Orthotope diermodellen van kanker van de eierstokken te repliceren beter mens-en vaatziekten en daardoor meer inzicht in de progressie van kanker en tumor respons op therapie. Een muis model krijgt een intrabursale injectie van luciferase-expressie ovarium tumorcellen. De behandeling wordt toegediend via orale sondevoeding. Tumorgroei wordt bewaakt door<em> In vivo</em> Imaging systeem.
Humane kanker en de reactie op therapie is beter vertegenwoordigd in orthotope diermodellen. Dit document beschrijft de ontwikkeling van een orthotope muismodel van eierstokkanker, de behandeling van kanker door middel van orale toediening van geneesmiddelen, en monitoring van tumorcel gedrag in reactie op de medicamenteuze behandeling in real time met behulp van in vivo imaging systeem. In dit orthotope model worden ovariumtumor cellen die luciferase plaatselijk aangebracht door het injecteren van ze rechtstreeks in de muis slijmbeurs waar elke eierstok is bijgevoegd. Na injectie van D-luciferine, een substraat van vuurvlieg luciferase, luciferase-expressie brengende cellen te genereren bioluminescentie signalen. Dit signaal wordt gedetecteerd door de in vivo imaging-systeem en zorgt voor een niet-invasieve wijze van controle tumorgroei, distributie en regressie bij individuele dieren. Toediening van het geneesmiddel via orale sondevoeding zorgt voor een maximale dosering volume van 10 ml / kg lichaamsgewicht om rechtstreeks worden geleverd aan de maag en lijkt op de levering van geneesmiddelen in de klinische behandelingen. Daarom is hier beschreven technieken, de ontwikkeling van een orthotope muismodel van eierstokkanker, orale toediening van geneesmiddelen, en in vivo beeldvorming, zijn nuttig voor een beter begrip van de menselijke eierstokkanker en de behandeling en zal gerichter inspelen deze ziekte.
Eierstokkanker is de belangrijkste oorzaak van de dood van alle gynaecologische maligniteiten 1. Het hoge sterftecijfer van deze ziekte is grotendeels te danken aan de late diagnose en het ontbreken van betrouwbare diagnostische methoden 2. Bovendien, conventionele chemotherapie ontmoetingen vaak chemoresistance en terugval van kanker 3. Daarom is nieuwe therapieën nodig is om effectief te richten op deze ziekte. In de ontwikkeling van nieuwe therapie gericht op de menselijke behandeling van eierstokkanker, is het essentieel om een representatief diermodel te ontwikkelen.
Een orthotope diermodel heeft voordelen ten opzichte van conventionele xenotransplantaatmodellen (bijv. subcutane of intraperitoneale injecties van tumorcellen) in dat 1) het reproduceert de primaire plaats van tumorvorming, 2) het vertegenwoordigt gemeenschappelijke plaats van uitzaaiingen, en 3) biedt tumorcellen aan interactie met de juiste micro-4, 5, 6, 7, 8. Knaagdieren hebben een unieke bursitis membraan dat de eierstok omringt en is continu met de eileider. Deze unieke anatomie van knaagdieren kan injectie van ovarium tumorcellen orthotopically. Intrabursally ingespoten ovarium tumorcellen zich gedragen vergelijkbaar met menselijke ziekten, waardoor steeds binnen de intrabursale membraan en de verspreiding in de buikholte als tumor vordert. Injectie van cellen die stabiel tot expressie luciferases of fluorescerende eiwitten maakt het ook mogelijk volgen het gedrag van tumorcellen in real time. Bioluminescente en / of TL-imaging-technologie maakt het mogelijk om meerdere malen image tumorcellen over een langere periode van tijd en studie groei van de tumor, de distributie en regressie bij het niet-invasieve manier 9, 10, 11.
Bij het vaststellen van de orthotope model, is het essentieel om de naald snel te verwijderen van de slijmbeurs na de injectie. Abrupte verwijdering van de naald sluit de punctieplaats en voorkomt het lekken van de geïnjecteerde cellen. Echter, op hetzelfde moment, zou het verkeer worden zacht niet aan de slijmbeurs scheuren. Als lekkage optreedt tijdens de injectie, kan het cellen zaad in de buik en mogelijk verwarren de studie, dat wil zeggen, premature verspreiden buiten de eierstok. In dat geval dient de specifieke dier worden vastgelegd en gevolgd voor de ontwikkeling van meerdere tumor in het buikvlies voorafgaand aan de behandeling of als alternatief geëlimineerd uit de daarop volgende analyses. Voorafgaand aan het uitvoeren van orale sondevoeding, is het essentieel om de lengte van de buis maagsonde controleren door te meten vanaf het uiteinde van het hoofd van de dieren aan de laatste rib. Het is nuttig om de buis teken bij de neus van het dier en doe de buis niet door het verleden dit merk. Het inbrengen van de buis voorbij dit merkteken kan resulteren in een perforatie van de maag. Het bepalen van de lengte van de buis is vooral belangrijk bij jonge dieren of dieren met een gewicht van minder dan 20 g. Na het inbrengen van de maagsonde naald de slokdarm, mag er geen weerstand of strijd van het dier. Het is belangrijk om niet de oplossing of suspensie toedienen te snel, omdat dit kan leiden tot reflux en vervolgens te leveren onjuiste dosis volume, evenals het toevoegen van stress bij de dieren. Voor vergelijkbare beeldvorming resultaten van tijd tot tijd, is het wenselijk om de tijd consistent tussen de injectie van luciferase substraat en beeldvorming. Het tijdsverloop kan worden bepaald door het nemen van reeks beelden na substraat injectie en let op de kinetiek van signalen. Ontwikkeling van een orthotope muismodel van eierstokkanker, orale toediening van geneesmiddelen, en in vivo beeldvormende technieken zijn nodig voor een beter begrip van de ontwikkeling en de verspreiding van kanker van de eierstokken en de evaluatie van nieuwe therapeutische regimes die uiteindelijk kunnen verbeteren van de uitkomst van patiënten met deze dodelijke ziekte.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Ketamine Hydrochloride | Vedco, Inc. | Not Available | ||
Xylazine Hydrochloride | Lloyd, Inc. | Not Available | ||
Acepromazine | Vedco, Inc. | Not Available | ||
D-Luciferin Potassium Salt | Caliper Life Sciences | 122796 |