Overview
يصف هذا الفيديو تقنية استئصال الثدي الجذري ، والتي تستخدم لإزالة الغدة الثديية بأكملها جراحيا من الماوس لدراسة تطور السرطان.
Protocol
1. استئصال الثدي
ملاحظة: توقيت استئصال الثدي مهم جدا. إذا تم ذلك في وقت مبكر جدا، لا يحدث الانبثاث الرئوي. إذا تم ذلك بعد فوات الأوان ، فقد غزا الورم الأساسي الأوعية الدموية الرئيسية ، مما يجعل استئصال الأورام الكامل أمرا صعبا. وهكذا، تم اختبار نقاط زمنية متعددة لاستئصال الثدي لتحديد النقطة الزمنية التي أنتجت التوازن المناسب في انتظار الانبثاث قبل أن يصبح استئصال الثدي تحديا كبيرا. بعد القيام بذلك في أكثر من 50 تجربة فأرة ، ثبت أن استئصال الثدي بعد 8 أيام من تلقيح الخلايا السرطانية (أو عندما يصل حجم الورم إلى 5 مم) كان نقطة الوقت المثالية لتحقيق هذا التوازن.
- تخدير الماوس مع 2-4٪ isoflurane و 0.2 لتر / دقيقة تدفق الأكسجين حتى الفئران تتنفس بهدوء (2-3 دقيقة) وحقن 0.05 ملغ / كجم البوبرينورفين في كتفه تحت الجلد.
- كبح جماح أطراف الفأر باستخدام شريط المختبر وتعقيم جلده باستخدام الكلورهيكسيدين واليود والإيثانول بنسبة 75٪، وذلك باستخدام مسحات القطن.
- جعل شق الجلد 5 ملم 2 ملم إلى اليسار من ندبة الجراحية التي تم إجراؤها في التلقيح الخلايا السرطانية الأولية، وذلك باستخدام مقص microdissection. قم بتوسيع الشق نحو جذر الأطراف الأمامية لإزالة الورم والجلد بما في ذلك الندبة الجراحية والآفة التي تلامس الورم ، وكذلك حوض العقدة الليمفاوية الإبطية الذي لا توجد فيه في معظم الأحيان عقدة لمفاوية مرئية في وقت استئصال الثدي. تأكد من عدم تلف الوريد الإبطي.
- إغلاق عيوب الجلد عن طريق خياطة، وذلك باستخدام الغرز العقيمة 5-0 غير قابلة للامتصاص في شكل "Y".
- أعد الماوس إلى قفص نظيف وشاشة حتى يتعافى ويتحرك بحرية (بعد ~1-2 دقيقة). إذا كان الحيوان لا يبدو في صحة جيدة في غضون 24 ساعة من الجراحة، وإعطاء البوبرينورفين (0.2 ملغ / كغ).
- إزالة الغرز تحت التخدير (مع 2-4٪ isoflurane و 0.2 لتر / دقيقة تدفق الأكسجين) 7 أيام بعد الجراحة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |