Overview
Cette vidéo décrit une technique de mastectomie radicale, qui est utilisée pour l’ablation chirurgicale de l’ensemble de la glande mammaire d’une souris pour étudier la progression du cancer.
Protocol
1. Mastectomie
REMARQUE: Le moment de la mastectomie est très important. Si elle est faite trop tôt, métastase pulmonaire ne se produit pas. Si elle est faite trop tard, la tumeur primaire a envahi les vaisseaux sanguins principaux, qui rendent une résection oncologique complète provocante. Ainsi, plusieurs points de temps ont été examinés pour la mastectomie pour déterminer quel point de temps a produit l’équilibre approprié en attendant la métastase avant que la résection soit devenue trop provocante. Après l’avoir fait dans plus de 50 expériences de souris, il a été démontré que la mastectomie à 8 jours après l’inoculation des cellules cancéreuses (ou lorsque la taille de la tumeur atteint 5 mm) était le point de temps idéal pour atteindre cet équilibre.
- Anesthésier une souris avec 2-4% d’isoflurane et 0,2 L/min d’écoulement d’oxygène jusqu’à ce que les souris respirent calmement (2-3 min) et injectent 0,05 mg/kg de buprénorphine dans son épaule sous-cutanée.
- Retenez les membres de la souris à l’aide de ruban adhésif de laboratoire et stérilisez sa peau à l’aide de chlorhexidine, d’iode et de 75 % d’éthanol, à l’aide d’écouvillons de coton.
- Faire une incision cutanée de 5 mm 2 mm à gauche de la cicatrice chirurgicale qui a été faite à l’inoculation initiale des cellules cancéreuses, en utilisant les ciseaux de microdissection. Étendre l’incision vers la racine du membre antérieur pour enlever la tumeur, la peau, y compris la cicatrice chirurgicale, et la lésion en contact avec la tumeur, ainsi que le bassin de ganglion lymphatique axillaire dans lequel la plupart du temps aucun ganglion lymphatique visible n’existe au moment de la mastectomie. Assurez-vous de ne pas endommager la veine axillaire.
- Fermez les défauts de la peau en cousant, à l’aide de sutures stériles 5-0 non absorbables en forme de « Y ».
- Retournez la souris dans une cage propre et surveillez jusqu’à ce qu’elle se soit rétablie et se déplace librement (après ~1-2 min). Si un animal ne semble pas en bonne santé dans les 24 heures de la chirurgie, administrer de la buprénorphine (0,2 mg/kg).
- Enlever les sutures sous anesthésie (avec 2-4% d’isoflurane et 0,2 L/min de débit d’oxygène) 7 jours après la chirurgie.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |