اللعاب، الغدد اللعابية، وجمع اللمف الدموي من القراد اللبود الكتفي
Summary
جمع الدملمف القراد المصابة، والغدد اللعابية، واللعاب مهم لدراسة كيفية ينقلها القراد مسببات الأمراض تسبب المرض. في هذا البروتوكول نحن لشرح كيفية جمع الدملمف والغدد اللعابية من تغذية<em> اللبود الكتفي</em> الحوريات. علينا أن نبرهن أيضا جمع اللعاب من الإناث<em> أولا الكتفي</em> الكبار.
Abstract
تم العثور على القراد في جميع أنحاء العالم وتصيب البشر الذين يعانون من أمراض التي تنتقل بواسطة القراد كثيرة. القراد هي الناقلة لمسببات الأمراض التي تسبب مرض لايم والتي ينقلها القراد الحمى الراجعة (البورلية SPP).، الجبال الصخرية المبقعة (الريكتسية الريكتسية)، ehrlichiosis (الإيرليخية chaffeensis الخيلية وهاء)، anaplasmosis (Anaplasma phagocytophilum)، والتهاب الدماغ (القراد التي تنتقل عن طريق فيروس التهاب الدماغ)، البابيزيا (البابسية النيابة.)، كولورادو حمى القراد (Coltivirus)، وحمى الأرانب (الفرنسيسيلة التولارية) 1-8. إلى أن تنتقل بشكل صحيح في استضافة هذه العوامل المعدية تنظيم تفاضلي التعبير الجيني، والتفاعل مع البروتينات القراد، والهجرة من خلال وضع علامة 3،9-13. على سبيل المثال، وكيل مرض لايم، البورلية burgdorferi، يتكيف من خلال التعبير الجيني الفارق الى مراحل وليمة ومجاعة من دورة القراد في متوطن بالحيوانات 14،15. وعلاوة على ذلك، باعتباره علامة اللبود يستهلكbloodmeal البورلية تكرار والهجرة من المعى المتوسط في الجوف الدموي الأمامي، حيث يسافرون إلى الغدد اللعابية وتنتقل إلى المضيف مع لعاب طرد 9،16-19.
كما وضع علامة يغذي المضيف يستجيب عادة مع استجابة مناعية قوية مرقئ والفطرية 11،13،20-22. على الرغم من هذه الردود المضيفة، I. ويمكن تغذية الكتفي لعدة أيام بسبب لعاب القرادة يحتوي على البروتينات التي هي المناعية، وكلاء التحللي، مضادات التخثر، وfibrinolysins للمساعدة في تغذية 3،11،20،21،23 القراد. الأنشطة المناعية التي تمتلكها لعاب القراد أو مستخلص الغدة اللعابية (SGE) تسهيل انتقال والانتشار، ونشر مسببات الأمراض التي تنتقل بواسطة القراد العديد من 3،20،24-27. لمزيد من فهم الكيفية التي تنتقل بواسطة القراد العوامل المعدية تسبب المرض لا بد من تشريح بنشاط تغذية القراد وجمع لعاب القراد. هذا الفيديو يشرح تقنيات بروتوكول للتشريحجمع الدملمف وإزالة الغدد اللعابية من تغذية بنشاط أولا الحوريات الكتفي بعد 48 و 72 فأر آخر التنسيب ساعات. علينا أن نبرهن أيضا جمع اللعاب من I. البالغات الكتفي القراد.
