Encyclopedia of Experiments: Biology
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- 神经元通过行动潜力传播电脉冲。 当神经元处于静止状态时,钾离子的流出速度比钠离子的流入慢,这会导致膜潜力的变化。这会导致钠离子通道打开并允许钠离子流入,产生电脉冲。
在细胞中研究这种活动的方法叫做电生理学,通过将二次电极尖插入成年斑马鱼的鼻孔开始手术。接下来,在裸露的视网图中表面插入主电极,以测量细胞外神经活动。
主电极测量其周围所有细胞的细胞外膜电位。信号表示所有这些细胞的组合膜电位。电极检测信号并将其传输到放大器(示波器)中,该放大器可直观地显示膜电位和计算机。
观察读数,分析原电极和二级电极之间的电差。电生理测量是比较。在示例协议中,我们将测量药理化合物对成年斑马鱼神经活动的影响。
- 用于电生理学记录,关闭管状塞科克,并快速断开连接管基和三卡因滴注的Leur 锁。将完整的内存设置移动到电生理显微镜,并将其连接到灌注系统。 打开生境水,以每分钟1毫升的速度灌注约一小时,以洗掉三卡因。
使用微型操纵器,将二次电极定位,以便将电极尖端插入动物的鼻孔,或插入上颚下部的浸渍中。随后,将主电极针插入颅骨切除术开口。然后,将针头插入组织,使尖端位于光学构造中相当肤浅的位置。
电极的更深位置可能导致小电信号。 对于数据收集,使用5,000 赫兹采样率的无间隙模式,以及 0.1千赫的低通滤清器和 1 赫兹的高通路过滤器。当栖息地的水已经渗透了至少 45分钟时,开始记录电生理活动。在添加实验药物之前,记录至少15分钟的本地活动基线。