e a fase da resposta oscilatória sejam estacionárias, enquanto o ruído de fundo é considerado como uma atividade aleatória. Entretanto, nos casos em que esta suposição não é satisfeita, a amplitude da resposta computada depois que diversos epochs não correspondem necessariamente à amplitude instantânea do potencial evocado.
Tem sido relatado recentemente que o ASSR gerado no tronco encefálico de ratos se adapta à apresentação contínua de tons modulados por amplitude (i.e., a amplitude de resposta diminui exponencialmente ao longo do tempo)21,22. A adaptação tem sido interpretada como um mecanismo neural que reflete a perda de novidade de um estímulo sensorial monótono repetitivo, aumentando a sensibilidade às flutuações relevantes no ambiente acústico23,24. Na via auditiva, a adaptação pode aumentar a compreensão da fala em ambientes ruidosos. Além disso, esse processo pode ser uma parte dos mecanismos existentes para monitorar o feedback auditivo da própria voz para controlar a produção da fala.
Analisando a evolução do tempo do 40 Hz ASSR em humanos, Van Eeckhoutte et al.25 observaram uma diminuição significativa mas pequena na amplitude de resposta ao longo do tempo (cerca de-0, 2 μV/s com base na análise do grupo, quando se assume uma diminuição linear ao longo do tempo). Conseqüentemente, estes autores concluíram que o 40 Hz ASSR em humanos não se adapta à estimulação. Nos seres humanos, comportamentos não estacionários têm sido observados ao analisar a estabilidade do SSVEP26. Esses autores observaram que a amplitude da frequência fundamental e a segunda harmônica do SSVEP foram estacionárias em apenas 30% e 66,7% dos sujeitos testados, respectivamente. As fases de ambos os componentes da freqüência de SSVEP, embora relativamente estáveis sobre o tempo, exibiram drifts pequenos26.
Conseqüentemente, embora a média clássica do tempo-domínio de épocas subseqüentemente adquiridas permita a exploração de propriedades estacionárias do arrastamento neural, esta metodologia precisa de ser revisada quando a dinâmica a longo prazo do arrastamento é o foco do pesquisa, ou quando a média da dinâmica de curto prazo é corrompida pela ocorrência de dinâmicas de longo prazo. Para caracterizar os comportamentos não estacionários das respostas do estado estacionário, a resposta evocada calculada em uma janela de tempo dada não deve ser comprometida por aquelas computadas nos segmentos precedentes de EEG. Em outras palavras, o potencial evocado deve ser extraído do ruído de fundo sem que o tempo-domínio seja em média com os segmentos de EEG precedentes.
Neste estudo, um método para avaliar a dinâmica da arrastamento neural é apresentado. As respostas de estado estacionário são gravadas repetitivamente em resposta à mesma estimulação, onde gravações consecutivas são intercaladas por um intervalo de repouso de três vezes o comprimento da corrida experimental. Considerando que, se a evolução temporal da resposta fisiológica for a mesma em diferentes ensaios experimentais independentes (gravações independentes), as gravações são médias em coluna. Em outras palavras, as epochs correspondentes ao mesmo local nas diferentes gravações são médias, sem a média de epochs dentro de uma gravação. Consequentemente, a amplitude de resposta calculada em qualquer intervalo de estimulação corresponderá à amplitude instantânea do potencial evocado. As respostas sensoriais podem ser analisadas no domínio temporal ou transformadas em domínio de frequência, dependendo do objetivo do experimento. Em qualquer caso, as amplitudes podem ser plotadas como uma função do tempo para analisar a evolução do tempo da resposta do estado estacionário. A geração e a extinção dos potenciais evocados de estado estacionário podem ser avaliadas restringindo a análise à primeira e última epochs das gravações.
A dinâmica do arrastamento neural pode ser analisada usando outras abordagens, como filtragem de banda estreita medições de teste único em torno da freqüência de interesse e computação do envelope do sinal de energia usando low-pass Filtragem25 e os Transformação de Hilbert27. Comparado a essas metodologias, a média em coluna de epochs permite computar parâmetros de estado estacionário com base em sinais com a maior relação sinal-ruído (SNR). Recentemente, a filtragem de Kalman surgiu como uma técnica promissora para a estimativa de 40-Hz ASSR amplitudes28,29,30. A implementação da filtragem de Kalman pode melhorar a detecção de respostas de estado estacionário mais perto do limiar eletrofisiológico e reduzir o tempo do teste auditivo29. Além disso, as respostas estacionárias não são necessárias para serem assumidas quando uma abordagem de filtragem de Kalman é usada para estimar a amplitude de ASSR30. No entanto, apenas um estudo analisou a evolução temporal dos ASSRs usando a filtragem de Kalman25. A conclusão do estudo é que a amplitude de 40-Hz ASSR é estável sobre o intervalo de estimulação. Conseqüentemente, a filtração de Kalman precisa de ser testada nas circunstâncias que o ASRR não é estacionário.
