Summary

تحديد التفاعل وعيار من المصل باستخدام الفحص Haemagglutination

Published: January 29, 2010
doi:

Summary

Haemagglutination هو شكل من أشكال تراص حيث ربط الأجسام المضادة خلايا الدم الحمراء. خلايا الدم الحمراء على حد سواء متوفرة بسهولة ويمكن ملاحظتها بسهولة النتائج باستخدام العين المجردة. هذا الفيديو يوضح الخطوات المتبعة في فحص haemagglutination ، وتفسير النتائج وتحديد عيار.

Abstract

Haemagglutination هو شكل محدد من تراص وتستخدم الأجسام المضادة عند ربط خلايا الدم الحمراء ، والتي تكون بمثابة مستضد الجسيمات. خلايا الدم الحمراء هي أهداف مفيدة بشكل خاص لأنها متاحة بسهولة ، ويمكن ملاحظتها تراص باستخدام العين المجردة. ويشيع استخدام هذه التقنية لتحديد عيار وجود الأجسام المضادة (AB) ، لتجميع الدم والكمي الفيروسي. في هذا الفيديو ، ويتجلى في الخطوات المتبعة في إعداد وإجراء مقايسة haemagglutination باستخدام الاجسام المضادة المحددة لفئة الدم A المستضدات المضافة لخلايا الدم الحمراء (Revercells). غير المخفف متسلسل للمصل في 96 علبة جيدا microtitre U – القاع ، والتي يتم إضافة تعليق Revercells. يتم خلط العينات والمحتضنة ثم عند 37 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة. بعد هذا الوقت ، يمكن عندئذ أن تكون هذه العينات وسجل بسهولة لهاء ، هاء + وردود الفعل وسيطة haemagglutination (-/+). هذا النهج يتيح التفاعل وعيار عينة مصل ليتم تقييمها باستخدام تقنية سريعة وبسيطة. وسوف تغطي الفيديو نظرية وراء مقايسة ، وكيف تتم قراءة النتائج وتفسيرها ، وكيف يتم تحديد عيار ، وكيف يمكن تعديل أي مقايسة والقضايا المرتبطة باستخدام هذه التقنية.

Protocol

إعداد المالحة Veronal 5X التخزين المؤقت (VBS) لإعداد المالحة Veronal التخزين المؤقت (VBS) ، وثلاثة حلول فصل ابد أن نكون مستعدين. 1 إعداد حل عن طريق إذابة 21.25gm من كلوريد الصوديوم و0.94gm باربيتون من الصوديوم …

Discussion

في مقايسة haemagglutination هي تقنية بسيطة جدا التي تسمح لعدد كبير من العينات التي سيتم تقييمها مصل في غضون فترة قصيرة من الزمن. كما أن لديها ميزة كونها قراءة دون الحاجة إلى المعدات المتخصصة ، مع العين يجري مناسبة. ويمكن أيضا أن يتم تعديل هذه التقنية للكشف عن هرمون موجهة للغدد…

Acknowledgements

ويود الكاتب أن أشكر الآنسة لورا ماثيوز لأداء هذه التقنية ، والسيد بول الراعي لصناعة السينما. وقد تم تمويل هذا المشروع من قبل جامعة جنوب أستراليا ، مختبر برنامج الطب.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Revercells   CSL 02490201 Use at 1% final
Anti-A serum   CSL 02611305  
96 well U bottom plate   TRP 92097 Must be U-bottom
Veronal buffered saline       Use at 1x final
37°C room/incubator        
Disposable gloves        

Play Video

Cite This Article
Costabile, M. Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay. J. Vis. Exp. (35), e1752, doi:10.3791/1752 (2010).

View Video