初代ヒトナイーブおよびメモリーT細胞から誘導した調節性T細胞の生成

免疫CD4 ⁺制御性T細胞（Tregの）の開発と保守はで、人体の自己と共生抗原の膨大な量の免疫学的恒常性のままにするために必要な末梢性寛容に貢献しています。 Tregsのと炎症、従来のT細胞のバランスの乱れは、免疫病理や癌になる可能性があります。 Tregの治療注入大腸炎^1、I型糖尿病^2、関節リウマチ、移植片対宿主病は、ヒト対マウスTregの生物学⁵の⁴いくつかの根本的な違いのマウスモデルに有効であることが示されているが、これまでの臨床使用を排除しています。十分な数、純度、安定性と治療Tregのホーミング特異性の欠如は、彼らのex vivoでの拡張⁶のための条件を最適化する上で人間のTregの開発のダイナミックなプラットフォームを必要とした。

ここでは、Din vitroでの細胞培養と蛍光活性化末梢血単核細胞、CD4の磁気選択⁺ T細胞の分離、4つの段階に分けることができ、単一のヒト末梢血ドナーから誘導Tregsの（iTregs）の分化方法を傍接させるT細胞サブセットの細胞選別（FACS）。 Tregの署名の転写因子のフォークヘッドボックスのP3（Foxp3は）人間の⁷の活性化誘導転写因子および他のユニークなマーカーであるため存在しますが、マーカーの組み合わせパネルは抑制活性を有するT細胞を同定するために使用する必要があります。文化の中で6日後、私たちのシステムの細胞がナイーブT細胞は、CD25とCD45RAのそれらの相対的発現に基づいてメモリーT細胞またはiTregsに画定することができます。メモリなどとナイーブT細胞はCD45RA ⁺およびCD45RO ⁺サブセットができますbに初期のT細胞集団の事前選別は、別の報告偏光の要件と塑性挙動^8を持っているeは、これらの不一致を調べるために使用されます。他者との一貫性のある、私たちのCD25 ^{こんにちは} CD45RA ^– FoxP3の⁹のiTregs急行高レベル、GITRおよびCTLA-4 ¹¹およびCD127 ¹²の低レベル。各集団のFACSに続いて、得られた細胞は、カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（CFSE）で標識したT細胞自家の増殖を抑制するための相対的能力を評価し、抑制アッセイで使用することができます。