Summary

קביעת ריאקטיביות Titre של סרום באמצעות Assay Haemagglutination

Published: January 29, 2010
doi:

Summary

Haemagglutination היא סוג של התלכדות שבו הנוגדנים להיקשר לתאי דם אדומים. כדוריות הדם האדומות הן וזמין והתוצאות נצפות בקלות באמצעות בעין בלתי מזוינת. סרט הווידאו הזה ממחיש את שלבים ב assay haemagglutination, לפרש את התוצאות וקביעת titre.

Abstract

Haemagglutination היא צורה ספציפית של התלכדות והוא משמש כאשר נוגדנים נקשרים לתאי דם אדומים, אשר פועלים כמו אנטיגן חלקיקי. כדוריות דם אדומות מטרות שימושי במיוחד כאשר הם זמינים ו התלכדות הוא הנצפה באמצעות בעין בלתי מזוינת. טכניקה זו משמשת בדרך כלל כדי לקבוע את titre של נוגדן (AB), עבור קיבוץ דם וכימות ויראלי. בסרטון הזה, השלבים מעורבים בהכנת וביצוע assay haemagglutination מודגמת באמצעות נוגדנים ספציפיים לקבוצת דם A-אנטיגנים להוסיף כדוריות דם אדומות (Revercells). Antiserum הוא מדולל סדרתי בתוך מגש 96 גם microtitre U-התחתונה, שאליו מתווסף השעיה של Revercells. דגימות הן מעורבות מודגרות אז 37 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות. לאחר תקופה זו, הדגימות אז יכול להיות הבקיע בקלות יש, יש + ביניים התגובות (-/+) haemagglutination. גישה זו מאפשרת תגובתיות ו titre מדגם בסרום להיות מוערך באמצעות טכניקה מהירה ופשוטה. הווידאו יכסה את התיאוריה מאחורי assay, איך התוצאות לקרוא ולפרש, איך titre נקבע, כיצד assay יכולות להיות משונות כל הנושאים הקשורים לשימוש בטכניקה זו.

Protocol

הכנת תמיסת מלח 5x שנאגרו ורונל (VBS) כדי להכין את תמיסת מלח שנאגרו ורונל (VBS), שלושה פתרונות שונים צריכים להיות מוכנים. הכן פתרון 1 על ידי המסת 21.25gm של NaCl ו 0.94gm של Barbitone נתרן 350ml של מים מזוקקים. הריכו…

Discussion

Assay haemagglutination היא טכניקה פשוטה המאפשרת למספר רב של דגימות נסיוב להיות מוערך בתוך פרק זמן קצר. כמו כן, יש את היתרון של להיות לקרוא ללא צורך בציוד מיוחד, עם העין להיות מתאים. טכניקה זו יכולה גם להיות שונה לצורך זיהוי של ההורמון האנושי gonadotrophin כוריוני בשתן, כחלק מבחן haemagglutin…

Acknowledgements

המחבר מבקש להודות מיס לורה מתיוס לביצוע הטכניקה ומר פול שפרד עבור הצילום. פרויקט זה מומן על ידי אוניברסיטת דרום אוסטרליה, תוכנית המעבדה לרפואה.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Revercells   CSL 02490201 Use at 1% final
Anti-A serum   CSL 02611305  
96 well U bottom plate   TRP 92097 Must be U-bottom
Veronal buffered saline       Use at 1x final
37°C room/incubator        
Disposable gloves        

Play Video

Cite This Article
Costabile, M. Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay. J. Vis. Exp. (35), e1752, doi:10.3791/1752 (2010).

View Video