Imágenes de reestenosis intra-stent: un modelo barato, preclínicos fiable, rápida y

Despliegue del stent aórtico Ratas Sprague-Dawley de peso 550-600 g son comprados a Harlan (Indianapolis, IN, EE.UU.). Casa ratas bajo condiciones convencionales, alimentados con comida de rata estándar y agua ad libitum. Anestesiar la rata con isoflurano (2%) y ketamina (25 mg / kg). Bajo visión microscópica, realizar una media superior de la mini-laparotomía para exponer la aorta infrarrenal. Disecar la aorta abdominal del tejido circundante, desde el nivel de las arterias renales hasta la bifurcación. PRECAUCIÓN: No hay necesidad de diseccionar la aorta de la IVC. Use microclamps para detener el flujo sanguíneo aórtico. Coloque la pinza proximal en primer lugar, seguido de la pinza distal. Abra la aorta con una incisión transversal pequeña y al ras de la aorta con la heparina (200 unidades). El endotelio aórtico es despojado por el paso de un catéter de 2-francés Fogarty embolectomía arterial (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, EE.UU.). Utilice cualquier tamaño humano stent entre 8 mm y 12 mm de longitud, y de 2,5 mm-3mm de diámetro. PRECAUCIÓN: El diámetro de la endoprótesis no debe exceder el diámetro de los vasos más de un 10% para evitar la estenosis pre-y post-stent. PRECAUCIÓN: No cambie la longitud del stent dentro del mismo estudio. Desplegar el stent utilizando la presión del balón apropiado para lograr el diámetro deseado. La incisión pequeña aórtica se cierra con suturas de Prolene 9-0 (Ethicon, Norderstedt, Alemania). Cerrar la incisión abdominal en capas con suturas de Vicryl 4-0 en ejecución (Ethicon, Norderstedt, Alemania). La sutura de la piel aún debe ser retirado dentro de 7-14 días, incluso cuando se utiliza Viacryl. Los animales recibieron carprofeno (6mg/kg) durante la operación, y Metamizol durante 7 días más en el agua potable. Tomografía de coherencia óptica (OCT) de imágenes Las imágenes de OCT se obtienen con el sistema de imágenes M2 octubre (LightLab Imaging, Inc., Westford, MA, EE.UU.). ImageWire es una sonda de imagen para ofrecer la luz a los tejidos y recoger las señales. El ImageWire consta de 0,006 "(0,15 mm) de fibra óptica de núcleo, dentro de una funda con un diámetro exterior máximo de 0,019" (0,48 mm). Anestesiar la rata con isoflurano (2%) y ketamina (25 mg / kg). Bajo visión microscópica, realizar una laparotomía mediana rehacer para exponer la aorta infrarrenal. Abrazadera de la aorta proximal y ambas arterias ilíacas. Realizar una arteriotomía transversal en el extremo distal de la aorta, a ras de 1 ml de PBS utilizando un catéter de 28G e inserta el catéter octubre y lo remitirá a la aorta. Motorizados retirada octubre de imágenes se realiza a una velocidad de retroceso de 1,0 mm por segundo. Adquirir imágenes a 15 fotogramas por segundo, las imágenes se muestran con un color look-up table y archivados digitalmente. Cierre de la arteriotomía. Cierre el abdomen y las incisiones con suturas de Vicryl 4-0 en ejecución (Ethicon, Norderstedt, Alemania). La sutura de la piel aún debe ser retirado dentro de 7-14 días, incluso cuando se utiliza Viacryl. La máxima formación de la neoíntima se desarrollará dentro de las 6 semanas después del implante del stent. El análisis de las imágenes de OCT Las mediciones de octubre se realizan utilizando el software de imágenes LightLab octubre de propiedad con una interfaz basada en la rata. Calibrar el sistema a la reflexión del cable octubre de imagen, que es la técnica de calibración estándar para este sistema. Traza luz y el stent áreas de sección transversal (CSA) de forma manual en cada uno de los intervalos de 1,0 mm. Calcular el área de la placa de la sección transversal como AT del stent resta de la CSA luz. Calcular el área de la placa por ciento como AT de la placa, dividido por AT del stent (%). Calcular promedio de áreas de placa por ciento. La validación de la técnica de octubre Resultados de octubre se correlacionan bien con la histopatología (Figura 1). CSA histológico placa se calculan como se describió anteriormente. La histología muestra hiperplasia de la íntima con alta densidad de células fusiformes y las células mononucleares de sólo unos pocos la inflamación. Después de 6 semanas, los stents están completamente cubiertas con tejido de granulación neointimal y la AT de la placa medidas de 1,3 ± 0,4 mm 2 en un stent de 2,5 mm. Figura 1: octubre (A) e histológicas (B, ampliación 16x) imágenes del stent 6 semanas después de la implementación. Resultados obtenidos a partir de la placa CSA imágenes de OCT se correlacionan bien con la histopatología. Por favor, haga clic aquí para ver una versión ampliada de la figura 1.