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Échelle du protéome Quantification d’homogénéité à l’échelle de la molécule unique d’étiquetage
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JoVE 신문 생화학
Proteome-wide Quantification of Labeling Homogeneity at the Single Molecule Level
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Échelle du protéome Quantification d’homogénéité à l’échelle de la molécule unique d’étiquetage

DOI:
10.3791/59199-v

•

08:29 min

•

April 19, 2019

•

, ,
1Laboratory for Cell Systems Control, RIKEN Center for Biosystems Dynamics Research,RIKEN, 2Laboratoire de Biomatériaux et Bioimagerie,INSERM, 3PRESTO, Japan Science and Technology Agency

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:33Cell Lysis and Fluorescent Labeling
  • 03:26Proteome Separation and Recovery
  • 03:51Microscope Coverslip Preparation
  • 05:46Observation with Single Molecule Fluorescence Microscopy
  • 06:07Results: Labeling Homogeneity at the Single Molecule Level
  • 07:33Conclusion

Summary

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Nous présentons ici un protocole pour évaluer l’homogénéité étiquetage pour chaque espèce de protéine dans un échantillon complexe des protéines à l’échelle de la molécule.

Tags

Protein QuantificationSingle-molecule AnalysisFluorescent LabelingHeterogeneityMolecular Concentration AssaysDiagnostic MethodsProtein Species AnalysisData ReproducibilityLysing BufferTween-20DTTCHAPSCy3 NHS Ester DyeHEPES-NaOHBiotin-2-amineEDC

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