Protocol
Discussion
جمع الدملمف القراد، الغدد اللعابية، واللعاب مهم في دراسة ينقلها القراد انتقال مسببات المرض وانتشاره، ونشر، والانتشار، والمثابرة في التجزئة على حد سواء والمضيف 6،11-13،20،23،29. هناك عدة طرق لتشريح وضع علامة 30،31. ومع ذلك، عندما جمع الغدد اللعابية من الأهمية ب?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
الكتاب أود أن أشكر شعبة المحمولة بالنواقل فرع أمراض الثروة الحيوانية، وتحديدا اندريا بيترسون، ليزا المسعودي، اوبراين فيرنا، وجون ليدل لرعايتهم والحفاظ على الفئران والارانب. ونود أيضا أن نشكر ايمي أولمان، تيريزا راسيل، وباربرا جونسون J. لما قدموه من مساهمات لتحقيق هذا المخطوط. أخيرا، نود أن نعترف العيسى إيكرت في مكتب المدير المساعد للاتصالات في مركز السيطرة على الأمراض لإنتاج الرسوم البيانية والرسوم التوضيحية لافيل جودي لتوجيه جميع الجوانب القانونية المرتبطة تصوير هذا المخطوط.
Materials
| Reagent | Company | Catalogue Number |
| Hydrogen peroxide | Fisher | H312-500 |
| Ethanol | Acros | 61509-5000 |
| PBS | Boston Bioproducts | BM-2205 |
| Dumont Fine forceps (3C) | Fisher | NC9906085 |
| Silane treated microscope slides | Bioworld | 42763007-1 |
| Pap pen | Bioworld | 21750008-1 |
| Super frost plus microscope slides | Fisher | 12-550-18 |
| Pilocarpine | Sigma | P6503-5G |
| Protease inhibitor cocktail | Sigma | P2714 |
| #11 disposable scalpel | Feather | 2975#11 |
| Nontoxic modeling clay | Fisher | S17307 |
| Capillary tubes | Chase scientific Glass, inc | 40A502 |
References
- Quach, K. A., Boctor, F. N., Elston, D. M. What’s eating you? Hyalomma ticks. Cutis. 87, 165-167 (2011).
- Graham, J., Stockley, K., Goldman, R. D. Tick-borne illnesses: a CME update. Pediatr. Emerg. Care. 27, 141-147 (2011).
- Nuttall, P. A., Paesen, G. C., Lawrie, C. H., Wang, H. Vector-host interactions in disease transmission. J. Mol. Microbiol. Biotechnol. 2, 381-386 (2000).
- Estrada-Pena, A., Jongejan, F. Ticks feeding on humans: a review of records on human-biting Ixodoidea with special reference to pathogen transmission. Exp. Appl. Acarol. 23, 685-715 (1999).
- Nuttall, P. A. Pathogen-tick-host interactions: Borrelia burgdorferi and TBE virus. Zentralbl Bakteriol. 289, 492-505 (1999).
- Jones, L. D., Hodgson, E., Nuttall, P. A. Enhancement of virus transmission by tick salivary glands. J. Gen. Virol. 70, 1895-1898 (1989).
- Labuda, M., Nuttall, P. A. Tick-borne viruses. Parasitol. 129, 221-245 (2004).
- Socolovschi, C., Mediannikov, O., Raoult, D., Parola, P. Update on tick-borne bacterial diseases in Europe. Parasite. 16, 259-273 (2009).
- Zhang, L., et al. Molecular Interactions that Enable Movement of the Lyme Disease Agent from the Tick Gut into the Hemolymph. PLoS Pathog. 7, e1002079 (2011).
- Piesman, J., Schneider, B. S. Dynamic changes in Lyme disease spirochetes during transmission by nymphal ticks. Exp. Appl. Acarol. 28, 141-145 (2002).
- Brossard, M., Wikel, S. K. Tick immunobiology. Parasitol. , S161-S176 (2004).
- Machackova, M., Obornik, M., Kopecky, J. Effect of salivary gland extract from Ixodes ricinus ticks on the proliferation of Borrelia burgdorferi sensu stricto in vivo. Folia Parasitol. 53, 153-158 (2006).
- Nuttall, P. A., Labuda, M. Tick-host interactions: saliva-activated transmission. Parasitol. 129, 177-189 (2004).
- Anguita, J., Hedrick, M. N., Fikrig, E. Adaptation of Borrelia burgdorferi in the tick and the mammalian host. FEMS Microbiol. Rev. 27, 493-504 (2003).
