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Multiplexación y transfección de plasmión de ADN de alto rendimiento mediante tecnología de nanodispensación acústica
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JoVE 신문 유전학
High-Throughput DNA Plasmid Multiplexing and Transfection Using Acoustic Nanodispensing Technology

Multiplexación y transfección de plasmión de ADN de alto rendimiento mediante tecnología de nanodispensación acústica

DOI:

13:27 min

August 08, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:47Preparation of the Peristaltic Liquid Handler Programs
  • 01:53Experimental Design and Generation of the Picklists to Drive the Acoustic Droplet Ejection (ADE)-Based Dispenses
  • 03:34DNA Source Plate Preparation Using the 384-well Pipetting Guide Application and Survey Performance to Control the Manually Dispensed Volumes
  • 06:18Peristaltic Liquid Handler-Based 1 μL Diluent Dispensation in the Destination Plate
  • 07:03ADE-driven DNA Dispensing into the Destination Plate and ADE-driven Transfection Reagent Dispensing
  • 09:54Peristaltic Liquid Handler-Based Cell Dispensation
  • 10:51Results: Defining the Key Parameters to Reach Highly Efficient and High Thoughput Cells (Co-) Transfections
  • 12:26Conclusion

Summary

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Este protocolo describe la transfección de plásmido de alto rendimiento de células de mamíferos en una placa de 384 pocillos utilizando tecnología de eyección de gotas acústicas. La dispensación y multiplexación de ADN, que consume mucho tiempo y propensa a errores, pero también la dosificación del reactivo de transfección, son impulsadas por software y realizadas por un dispositivo de nanodispensador. Las células son sembradas en estos pozos precargados.

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