Kök-ur nematodları ile ekran bitkiler için iki farklı yöntem tarif edilmiştir. Açıklanan yaklaşımlar ıslah programlarında bu bitkilerin kullanımı kolaylaştıran bir zarar vermeden nematodlar ile yüksek verimlilik ekranlar yer alıyor.
Kök-ur nematodları (cinsi Meloidogyne) zorunlu bitki parazitlerdir. Bunlar son derece Polifag ve ekonomik açıdan en önemli bitki paraziti nematod biri kabul edilir. Yumurta bir kez tüy dökerler mikroskopik ikinci etap juvenil (J2), enfektif aşamasıdır. J2S, yumurtaları kırmayı bir su filmi içinde toprakta serbestçe hareket ve uygun bitki türlerinin kök uçları bulun. Bir yemleme sitesi kurmak ve onların stileleri kullanarak beslenmesi başlatırsak bitki kök nüfuz sonra, vasküler silindir doğru göç ederler. Çok hücreli besleme sitesi sitokinez olmadan karyokinesis (mitoz tekrarlanır) yapılan hücrelerden oluşur 'dev hücreler' olarak adlandırılan birkaç genişlemiş multinükleer hücreler oluşur. Komşu pericycle hücreleri bölmek ve büyüklüğü tipik bir safra veya kök düğüm, kök-ur nematod enfeksiyonunun karakteristik belirti yol vererek büyütmek. Sonra beslenme başlanır, J2S sedanter ve un halineyetişkin olmak için üç ek molts dergo. Yetişkin kadın kök yüzeyi üzerinde veya altında jelatinimsi bir matris içinde 150-250 yumurta bırakır. Yumurtadan yeni enfektif J2S yumurtadan çıkar ve yeni bir döngü başlayacak. Kök-ur nematodu ömrü 26-28 az 4-6 hafta içinde tamamlanır ° C
Burada kök-ur nematodları ve yüksek işlem deneyleri için iki yöntem ile saksıda yetiştirilen bitkiler, bulaştırmak için geleneksel protokolü sunarız. İkinci tür börülce ve fasulye gibi büyük tohum bitkilerinden için ise ilk yüksek verimli yöntem, domates gibi küçük tohumları ile bitkiler için kullanılır. Büyük tohum az besin takviyesi ile genişletilmiş fide büyümeyi desteklemektedir. İlk yüksek çıktı assay ikinci bir test bitkilerin toprağın yokluğunda torbalar içinde yetiştirilen ederken tepsilerde kum yetiştirilen fideler kullanmaktadır. Fide kılıf çekirdek veya fidelerinin yerleştirildiği bir 2-cm-derin çukur oluşturmak için üst kısmında katlandığında, bir 15.5 x 12.5cm kağıt fitil yapılmıştır.kağıt fitil şeffaf plastik poşet içinde bulunan. Bunlar büyüme poşetler şeffaf bir torba yüzeyinin altında, kök ve yumurta seri üretim incitici nematod enfeksiyonu semptomları, doğrudan gözlem sağlar. Her iki yöntem de üretim geçme ya tohumu, fenotipleme sonra, elenmiş bitkilerin kullanımına izin verir. Poşet rafları düzenlenen plastik asılı klasörlerde saklanır çünkü büyüme torbaların kullanımının bir avantajı küçük bir yer gereksinimi olduğunu.
Oldukça enfektif inokulum ve uygun gelişim aşamasında bitkileri kullanarak hazırlanması: Başarılı bir nematod ekran için iki önemli adım vardır. Kök-ur nematodu yumurta açılma oranı 5 arasında oldukça değişken ve aralıkları – 50%. Bu nedenle kapak ve yüksek infektif J2S optimum seviyeleri elde etmek için, yakın ilgi ve kuluçkalık yumurta çıkarma işlemlerine ödenmelidir. Yumurta en az bir süre için ağartıcı maruz edilmeli ve ağartıcı kök karışımından de yıkanır edilmelidir. Kuluçka sırasında yumurta, yumurta içeren bulamaç suya edilmemelidir. Buna ek olarak, yumurtadan yavru toplanır yatan Petri tabağı içine dökülüp yumurta önlemek. Kuluçka işlemi sırasında yumurta dökülmesini önlemek için bir yolu kağıt bozabilecek olarak Kimwipe doğrudan su eklemek değildir. Bunun yerine Petri kabı doğrudan su ekleyin.
