Het bepalen van de reactiviteit en de titer van Serum met behulp van een hemagglutinatie Assay
Summary
Hemagglutinatie is een vorm van agglutinatie waar antilichamen binden aan rode bloedcellen. Rode bloedcellen zijn zowel direct beschikbaar en de resultaten zijn gemakkelijk waarneembare met het blote oog. Deze video toont de stappen die betrokken zijn bij een hemagglutinatie assay, het interpreteren van de resultaten en het bepalen van de titer.
Abstract
Hemagglutinatie is een specifieke vorm van agglutinatie en wordt gebruikt wanneer antilichamen binden aan de rode bloedcellen, die fungeren als een fijn antigeen. Rode bloedcellen zijn bijzonder nuttig doelen zoals ze zijn direct beschikbaar en agglutinatie is waarneembaar met het blote oog. Deze techniek wordt vaak gebruikt om de titer van een antilichaam (Ab), voor bloedgroepen en virale kwantificering te bepalen. In deze video, is de stappen die betrokken zijn bij de voorbereiding en het uitvoeren van een hemagglutinatie assay aangetoond met behulp van antilichamen die specifiek zijn voor bloedgroep A-antigenen toegevoegd aan rode bloedcellen (Revercells). Het antiserum is serieel verdund in een 96 wells U-bodem microtiterplaten tray, waaraan is toegevoegd een suspensie van Revercells. De monsters worden gemengd en vervolgens geïncubeerd bij 37 ° C gedurende 60 minuten. Na deze tijd kan de samples dan gemakkelijk worden gescoord voor ve, + ve en intermediaire (-/+) hemagglutinatie reacties. Deze aanpak maakt het mogelijk om reactiviteit en titer van een serum monster te worden beoordeeld met behulp van een snelle en eenvoudige techniek. De video zal betrekking hebben op de theorie achter de test, hoe de resultaten worden gelezen en geïnterpreteerd, hoe de titer te bepalen, hoe de test kan worden gewijzigd en alle kwesties in verband met het gebruik van deze techniek.
Protocol
Discussion
De hemagglutinatie test is een zeer eenvoudige techniek die het mogelijk maakt voor een groot aantal van de serum monsters worden beoordeeld in een korte periode van tijd. Het heeft ook het voordeel dat het lezen zonder de noodzaak voor gespecialiseerde apparatuur, met de ogen geschikt zijn. Deze techniek kan ook worden aangepast voor de detectie van humaan chorion gonadotrofine hormoon in de urine aanwezig is, als onderdeel van een hemagglutinatieremmingstest. Met betrekking tot een standaard hemagglutinatie-test, zijn…
Acknowledgements
De auteur wil graag Miss Lora Matthews bedanken voor het uitvoeren van de techniek en de heer Paul Shepherd voor de cinematografie. Dit project werd gefinancierd door de Universiteit van Zuid-Australië, Laboratoriumgeneeskunde programma.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Revercells | CSL | 02490201 | Use at 1% final | |
| Anti-A serum | CSL | 02611305 | ||
| 96 well U bottom plate | TRP | 92097 | Must be U-bottom | |
| Veronal buffered saline | Use at 1x final | |||
| 37°C room/incubator | ||||
| Disposable gloves |