Embora demorada, o método de média de coluna é livre de modelo e não precisa de valores de inicialização e/ou a priori definições do comportamento de ruído. Além disso, desde que não envolva tempos da convergência, a média coluna-sábia pode fornecer uma respresentação mais de confiança do início do arrastamento neural. Conseqüentemente, os resultados obtidos com o método de média coluna-sábio podem ser considerados como a verdade à terra para analisar a dinâmica do arrastamento neural usando a filtração de Kalman.
Essa descrição do protocolo é baseada em um exemplo de SSVEP. No entanto, é importante notar que o método aqui apresentado é independente da modalidade, de tal forma que também pode ser usado para analisar a evolução do tempo de SSSEP e ASSR.
Este trabalho descreve um procedimento experimental para analisar a dinâmica das respostas cerebrais oscilatórias. Tal metodologia consiste em adquirir um número suficiente de ensaios experimentais independentes da mesma condição experimental, e os tempos-domínio média epochs correspondente ao mesmo tempo janela nas diferentes gravações (colunas-sábio média em Figura 1B). A amplitude computada nos dados da média representa a amplitude instantânea da resposta oscilatória. Plotar essas amplitudes como uma função do tempo (ou o número de colunas no conjunto de dados) permite analisar a evolução do tempo do tempo de resposta oscilatória-bloqueado para a estimulação. Esta metodologia é uma modificação do proposto por Ritter et al.23 para a análise da adaptação de potenciais evocados corticais transitórios. O método tem sido utilizado para analisar a dinâmica dos potenciais evocados auditivos em ambos os seres humanos24 e modelos animais20,21.
Do ponto de vista metodológico, a combinação de parâmetros utilizados para provocar a resposta do estado estacionário e aquelas implementadas para extrair a resposta neural do ruído de fundo é fundamental para analisar a evolução temporal dos potenciais evocados de estado estacionário 22. o comprimento do estímulo utilizado no experimento aqui apresentado (40 s) foi selecionado com base nos resultados obtidos em um estudo piloto. Esse comprimento de estímulo foi suficiente para analisar a adaptação de ASSR gerada no tronco encefálico21,22. Além disso, o comprimento do estímulo deve exceder o tempo em que o poder de banda instantânea assíptica de SSVEPs é atingido (Figura 1 em Labecki et al.26). No entanto, o poder da faixa instantânea assíptica de SSVEPs pode ser alcançado além dos anos 60 em alguns casos (Figura 2 em Labecki et al.26). Portanto, a execução de um estudo piloto de pequena amostra é recomendada para definir o comprimento do estímulo da estimulação. Caso contrário, um comprimento de estímulo maior do que 90 s é recomendado para alcançar a representação completa da evolução do tempo da resposta. O uso de pausas longas adequadamente entre gravações consecutivas implica considerar execuções experimentais consecutivas como sendo estatisticamente independentes (ou seja, medidas diferentes e independentes da mesma variável). Ao melhor de nosso conhecimento, nenhuma experimentação foi executada para analisar a pausa a melhor entre funcionamentos (a pausa mínima exigida para fazer funcionamentos independentes de se). O critério de usar pausas pelo menos 3x mais longo do que o comprimento do estímulo é conservador bastante para assegurar-se de que a resposta do steady-state gravada em todo o funcionamento dado não seja afetada pela estimulação precedente.
Recentemente, estímulos alternados (condições experimentais) têm sido propostos como uma escolha para reduzir a pausa entre ensaios experimentais, evitando o efeito de adaptação extra25. Da mesma forma, o número de ensaios experimentais (30) implementados neste protocolo experimental é conservador, uma vez que o RNL e o pSNR assíticos são tipicamente alcançados após uma média de 20 ensaios experimentais, aproximadamente. Quando os estímulos caem dentro da região meio-superior do intervalo dinâmico da resposta (níveis de sensação alta), um menor número de execuções provavelmente é necessário para analisar a dinâmica da resposta evocada. No entanto, nos casos em que diferentes condições experimentais são testadas, ter o mesmo número de ensaios experimentais é crucial para fazer comparações entre as condições (ou seja, diferentes níveis de sensação).