En iyi sonuç için, taze yumurtadan J2S kullanın. Eğer hatch oranı düşüktür ve daha inokulum gerektirir, J2S uzun bir süre için 15 ° C'de saklanabilir. Aşılama öncesi nematodların canlandırmak için oda sıcaklığında saklanan inokulum ısıtın. Ancak, hatta 15 yaşında uzun süre J2S saklamiyoruz ° C hasret J2S verimli enfekte olmayacak gibi.
Genç fidanlar kök-ur nematodu aşılama için en iyi gelişim aşaması vardır. Ancak, bu J2S için giriş noktaları olarak kök uçları yeterli sayıda sağlayan yeterli bir kök sistemi oluşumu ile dengeli olmalıdır. Optimal bitki gelişimi durumu korunması da ekranlar için önemlidir. Özel poşetler içinde büyüyen bu aşırı sulanma bitkilerin kaçının. Torbalar Aşırı sulama, mantar gibi büyüme teşvik ve kök sağlık azaltabilir, kese dibinde su birikintileri ile gösterilir.
Testler daha nematod enfeksiyonunun değerlendirilmesi ve yumurta / kök sistemi ve yumurta sayısının hesaplanmasında her ikisi ile / gram freSH kök gerçekleştirilebilir. Domates testlerde, bireysel kökler tartılır ve çıkarılan yumurta gibi inokulum hazırlanması (bölüm 3) nitelendirdi. Bitki örneklerinin çok sayıda işlerken, bireysel kök sistemleri yumurta çıkarılması için bir blender kullanılarak yumuşatılır olabilir. Yumurta sayısı en azından üç alikots içinde sayılır ve taze kök sistemi yumurta / gram hesaplanan edilmelidir. Kese testlerde, kök sistemi, kağıt ekleme çıkardı tartılır ve yumurta elde edilir.
The authors have nothing to disclose.
Kaloshian laboratuar Araştırma Gıda ve Tarım Birleşik Devletleri Ulusal Enstitüsü (2007-35607-17765) bir hibe ile finanse edilmektedir. Roberts laboratuarında Araştırma Uluslararası Kalkınma Birleşik Devletleri Ajansı hibe (GDG-G-00-02-00012-00 ve EDH-A-00-07-00005) ve Kaliforniya Kuru Fasulye Danışma Kurulu tarafından finanse edilmektedir.
Compound | Concentration |
KNO3 | 5 mM |
Ca(NO3)2 • 4 H2O | 5 mM |
MgSO4 • 7H2O | 2 mM |
KH2PO4 | 1 mM |
Hamp-ene Fe EDTA 13.0% | 1 mM |
H3BO3 | 46 μM |
MnCl2 • 4H2O | 9 μM |
ZnSO4 • 7H2O | 0.00076 μM |
CuSO4 • 5H2O | 0.00032 μM |
(NH4)6Mo7O24 • 4H2O | 0.00016 μM |
Table 1. Reagents for Hoagland’s solution.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
Erioglaucine | Fisher | AC22973-0250 | |
Miracle-Gro for tomato | Scotts Miracle-Gro | 18-18-21 | |
Osmocote | Scotts Miracle-Gro | ||
Seedling growth pouches | Mega International | ||
Sieve 25 μm | H & C Sieving Systems | 3886 | US standard #500 |
Sieve 90 μm | H & C Sieving Systems | 3880 | US standard #170 |
Sieve 425 μm | H & C Sieving Systems | 3871 | US standard #40 |
Sunshine mix | Sun Gro Horticulture Canada |
Table 2. Table of specific reagents and equipment.