אוסף של hemolymph לתקתק נגוע, בלוטות הרוק, ורוק חשוב ללמוד איך לתקתק נישאים פתוגנים לגרום למחלה. בפרוטוקול זה אנו מדגימים כיצד לאסוף את בלוטות הרוק hemolymph ו מ האכלה<em> קרצית scapularis</em> נימפות. כמו כן, אנו מראים אוסף הרוק הנשי מ<em> א scapularis</em> מבוגרים.
קרציות נמצאות ברחבי העולם ליסר בני האדם עם קרצייה שמקורן מחלות רבות. קרציות הן וקטורים של פתוגנים הגורמים מחלת ליים וקרציות נישאים חום ההתקפי (Borrelia spp.), Rocky Mountain חום מנוקד (Rickettsia rickettsii), ehrlichiosis (Ehrlichia chaffeensis וא 'שוה), anaplasmosis (Anaplasma phagocytophilum), דלקת קרום המוח (קרציות וירוס דלקת המוח נישאים), babesiosis (Babesia spp.), קדחת קרציות קולורדו (Coltivirus), ו tularemia (Francisella tularensis) 1-8. כדי להיות מועבר כראוי לתוך המארח אלה גורמים מזהמים דיפרנציאלי לווסת את ביטוי הגנים, אינטראקציה עם חלבונים שנתות, ולהעביר דרך קרציות 3,9-13. כך, למשל, סוכן מחלת ליים, Borrelia burgdorferi, מתאים את עצמו דרך ביטוי גנים ההפרש לשלבים חג ורעב של מחזור enzootic של טיק 14,15. יתר על כן, כמו קרצייה קרצית צורכתbloodmeal Borrelia לשכפל לעבור מ midgut אל hemocoel, הם נוסעים בלוטות הרוק, והם מועברים אל המחשב המארח עם הרוק גורשו 9,16-19.
כמו קרציה הזנות מארח בדרך כלל מגיב בתגובה חיסונית חזקה עוצר דמום ובסיסיות 11,13,20-22. למרות תגובות אלה המארחות, י scapularis יכול להאכיל במשך כמה ימים, כי הרוק מכיל לתקתק חלבונים המערכת החיסונית, סוכני ממס, תרופות נגד קרישת דם, ו fibrinolysins כדי לסייע לתקתק האכלה 3,11,20,21,23. את פעילות המערכת החיסונית שבידי רוק לתקתק או תמצית בלוטת הרוק (SGE) להקל, העברת התרבות, והפצה של טיק שמקורן פתוגנים רבים 3,20,24-27. כדי להמשיך להבין כיצד לתקתק נישאים גורמים מזהמים גורמים למחלות חשוב לנתח באופן פעיל האכלה קרציות ולאסוף רוק לתקתק. זה פרוטוקול וידאו מדגים טכניקות הנתיחה עבוראוסף של hemolymph והסרת בלוטות הרוק של פעיל להאכיל א נימפות scapularis לאחר 48 ו – 72 שעות מיקום העכבר הודעה. כמו כן, אנו מראים אוסף הרוק מן הנקבה הבוגרת הראשונה scapularis לתקתק.
אוסף של hemolymph לתקתק, בלוטות הרוק, ורוק חשוב במחקר של שידור-Tick נישאים הפתוגן, שכיחות ההפצה, התפשטות, והתמדה לתקתק וגם מארח 6,11-13,20,23,29. ישנן מספר דרכים לנתח לתקתק 30,31. עם זאת, כאשר איסוף בלוטות הרוק חיוני לנתח לתקתק כמו שצריך אז בלוטות הרוק לא נקרע או אבד שרידים ש…
The authors have nothing to disclose.
המחברים מבקשים להודות חלוקת וקטור נישאים סניף מחלות בעלי חיים משאבים, במיוחד אנדראה פטרסון, ליסה Massoudi, ורנה או 'בראיין, וג'ון לידל עבור הטיפול בהם ותחזוקה של עכברים וארנבים. אנו רוצים גם להודות איימי אולמן, תרזה ראסל, ברברה ג''ונסון על תרומתם כלפי כתב היד הזה. לבסוף, ברצוננו להודות אליסה אקרט במשרד של מנהל שותף של תקשורת ב-CDC להפקת איורים גרפיים וג'ודי Lavelle על בימוי בכל העניינים המשפטיים הקשורים הצילומים של כתב היד הזה.
Reagent | Company | Catalogue Number |
Hydrogen peroxide | Fisher | H312-500 |
Ethanol | Acros | 61509-5000 |
PBS | Boston Bioproducts | BM-2205 |
Dumont Fine forceps (3C) | Fisher | NC9906085 |
Silane treated microscope slides | Bioworld | 42763007-1 |
Pap pen | Bioworld | 21750008-1 |
Super frost plus microscope slides | Fisher | 12-550-18 |
Pilocarpine | Sigma | P6503-5G |
Protease inhibitor cocktail | Sigma | P2714 |
#11 disposable scalpel | Feather | 2975#11 |
Nontoxic modeling clay | Fisher | S17307 |
Capillary tubes | Chase scientific Glass, inc | 40A502 |