Overview
Denne videoen beskriver en teknikk for radikal mastektomi, som brukes til kirurgisk fjerning av hele brystkjertelen fra en mus for å studere kreftprogresjon.
Protocol
1. Mastektomi
MERK: Tidspunktet for mastektomi er svært viktig. Hvis det gjøres for tidlig, oppstår ikke lungemetastase. Hvis det gjøres for sent, har den primære svulsten invadert store blodkar, noe som gjør en fullstendig onkolog reseksjon utfordrende. Dermed ble flere tidspunkter testet for mastektomi for å avgjøre hvilket tidspunkt som ga riktig balanse i å vente på metastase før reseksjon ble for utfordrende. Etter å ha gjort det i over 50 museeksperimenter, ble det demonstrert at mastektomi på 8 dager etter kreftcelleinokulering (eller når tumorstørrelsen når 5 mm) var det ideelle tidspunktet for å oppnå den balansen.
- Bedøv en mus med 2-4% isofluran og 0,2 l / min oksygenstrøm til musene puster rolig (2-3 min) og injiserer 0,05 mg / kg buprenorfin i skulderen subkutant.
- Hold musens lemmer ved hjelp av laboratoriebånd og steriliser huden ved hjelp av klorhexidin, jod og 75% etanol, ved hjelp av bomullspinne.
- Lag et 5 mm hudinnsnitt 2 mm til venstre fra det kirurgiske arret som ble laget ved den første kreftcelleinokuleringen, ved hjelp av mikrodesisseksjonssaksen. Utvid snittet mot roten av forbenet for å fjerne svulsten, huden inkludert det kirurgiske arret, og lesjonen i kontakt med svulsten, samt det aksillære lymfeknutebassenget der det meste av tiden ikke finnes noen synlig lymfeknute på tidspunktet for mastektomien. Pass på at du ikke skader den aksillære venen.
- Lukk hudfeilene ved å sy, ved hjelp av sterile 5-0 ikke-absorberbare suturer i form av en "Y".
- Returner musen til et rent bur og overvåk til de har kommet seg og beveger seg fritt (etter ~ 1-2 min). Hvis et dyr ikke ser ut til å ha god helse innen 24 timer etter operasjonen, administrer buprenorfin (0,2 mg/kg).
- Fjern suturene under anestesi (med 2-4% isofluran og 0,2 l / min oksygenstrøm) 7 dager etter operasjonen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |