Overview
וידאו זה מתאר טכניקה של כריתת שד רדיקלית, אשר משמש להסרת כירורגית של בלוטת החלב כולה מעכבר כדי ללמוד התקדמות סרטן.
Protocol
1. כריתת שד
שים לב: העיתוי של כריתת השד חשוב מאוד. אם זה נעשה מוקדם מדי, גרורות ריאות אינו מתרחש. אם זה נעשה מאוחר מדי, הגידול העיקרי פלש לכלי הדם העיקריים, מה שהופך כריתה אונקולוגית מלאה מאתגרת. לכן, נקודות זמן מרובות נבדקו כריתת שד כדי לקבוע איזו נקודת זמן הפיק את האיזון המתאים בהמתנה גרורות לפני כריתה הפך מאתגר מדי. לאחר שעשה זאת מעל 50 ניסויים בעכבר, הוכח כי כריתת שד ב 8 ימים לאחר חיסון תאים סרטניים (או כאשר גודל הגידול מגיע 5 מ"מ) היה נקודת הזמן האידיאלית כדי להשיג את האיזון הזה.
- הרדמה עכבר עם 2-4% isoflurane ו 0.2 L / min זרימת חמצן עד העכברים לנשום ברוגע (2-3 דקות) ולהזריק 0.05 מ"ג / קילוגרם buprenorphine לכתפו תת עורית.
- רסנו את איברי העכבר באמצעות סרט מעבדה ועקרו את עורו באמצעות כלורהקסידין, יוד ואתנול 75%, באמצעות ספוגיות כותנה.
- הפוך חתך עור 5 מ"מ 2 מ"מ שמאלה מן הצלקת הכירורגית שנעשתה בחיסון התא הסרטני הראשוני, באמצעות מספריים microdissection. להרחיב את החתך לכיוון השורש של forelimb כדי להסיר את הגידול, העור כולל הצלקת הכירורגית, ואת הנגע במגע עם הגידול, כמו גם את אגן בלוטות הלימפה בבית השחי שבו רוב הזמן אין בלוטות לימפה גלוי קיים בזמן כריתת השד. הקפד לא לפגוע בווריד בבית השחי.
- סגור את פגמי העור על ידי תפירה, באמצעות תפרים סטריליים 5-0 שאינם נספגים בצורה של "Y".
- להחזיר את העכבר לכלוב נקי לפקח עד שהם התאוששו והם נעים בחופשיות (לאחר ~ 1-2 דקות). אם בעל חיים לא נראה במצב בריאותי טוב בתוך 24 שעות של ניתוח, לנהל buprenorphine (0.2 מ"ג / קילוגרם).
- הסר את התפרים תחת הרדמה (עם 2-4% isoflurane ו 0.2 L / min זרימת חמצן) 7 ימים לאחר הניתוח.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |