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클릭 화학을 이용한 지방 아실화 단백질의 검출을 위한 알키닐 지방산 유사체의 최적화된 혼입
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Optimized Incorporation of Alkynyl Fatty Acid Analogs for the Detection of Fatty Acylated Proteins using Click Chemistry
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클릭 화학을 이용한 지방 아실화 단백질의 검출을 위한 알키닐 지방산 유사체의 최적화된 혼입

DOI:
10.3791/62107-v

•

07:27 min

•

April 09, 2021

•

, ,
1Department of Biology,University of Waterloo

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:44Cell Culture
  • 01:25Preparation and Saponification of Fatty Acid Analogs
  • 03:35Click Reaction on Cell Lysates
  • 04:12Click Reaction on Immunoprecipitated Proteins
  • 05:13Results: Detection of Fatty Acylated Proteins Using Click Chemistry
  • 06:57Conclusion

Summary

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지방 아실화에 대한 연구는 세포 단백질 상호 작용 및 질병에 중요한 영향을 미칩니다. 여기에 제시된 것은 지방 아실화 단백질의 클릭 화학 검출을 개선하기위한 변형 된 프로토콜이며, 이는 다양한 세포 유형에 적용될 수 있으며 펄스 체이스 및 질량 분광법을 포함한 다른 분석과 결합 될 수 있습니다.

Tags

Alkynyl Fatty Acid AnalogsClick ChemistryFatty Acylated ProteinsFatty Acid LabelingMetabolic LabelingHEK-293 T-cellsBSA-bound Fatty AcidsSaponificationPotassium HydroxideFatty Acid-free BSA

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