Imaging ristenosi in-stent: un poco costoso, modello affidabile, rapido e preclinici

Aortica distribuzione stent Maschi Sprague-Dawley di peso 550-600 g sono acquistati da Harlan (Indianapolis, IN, USA). Ratti casa in condizioni convenzionali, alimentati standard di ratto cibo e acqua ad libitum. Anestetizzare ratto con isoflurano (2%) e ketamina (25 mg / kg). In vista microscopico, eseguire una media superiore mini-laparotomia per esporre l'aorta sottorenale. Sezionare l'aorta addominale dal tessuto circostante, dal livello delle arterie renali fino alla biforcazione. ATTENZIONE: Non c'è bisogno di sezionare l'aorta dalla IVC. Usa microclamps per fermare il flusso aortico sangue. Posizionare il morsetto prossimale per primo, seguito dal morsetto distale. Aprire l'aorta con una piccola incisione trasversale e lavare l'aorta con eparina (200 unità). L'endotelio aortico è denudato dal passaggio di un 2-francese catetere Fogarty embolectomia arteriosa (Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA). Utilizzare qualsiasi dimensione umana stent tra 8mm e 12mm di lunghezza e 2,5 mm-3mm di diametro. ATTENZIONE: Il diametro dello stent non dovrebbe superare il diametro del vaso di oltre il 10% per evitare stenosi pre-e post-stent. ATTENZIONE: Non accendere la lunghezza dello stent all'interno dello studio stesso. Distribuire lo stent con palloncino alla pressione appropriata per ottenere il diametro desiderato. L'incisione aortica piccolo si chiude con 9-0 punti di sutura Prolene (Ethicon, Norderstedt, Germania). Chiudere l'incisione addominale a strati con 4-0 punti di sutura Vicryl esecuzione (Ethicon, Norderstedt, Germania). Le suture cutanee devono ancora essere rimosse entro 7-14 giorni, anche quando Viacryl viene utilizzato. Animali ricevuto Carprofen (6mg/kg) durante l'intervento, e Metamizol per 7 giorni in più in acqua potabile. Optical Coherence Tomography (OCT) Imaging Immagini ottobre si ottengono con i PTOM M2 sistema di imaging (Lightlab Imaging, Inc., Westford, MA, USA). ImageWire è una sonda di imaging per fornire la luce al tessuto e raccogliere i segnali. Il ImageWire composto da 0,006 "(0,15 mm) in fibra ottica core, all'interno di una guaina con un diametro esterno massimo di 0,019" (0,48 mm). Anestetizzare ratto con isoflurano (2%) e ketamina (25 mg / kg). In vista microscopico, eseguire una laparotomia mediana rifare per esporre l'aorta sottorenale. Morsetto l'aorta prossimale ed entrambi arteria iliaca. Eseguire una arteriotomia trasversale alla fine distale dell'aorta, a filo con 1ml PBS utilizzando un catetere 28G e inserire il catetere ottobre e lo trasmette nell'aorta. Motorizzato pullback ottobre l'imaging viene effettuata ad un tasso pullback di 1,0 mm al secondo. Acquisire immagini a 15 fotogrammi al secondo, le immagini vengono visualizzate con una tabella di colori di look-up e archiviati in formato digitale. Chiudere il arteriotomia. Chiudere l'addominale e incisioni con 4-0 punti di sutura Vicryl esecuzione (Ethicon, Norderstedt, Germania). Le suture cutanee devono ancora essere rimosse entro 7-14 giorni, anche quando Viacryl viene utilizzato. La formazione si svilupperà neointima massimo entro 6 settimane dopo l'impianto dello stent. Analizzando le immagini Ottobre Misure ottobre vengono eseguite utilizzando il software proprietario Lightlab ottobre imaging con un topo-based. Calibrare il sistema alla riflessione del filo ottobre imaging, che è la tecnica standard di calibrazione per questo sistema. Traccia lume dello stent e aree delle sezioni trasversali (CSA) manualmente ad ogni intervallo 1,0 mm. Calcolare l'area trasversale della placca come CSA stent sottratto dal CSA lume. Calcolare placca zona per cento CSA placca diviso per CSA stent (%). Calcolare la media aree placca per cento. Validazione della tecnica di ottobre Risultati Ottobre correlano bene con l'istopatologia (Figura 1). CSA placca istologici sono calcolati come sopra descritto. L'istologia rivela iperplasia intimale con alta densità di cellule fusiformi e solo poche cellule mononucleate infiammazione. Dopo 6 settimane, gli stent sono interamente rivestiti con tessuto di granulazione neointimale e il CSA placca misure di 1,3 ± 0,4 mm 2 in uno stent da 2,5 mm. Figura 1: Ottobre (A) e istologiche (B, ingrandimento 16x) le immagini dello stent 6 settimane dopo la distribuzione. Risultati ottenuti da CSA placca immagini Ottobre correlano bene con l'istopatologia. Si prega di cliccare qui per vedere una versione più grande della figura 1.