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La technique du peel-blot : une méthode de préparation d’échantillons cryo-EM pour séparer les couches uniques des échantillons biologiques multicouches ou concentrés
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JoVE 신문 생화학
The Peel-Blot Technique: A Cryo-EM Sample Preparation Method to Separate Single Layers From Multi-Layered or Concentrated Biological Samples
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La technique du peel-blot : une méthode de préparation d’échantillons cryo-EM pour séparer les couches uniques des échantillons biologiques multicouches ou concentrés

DOI:
10.3791/64099-v

•

07:27 min

•

June 29, 2022

•

, ,
1School of Biological Sciences,Georgia Institute of Technology, 2Department of Structural Biology,Genentech, 3School of Chemistry and Biochemistry,Georgia Institute of Technology

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:33Preparation Steps for the Peel‐Blot Technique
  • 01:57Placing the Carbon Film onto the Grid
  • 03:07Separation of Multi-Layered 2D Crystals into Single Layer
  • 04:55Results: 2D Crystals of Human Leukotriene C4 Synthase and Liposomes Subjected to the Peel‐Blot Method, the Peel-Blot Footprint, and Blotting an EM Grid Prepared by Back-Injection on a Submicron Filter Paper
  • 06:42Conclusion

Summary

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La technique peel-blot est une méthode de préparation de grille cryo-EM qui permet de séparer des échantillons biologiques multicouches et concentrés en couches uniques afin de réduire l’épaisseur, d’augmenter la concentration des échantillons et de faciliter le traitement des images.

Tags

Peel-Blot TechniqueCryo-EMSample PreparationMulti-Layered SamplesConcentrated SamplesSingle LayersThickness ReductionConcentration IncreaseImage ProcessingFilter PaperParaffin FilmSubmicron Filter PaperAnti-Capillary Forceps600 Mesh GridTrehalose SolutionMicaCarbon FilmGrid Orientation

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