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Uma abordagem baseada em espectrometria de massa para identificar fosfofamina fosfates e seus interacttores
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JoVE 신문 생화학
A Mass Spectrometry-Based Approach to Identify Phosphoprotein Phosphatases and their Interactors

Uma abordagem baseada em espectrometria de massa para identificar fosfofamina fosfates e seus interacttores

DOI:
10.3791/63805-v

•

10:17 min

•

April 29, 2022

•

,
1Department of Biochemistry and Cell Biology,Geisel School of Medicine at Dartmouth, 2Norris Cotton Cancer Center

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:46Sample Preparation
  • 02:26Preparation of Phosphatase Inhibitor Beads
  • 04:03Washing and Elution of PPPs from the PIBs
  • 05:40Data Analysis
  • 08:30Results: Identification of Specific PIB Binders in HeLa Cells
  • 09:37Conclusion

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo para o enriquecimento de fosfatrofames fosfoproteínas e suas proteínas interativas a partir de células e tecidos e sua identificação e quantificação por proteômica baseada em espectrometria de massa.

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Phosphoprotein PhosphatasesPIB-MSMass SpectrometryProteomicsPhosphatase InteractorsCell LysisProtein QuantificationPhosphatase Inhibitor ControlPhosphatase Inhibitor Beads

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