Overview
Questo video descrive una tecnica di mastectomia radicale, che viene utilizzata per la rimozione chirurgica dell'intera ghiandola mammaria da un topo per studiare la progressione del cancro.
Protocol
1. Mastectomia
NOTA: La tempistica della mastectomia è molto importante. Se viene eseguita troppo presto, la metastasi polmonare non si verifica. Se viene fatto troppo tardi, il tumore primario ha invaso i principali vasi sanguigni, il che rende difficile una resezione oncologica completa. Pertanto, sono stati testati più punti di tempo per la mastectomia per determinare quale punto di tempo ha prodotto l'equilibrio appropriato in attesa della metastasi prima che la resezione diventasse troppo impegnativa. Dopo averlo fatto in oltre 50 esperimenti sui topi, è stato dimostrato che la mastectomia a 8 giorni dall'inoculazione delle cellule tumorali (o quando la dimensione del tumore raggiunge i 5 mm) era il momento ideale per raggiungere quell'equilibrio.
- Anestetizzare un topo con 2-4% di isoflurane e 0,2 L/min di flusso di ossigeno fino a quando i topi respirano con calma (2-3 min) e iniettano 0,05 mg/kg di buprenorfina nella spalla per via sottocutanea.
- Trattenere gli arti del topo usando nastro da laboratorio e sterilizzare la pelle usando clorexidina, iodio e 75% di etanolo, utilizzando tamponi di cotone.
- Fare un'incisione cutanea di 5 mm 2 mm a sinistra dalla cicatrice chirurgica che è stata fatta all'inoculazione iniziale delle cellule tumorali, usando le forbici della microdisezione. Estendere l'incisione verso la radice dell'giaciglio anteriore per rimuovere il tumore, la pelle compresa la cicatrice chirurgica e la lesione a contatto con il tumore, così come il bacino linfonodo ascellare in cui il più delle volte non esiste alcun linfonodo visibile al momento della mastectomia. Assicurarsi di non danneggiare la vena ascellare.
- Chiudere i difetti della pelle cucendo, utilizzando suture sterili 5-0 non assorbibili a forma di "Y".
- Riportare il mouse in una gabbia pulita e monitorare fino a quando non si sono ripresi e si muovono liberamente (dopo ~ 1-2 minuti). Se un animale non sembra essere in buona salute entro 24 ore dall'intervento chirurgico, somministrare buprenorfina (0,2 mg/kg).
- Rimuovere le suture in anestesia (con 2-4% di isoflurane e 0,2 L/min di flusso di ossigeno) 7 giorni dopo l'intervento chirurgico.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |