Summary

La determinación de la reactividad y el título de suero utilizando un ensayo de hemaglutinación

Published: January 29, 2010
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Summary

Hemaglutinación es una forma de aglutinación de los anticuerpos se unen a los glóbulos rojos. Los glóbulos rojos están disponibles de inmediato y los resultados son fácilmente observables a simple vista. Este video muestra los pasos a seguir en un ensayo de hemaglutinación, la interpretación de los resultados y determinar el título.

Abstract

Hemaglutinación es una forma específica de aglutinación y se utiliza cuando los anticuerpos se unen a los glóbulos rojos, que actúan como antígenos de partículas. Los glóbulos rojos son blancos particularmente útiles, ya que son fácilmente disponibles y la aglutinación es observable a simple vista. Esta técnica se utiliza comúnmente para determinar el título de un anticuerpo (Ab), para la determinación de grupos sanguíneos y la cuantificación viral. En este video, los pasos a seguir en la preparación y la realización de un ensayo de hemaglutinación se demuestra el uso de anticuerpos específicos de antígenos de grupo sanguíneo A agregado a los glóbulos rojos (Revercells). El antisuero se diluyen en serie en un 96 y U-abajo la bandeja de microtitulación, al que se añade una suspensión de Revercells. Las muestras se mezclaron y se incubaron a 37 º C durante 60 minutos. Después de este tiempo, las muestras pueden ser fácilmente anotó para ve, ve + e intermedios hemaglutinación reacciones (-/+). Este enfoque permite la reactividad y el título de una muestra de suero que se evaluó a través de una técnica rápida y sencilla. El vídeo cubre la teoría detrás de la prueba, como los resultados son leídos e interpretados, ¿cómo determinar el título, como el ensayo se pueden modificar y todo lo relacionado con el uso de esta técnica.

Protocol

Preparación de 5x buffer salino veronal (VBS) Para preparar la solución salina tamponada con veronal (VBS), tres soluciones distintas que estar preparados. Prepare una solución de 1 por disolución de NaCl y 21.25gm 0.94gm de barbital sódico en 350 ml de agua destilada. Las concentraciones finales de la barbitona NaCl y de sodio son 1.02m y 13 mm respectivamente. Prepare una solución de 2 por disolución de 1.44gm barbitona en 125 ml de agua destilada caliente. La concentración final…

Discussion

La hemaglutinación es una técnica muy sencilla que permite un gran número de muestras de suero a evaluar en un corto período de tiempo. También tiene la ventaja de ser leído sin necesidad de equipo especializado, con el ojo que está siendo adecuada. Esta técnica también puede ser modificado para la detección de la hormona gonadotropina coriónica humana en la orina, como parte de una prueba de inhibición de la hemaglutinación. En relación con una prueba de hemaglutinación estándar, hay algunas áreas dond…

Acknowledgements

El autor desea agradecer a la Srta. Lora Matthews para la realización de la técnica y el Sr. Pablo Pastor de la cinematografía. Este proyecto fue financiado por la Universidad de Australia del Sur, el programa de Medicina de Laboratorio.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Revercells   CSL 02490201 Use at 1% final
Anti-A serum   CSL 02611305  
96 well U bottom plate   TRP 92097 Must be U-bottom
Veronal buffered saline       Use at 1x final
37°C room/incubator        
Disposable gloves        

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Cite This Article
Costabile, M. Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay. J. Vis. Exp. (35), e1752, doi:10.3791/1752 (2010).

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