Além do que a média coluna-sábia dos epochs, a dinâmica de potenciais evocados oscilatórios foi analisada filtrando as medidas do único-teste em uma faixa de freqüência estreita em torno da freqüência do interesse e computando o envelope do poder sinal usando filtragem passa-baixa26. Da mesma forma, a análise experimental única foi implementada para caracterizar o período de transição que precede a região estável do SSVEP48, e as alterações na amplitude e na fase do ssvep durante a região estável da resposta49. Embora as análises de avaliação única permitam a discriminação de flutuações relativamente rápidas na amplitude de resposta, os designs experimentais para analisar a resposta média em blocos separados por um determinado intervalo de interblocos só respondem por variações de longo prazo no amplitude do potencial evocado50,51. A média de coluna-Wise de epochs está entre estas duas opções. Convertendo o sinal de média para o domínio de frequência usando o FFT implica analisar a dinâmica da resposta com uma resolução igual ao comprimento da época. No exemplo apresentado aqui, o SSVEP foi relatado cada 4 s. Embora 4 s de resolução seja adequada para descrever a dinâmica que ocorre em intervalos de tempo superando dezenas de segundos, como a do SSVEP26, as epochs parcialmente sobrepostas nas gravações originais permitem descrever a evolução do tempo do resposta de estado estacionário de forma mais refinada25.
A dinâmica das respostas do estado estacionário obtida após a média em coluna de epochs representa principalmente a evolução da atividade oscilatória que é sincronizada entre os segmentos médios de EEG (aqueles que sobrevivem à média). Portanto, uma questão importante sobre a viabilidade da metodologia é a possível atenuação das amplitudes de resposta devido a variações na fase de oscilações neurais de uma corrida experimental independente para outra (ou seja, entre as gravações). Este tópico precisa ser abordado experimentalmente. No entanto, evidências indicam que a fase de respostas oscilatórias cerebrais é menos variável do que o esperado. De fato, vários estudos relataram uma regularidade na fase esperada do ser humano 80 Hz ASSR47,48,49. Quando as latências são estimadas com base na fase da atividade oscilatória, observou-se o efeito previsível da intensidade e da frequência portadora dos estímulos acústicos sobre a latência das respostas auditivas (i.e., a diminuição da latência como a intensidade e aumento de frequência do portador)52,53,54. Além disso, alterações maturacionais típicas na amplitude e na assimetria da esquerda para a direita nos níveis auditivos também foram observadas quando as latências são estimadas a partir da fase do ASSR47,55,56 , 57 , 58. ao descrever a evolução do tempo do SSVEP utilizando uma análise de teste único, Labecki et al.26 observaram que, embora a variabilidade interexperimental das amplitudes de resposta dentro do mesmo assunto fosse consideravelmente alta, a variabilidade da fase foi significativamente menos pronunciada.
Com base em suas observações, Labecki et al.26 sugeriram que um mínimo de 50 ensaios deve ser em média para obter uma estimativa confiável do envelope de potência média da resposta. Esses resultados indicam que, mesmo quando a amplitude da resposta é computada em ensaios únicos, a média (de envelopes nesse caso) é necessária para relatar resultados confiáveis. Além disso, a variabilidade interexperimental na amplitude do SSVEP relatada por Labecki et al.26 sugere que o cálculo desse parâmetro em ensaios individuais pode ser altamente influenciado pelo ruído de fundo. Considerando a evolução da relação sinal-ruído apresentada na Figura 2, o cálculo da resposta no sinal de média em vez de ensaios simples reduz significativamente o número de segmentos de EEG necessários para serem processados para obter Medidas. Adicionalmente, a baixa variabilidade na fase obtida por Labecki et al.26 sustenta a ideia de que a média em coluna de epochs aqui apresentada é um procedimento válido para computar a dinâmica dos potenciais evocados oscillatórios.
A média dos dados em diferentes níveis leva a uma interpretação diferente dos resultados. Em relação aos potenciais evocados oscilatórios, computando a amplitude de resposta após a média do tempo de execução de execuções independentes implica analisar apenas oscilações de tempo bloqueado (ou seja, aquelas que sobrevivem à média). Este procedimento pode filtrar informações relevantes sobre a dinâmica da resposta em ensaios individuais. Entretanto, garantias uma relação sinal-à-ruído suficientemente elevada das medidas. Esse aspecto pode ser de significância quando as respostas estão próximas ao limiar eletrofisiológico, condição na qual a detecção do arrastamento pode ser comprometida devido à baixa relação sinal-ruído da medida.
The authors have nothing to disclose.
Os autores reconhecem graciosamente Lucía Zepeda, Grace A. Whitaker, e Nicolas Nieto por suas contribuições para a produção de vídeo. Este trabalho foi apoiado em parte pelos programas CONICYT BASAL FB0008, MEC 80170124 e bolsista de doutorado 21171741, bem como o Instituto Nacional de surdez e outros distúrbios da comunicação dos institutos nacionais de saúde o número de premiação P50DC015446. O conteúdo é unicamente da responsabilidade dos autores e não representa necessariamente os pontos de vista oficiais dos institutos nacionais de saúde.
Active electrodes | Biosemi | P32-1020-32ACMS (ABC) | for channels 1-32 |
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Laptop | Asus | Core i7 1TB DD + 128GB SSD 8GB RAM | computer for recording |
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