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레트로 바이러스 스캐닝 : MLV 통합 사이트 맵핑으로 세포 특정 규제 지역 정의
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Retroviral Scanning: Mapping MLV Integration Sites to Define Cell-specific Regulatory Regions
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레트로 바이러스 스캐닝 : MLV 통합 사이트 맵핑으로 세포 특정 규제 지역 정의
DOI:
10.3791/55919-v
•
10:10 min
•
May 28, 2017
•
Oriana Romano
2
,
Ingrid Cifola
,
Valentina Poletti
,
Marco Severgnini
,
Clelia Peano
,
Gianluca De Bellis
,
Fulvio Mavilio
4
,
Annarita Miccio
2,4,5
1
Center for Genome Research, Department of Life Sciences
,
University of Modena and Reggio Emilia
,
2
Laboratory of Chromatin and Gene Regulation During Development
,
Imagine Institute
,
3
Institute for Biomedical Technologies
,
CNR
,
4
Généthon
,
5
Sorbonne Paris Cité – Université Paris Descartes
Chapters
00:05
Title
00:45
MLV Transduction of Human Cells
01:41
Restriction Enzyme Digestion and Linker Ligation
03:05
First-round Linker-mediated PCR
03:43
Second Round Linker-mediated PCR
05:17
Library Preparation and Dilution for Massive Sequencing of MLV Integration Sites
07:53
Results: Mapping MLV Integration into Epigenetically-defined Regulatory Regions
09:23
Conclusion
Summary
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여기, 우리는 인간 세포에서 Moloney 뮤린 백혈병 바이러스 기반의 레트로 바이러스 벡터의 통합 사이트의 게놈 전체 매핑을위한 프로토콜을 설명합니다.
Tags
Retroviral Scanning
MLV Integration Sites
Cell-specific Regulatory Regions
Gene Therapy
Gene Regulation
MLV-derived Retroviral Vector
EGFP Reporter Gene
Flow Cytometric Analysis
Genomic DNA Preparation
Restriction Enzyme Digestion
Linker Ligation
First-round PCR
Second-round PCR
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