Reestenose imagem In-Stent: Um Barato, modelo confiável, rápida e pré-clínicos

Implantação de stent de aorta Masculino Sprague-Dawley pesando 550-600 g forem comprados de Harlan (Indianapolis, IN, EUA). Ratos casa em condições convencionais, alimentados padrão ração e água ad libitum. Anestesiar ratos com isoflurano (2%) e ketamina (25 mg / kg). Sob visão microscópica, realizar uma mini-laparotomia mediana superior para expor a aorta infra-renal. Dissecar a aorta abdominal do tecido circundante, desde o nível das artérias renais até a bifurcação. ATENÇÃO: Não há necessidade de dissecar a aorta do IVC. Use microclamps para parar o fluxo sanguíneo na aorta. Coloque a braçadeira proximal primeiro lugar, seguido pela fixação distal. Abra a aorta com uma pequena incisão transversal e lave a aorta com heparina (200 unidades). O endotélio da aorta é desnudada pela passagem de um 2-francês cateter Fogarty embolectomia arterial (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, EUA). Use qualquer tamanho humano stent entre 8mm e 12mm de comprimento, e 2,5 mm-3mm de diâmetro. ATENÇÃO: O diâmetro do stent não deve exceder o diâmetro do vaso em mais de 10% para evitar estenose pré e pós-stent. ATENÇÃO: Não ligue extensão do stent dentro do mesmo estudo. Implantar o stent com o balão de pressão adequadas para atingir o diâmetro desejado. A incisão aórtica pequena é fechada com suturas 9-0 Prolene (Ethicon, Norderstedt, Alemanha). Fechar a incisão abdominal em camadas com Vicryl 4-0 sutura (Ethicon, Norderstedt, Alemanha). As suturas de pele ainda deve ser removido dentro de 7-14 dias, mesmo quando Viacryl é usado. Animais receberam carprofeno (6mg/kg) no intra-operatório, e metamizol por mais 7 dias na água de beber. Tomografia de Coerência Óptica (OCT) Imaging Imagens outubro são obtidos com o sistema de outubro M2 imagem (LightLab Imaging, Inc., Westford, MA, EUA). ImageWire é uma sonda de imagem para fornecer a luz para o tecido e recolher os sinais. O ImageWire consiste de 0,006 "(0,15 mm) de fibra ótica do núcleo, dentro de uma bainha com um OD máximo de 0,019" (0,48 mm). Anestesiar ratos com isoflurano (2%) e ketamina (25 mg / kg). Sob visão microscópica, realizar uma laparotomia mediana refazer para expor a aorta infra-renal. Pinça da aorta proximal e ambos artéria ilíaca. Realizar uma arteriotomia transversa na extremidade distal da aorta, lave com 1ml de PBS com cateter 28G e insira o cateter outubro e enviá-lo para a aorta. Pullback motorizado outubro de imagem é realizada a uma taxa de retração de 1,0 mm por segundo. Adquirir imagens a 15 frames por segundo, as imagens são exibidas com uma cor tabela look-up e digitalmente arquivados. Feche a arteriotomia. Fechar o abdominal e incisões com Vicryl 4-0 sutura (Ethicon, Norderstedt, Alemanha). As suturas de pele ainda deve ser removido dentro de 7-14 dias, mesmo quando Viacryl é usado. A formação da neoíntima máximo irá desenvolver dentro de 6 semanas após o implante de stent. Análise de imagens outubro Medições de outubro são realizadas utilizando o software de imagem LightLab outubro de propriedade com uma interface baseada em ratos. Calibrar o sistema para o reflexo da imagem fio outubro, que é a técnica de calibração padrão para este sistema. Traço lúmen e stent áreas das secções transversais (CSA) manualmente em cada intervalos de 1,0 mm. Calcular a área de placa transversal como CSA stent subtraído do CSA lúmen. Calcular a área por cento da placa, placa CSA, dividido pelo CSA stent (%). Calcular áreas de placa médio por cento. Validação da técnica outubro Resultados outubro correlaciona bem com a histopatologia (Figura 1). CSAs placa histológicos são calculados como descrito acima. Histologia revela hiperplasia intimal com alta densidade de células fusiformes e apenas poucas células mononucleares da inflamação. Após 6 semanas, os stents são completamente cobertas com tecido de granulação neointimal eo CSA placa medidas 1,3 ± 0,4 mm 2 em um stent de 2,5 mm. Figura 1: OCT (A) e histológico (B; ampliação de 16x) imagens do stent seis semanas após a implantação. Resultados obtidos a partir de placas CSA imagens outubro correlaciona bem com histopatologia. Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada da figura 1.