- Hovius, J. W., van Dam, A. P., Fikrig, E. Tick-host-pathogen interactions in Lyme borreliosis. Trends Parasitol. 23, 434-438 (2007).
- Dunham-Ems, S. M., et al. Live imaging reveals a biphasic mode of dissemination of Borrelia burgdorferi within ticks. Journal Clin. Invest. 119, 3652-3665 (2009).
- Ribeiro, J. M., Mather, T. N., Piesman, J., Spielman, A. Dissemination and salivary delivery of Lyme disease spirochetes in vector ticks (Acari: Ixodidae). J. Med. Entomol. 24, 201-205 (1987).
- Piesman, J. Transmission of Lyme disease spirochetes (Borrelia burgdorferi. Exp. Appl. Acarol. 7, 71-80 (1989).
- De Silva, A. M., Fikrig, E. Growth and migration of Borrelia burgdorferi in Ixodes ticks during blood feeding. Am. J. Trop. Med. Hyg. 53, 397-404 (1995).
- Horka, H., Cerna-Kyckova, K., Skallova, A., Kopecky, J. Tick saliva affects both proliferation and distribution of Borrelia burgdorferi spirochetes in mouse organs and increases transmission of spirochetes to ticks. Int. J. Med. Microbiol. 299, 373-380 (2009).
- Brossard, M., Wikel, S. K. Immunology of interactions between ticks and hosts. Med. Vet. Entomol. 11, 270-276 (1997).
- Wikel, S. K. Tick modulation of host immunity: an important factor in pathogen transmission. Int. J. Parasitol. 29 (99), 851-859 (1999).
- Binnington, K. C., Kemp, D. H. Role of tick salivary glands in feeding and disease transmission. Adv. Parasitol. 18, 315-339 (1980).
- Guo, X., et al. Inhibition of neutrophil function by two tick salivary proteins. Infect. Immun. 77, 2320-2329 (2009).
- Montgomery, R. R., Lusitani, D., De Boisfleury Chevance, A., Malawista, S. E. Tick saliva reduces adherence and area of human neutrophils. Infect. Immun. 72, 2989-2994 (2004).
- Lima, C. M., et al. Differential infectivity of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi derived from Ixodes scapularis salivary glands and midgut. J. Med. Entomol. 42, 506-510 (2005).
- Severinova, J., et al. Co-inoculation of Borrelia afzelii with tick salivary gland extract influences distribution of immunocompetent cells in the skin and lymph nodes of mice. Folia Microbiol. 50, 457-463 (2005).
- Labuda, M., Jones, L. D., Williams, T., Nuttall, P. A. Enhancement of tick-borne encephalitis virus transmission by tick salivary gland extracts. Med. Vet. Entomol. 7, 193-196 (1993).
- Kariu, T., Coleman, A. S., Anderson, J. F., Pal, U. Methods for Rapid Transfer and Localization of Lyme Disease Pathogens Within the Tick Gut. J. Vis. Exp. (48), e2544 (2011).
- Edwards, K. T., Goddard, J., Varela-Stokes, A. S. Examination of the internal morphology of the Ixodid tick Amblyomma maculatum koch, (Acari:Ixodidae); a “How-to” pictorial dissection guide. Midsouth Entomologist. 2, 28-39 (2009).
- Ledin, K. E., et al. Borreliacidal activity of saliva of the tick Amblyomma americanum. Med. Vet. Entomol. 19, 90-95 (2005).
- Ribeiro, J. M., Zeidner, N. S., Ledin, K., Dolan, M. C., Mather, T. N. How much pilocarpine contaminates pilocarpine-induced tick saliva?. Med. Vet. Entomol. 18, 20-24 (2004).
- Barker, R. W., Burris, E., Sauer, J. R., Hair, J. A. Composition of tick oral secretions obtained by three different collection methods. J. Med. Entomol. 10, 198-201 (1973).
- Burgdorfer, W. Hemolymph test. A technique for detection of rickettsiae in ticks. Am. J. Trop. Med. Hyg. 19, 1010-1014 (1970).
