Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
Для начала поместите анестезированной мыши на хирургическую кровать и ввести бупренорфин, анальгетики, чтобы облегчить боль, подкожно в плечо. Затем вставьте нос мыши в маску для носа, чтобы обеспечить непрерывный запас кислорода и анестезии, таких как изофлюран животному. Используя лабораторную ленту, обездвижить конечности и стерилизовать кожу грудной клетки хлоргексидином и йодом, двумя дезинфицирующими средствами и этанолом.
Теперь используйте ножницы, чтобы сделать разрез в середине передней стенки грудной клетки и инвертировать кожу с типсами, чтобы разоблачить белый молочный жир площадку. Тщательно ввисьйте подвеску раковых клеток, выражают биолюминесцентный белок, в молочную жировую площадку. Подождите 5 секунд, прежде чем вытащить иглу, чтобы предотвратить обратное поток. Аккуратно отпустите жировую прокладку и используйте стерильные швы, чтобы сшить и закрыть разрез.
Инъекционные раковые клетки внутри молочной жировой площадки быстро делятся, чтобы сформировать опухоль. Вернуть животное в клетку после процедуры. Внимательно следите за животным до тех пор, пока оно не оправиться от анестезии и не начнет свободно передвигаться.
В следующем протоколе, мы имплантируем клетки аденокарциномы молочной железы, выражают люциферазу в молочную жировую площадку взрослой мыши.
Начните с подтверждения отсутствия реакции на щепотку ноша в анестезизированных самок мыши и лентой конечностей животного на хирургическую доску. Используя стерильные ватные тампоны, стерилизовать хирургическую область хлоргексидином, йодом и этанолом 75%, а также сделать пятимиллиметровый разрез кожи в середине передней стенки грудной клетки. Затем поднимите правую сторону кожи, прилегающую к разрезу, и используйте стерильные ножницы микропересмешки, чтобы отделить кожу от грудной стенки.
Инвертировать кожу, чтобы разоблачить право номер два молочных жира площадку и использовать один миллилитр инсулина шприц оснащен 28,5 калибровочных иглы тщательно вводить 20 микролитров подвески раковых клеток через рану в жировой прокладке. Держите иглу в жировой прокладке в течение пяти секунд, чтобы желатиновая смесь белка раковых клеток затвердеть перед удалением иглы, и закрытие разреза стерильными 5-0 неаспасаемых швов. Затем поместите животное в чистую клетку с мониторингом до полного лежачих.
