Encyclopedia of Experiments: Biology
É necessário ter uma assinatura JoVE para assistir este Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Nöronlar elektriksel impulsları eylem potansiyelleri yoluyla yayarlar.. Nöron dinlenme durumundayken, sodyum iyonlarının girişinden daha yavaş bir potasyum iyonları çıkışı vardır, bu da membran potansiyelinin değişmesine neden olur. Bu, sodyum iyon kanallarının açılmasına ve sodyum iyonlarının girişine izin vererek elektriksel bir dürtü oluşturmasına neden olur.
Bir hücredeki bu tür aktiviteleri inceleme yöntemine elektrofizyoloji denir. Yetişkin bir zebra balığının burun deliğinin içine ikincil bir elektrot ucu yerleştirerek prosedüre başlayın.
Birincil elektrot, etrafındaki tüm hücrelerin hücre dışı membran potansiyelini ölçer. Sinyal, tüm bu hücrelerin birleşik membran potansiyelini temsil eder. Elektrot sinyali algılar ve bir amplifikatöre iletir-- bir osiloskop-- membran potansiyelinin görsel bir görüntüsünü sunar, ve bir bilgisayar.
Okumaları gözlemleyin ve birincil ve ikincil elektrotlar arasındaki elektriksel farkı analiz edin. Elektrofizyolojik ölçüm bir karşılaştırmadır. Örnek protokolde, farmakolojik bileşiklerin yetişkin bir zebra balığındaki sinirsel aktivite üzerindeki etkisini ölçeceğiz.
- Elektrofizyoloji kaydı için entübasyon stopcockunu kapatın ve entübasyon tabanını trikaine damlaya bağlayan Leur kilidini hızla çıkarın. Sağlam entübasyon kurulumunu elektrofizyoloji mikroskobuna taşıyın ve perfüzyon sistemine bağlayın. Habitat suyunu açın ve trikaini yıkamak için yaklaşık bir saat boyunca dakikada 1 mililitre hızında perfüzyon.
Bir mikro manipülatör kullanarak, ikincil elektrodu, elektrot ucunun hayvanın burun deliğine veya üst çenenin altındaki daldırma içine yerleştirilebilmesi için konumlandırın. Daha sonra, birincil elektrot iğnesini kraniyotomi açıklığı içine yerleştirin.
Elektronun daha derin konumları küçük bir elektrik sinyaline neden olabilir. Veri toplama için, 5.000 hertz örnekleme hızında boşluksuz mod, 0,1 kilohertz'lik lowpass filtresi ve 1 hertz'lük bir highpass filtresi ile birlikte kullanılır. Habitat suyu en az 45 dakika perfüzyona girdiğinde elektrofizyolojik aktivitenin kaydına başlayın. Deneysel ilaçların eklenmesinden en az 15 dakika önce bir yerel aktivite temeli kaydedin.
