Die Bestimmung der Reaktivität und Titre von Serum mit einem Hämagglutinations Assay
Summary
Hämagglutinations ist eine Form der Agglutination, wo Antikörper binden an roten Blutkörperchen. Rote Blutkörperchen sind beide verfügbar und die Ergebnisse sind leicht beobachtbaren mit dem bloßen Auge. Dieses Video zeigt die Schritte in einer Hämagglutination Test beteiligt sind, die Interpretation der Ergebnisse und die Bestimmung der Titer.
Abstract
Hämagglutinations ist eine spezifische Form der Agglutination und wird verwendet, wenn Antikörper gegen rote Blutkörperchen, die als Partikel Antigen wirken zu binden. Rote Blutkörperchen sind besonders nützlich, Ziele, da sie leicht verfügbar sind und die Agglutination zu beobachten ist mit dem bloßen Auge. Diese Technik wird häufig verwendet, um den Titer eines Antikörpers (Ab), für die Blutgruppenbestimmung und virale Quantifizierung zu bestimmen. In diesem Video werden die Schritte bei der Vorbereitung und Durchführung einer Hämagglutination Test beteiligten demonstriert mit spezifischen Antikörpern gegen Blutgruppe A-Antigene hinzugefügt, um rote Blutkörperchen (Revercells). Das Antiserum wird seriell in eine 96-Well U-Boden Mikrotiterplatten Tablett verdünnt, an dem eine Aussetzung der Revercells aufgenommen. Die Proben werden gemischt und dann bei 37 ° C für 60 Minuten. Nach dieser Zeit können die Proben dann leicht ve, + ve und Zwischenprodukte (-/+) Hämagglutination Reaktionen erzielt werden. Dieser Ansatz ermöglicht die Reaktivität und die Titer von einer Serumprobe zu beurteilen mit einem schnellen und einfachen Technik. Das Video nimmt die Theorie hinter der Test, wie die Ergebnisse gelesen und interpretiert, wie der Titer bestimmt wird, wie der Test geändert werden können und alle Probleme mit dem Einsatz dieser Technik verbunden sind.
Protocol
Discussion
Die Hämagglutination-Assay ist eine sehr einfache Technik, die für eine große Anzahl von Serumproben, um innerhalb kurzer Zeit beurteilt werden können. Es hat auch den Vorteil, dass ohne die Notwendigkeit spezieller Ausrüstung zu lesen, mit dem Auge geeignet. Diese Technik kann auch für den Nachweis von humanem Chorion-Gonadotropin Hormon im Urin modifiziert werden, als Teil einer Hämaglutinationshemmungstest. In Bezug auf einen Standard Hämagglutinationstest, es gibt ein paar Bereiche, in denen darauf zu, um f?…
Acknowledgements
Der Autor bedankt sich bei Frau Lora Matthews für die Durchführung der Technik und Herr Paul Shepherd für Kinematographie danken. Dieses Projekt wurde von der University of South Australia, Laboratoriumsmedizin Programm gefördert.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Revercells | CSL | 02490201 | Use at 1% final | |
| Anti-A serum | CSL | 02611305 | ||
| 96 well U bottom plate | TRP | 92097 | Must be U-bottom | |
| Veronal buffered saline | Use at 1x final | |||
| 37°C room/incubator | ||||
| Disposable gloves |
