В естественных изображений и лечебных процедур в Ортотопическая мышиной модели рака яичников
Summary
Ортотопическая животных моделях рака яичников повторить лучше заболеваний человека и, следовательно, улучшения нашего понимания прогрессию рака и ответ опухоли на лечение. Мышиной модели получает intrabursal инъекции люциферазы-экспрессирующие клетки яичников опухоли. Лечение осуществляется через оральный зонд. Рост опухоли контролируется<em> В естественных условиях</em> Визуализации системы.
Abstract
Человеческого рака и ответ на терапию лучше представлены в ортотопической животных моделях. Эта статья описывает развитие ортотопической мышиной модели рака яичников, лечение рака посредством устных доставки лекарственных препаратов, а также мониторинг опухоли поведение клеток в ответ на препарат лечение в режиме реального времени с помощью системы визуализации в естественных условиях. В этой ортотопической модели, яичников опухоль клеток, экспрессирующих люциферазы применяются местно, вводя их прямо в мышь Бурса, где каждый яичник прилагается. После введения D-люциферин, субстрат люциферазы светляков, люциферазы-клеток, экспрессирующих генерировать сигналы биолюминесценции. Этот сигнал регистрируется в системе естественных изображений и позволяет неинвазивным средством контроля опухолевого роста, распределения и регресс в отдельных животных. Препарата через оральный зонд обеспечивает максимальную громкость приеме 10 мл / кг массы тела, чтобы быть доставлен непосредственно в желудке и очень напоминает доставки лекарственных препаратов в клинической терапии. Таким образом, методы, описанные здесь, развитие ортотопической мышиной модели рака яичников, перорального применения лекарственных средств, и в естественных изображений, являются полезными для лучшего понимания человеческого рака яичников и лечения и улучшит, направленных на эту болезнь.
Protocol
Discussion
Рак яичников является ведущей причиной смерти среди всех злокачественных гинекологических 1. Высокий уровень смертности от этой болезни в значительной степени из-за его поздней диагностикой и отсутствием надежных методов диагностики 2. Кроме того, традиционной химиотерапии часто встречается устойчивость к химическому воздействию и рецидива рака 3. Таким образом, роман терапии необходимо эффективно целевой этого заболевания. В развитие новой терапии ориентации человеческого рака яичников, важно разработать модель представитель животного.
Ортотопической модели животных имеет преимущества по сравнению с обычными моделями ксенотрансплантата (например, подкожного или внутрибрюшинного введения опухолевых клеток) тем, что 1) он воспроизводит основной сайт образования опухоли, 2) она представляет общий сайт метастазов, и 3) он обеспечивает опухолевых клеток к взаимодействовать с соответствующими микроокружения 4, 5, 6, 7, 8. Грызуны имеют уникальную бурсальной мембраны, которая окружает яичника и непрерывно яйцевода. Эта уникальная анатомия грызунов позволяет инъекцию клеток опухоли яичников orthotopically. Intrabursally вводили клетки опухоли яичников ведут себя подобно человеческой болезни, тем самым, растущее внутри intrabursal мембрану и распространяется в брюшную полость, как опухоль прогрессирует. Инъекции клеток стабильно выражения люцифераз или флуоресцентные белки также позволяет отслеживать поведение опухолевых клеток в реальном времени. Биолюминесцентный и / или флуоресцентных технологий визуализации позволяет многократно изображение опухолевых клеток в течение длительного периода времени и изучения опухолевого роста, распределения и регрессии в неинвазивный способ 9, 10, 11.
При установлении ортотопической модели, крайне важно, чтобы быстро удалить иглу из сумки при инъекции. Резкие удаления иглы печатей пункции и предотвращает утечку вводили клетки. Тем не менее, в то же время, движение должно быть мягким, чтобы не разорвать Бурса. Если утечка происходит во время инъекции, это может привести к клеткам семя в живот и, возможно, путают исследования, т.е., преждевременное распространение за пределы яичника. В этом случае конкретные животные должны быть зарегистрированы и последовал за развитие нескольких сайтов опухоль в брюшной полости до начала лечения или же исключены из последующего анализа. Перед проведением устной желудочный зонд, очень важно проверить длину зонда трубка, измеряя от кончика головы животного до последнего ребра. Это полезно, чтобы отметить трубку в нос животного и не проходите мимо трубки этой отметки. Введение трубки прошлом этот знак может привести к перфорации в желудок. Определение длины трубы особенно важно для молодых животных или животных весом 20 грамм При вставке зонд иглу вниз по пищеводу, не должно быть никакого сопротивления или борьбы с животным. Очень важно не вводить раствор или суспензию слишком быстро, так как это может привести к рефлюкса, а затем доставить неточной объем дозы, а также добавление стресс для животного. Для сопоставимости результатов визуализации, время от времени, желательно, чтобы сохранить время последовательно между инъекцией люциферазы подложки и изображений. Промежуток времени может быть определена путем принятия серии изображений после инъекции подложки и наблюдать кинетики сигналов. Развитие ортотопической мышиной модели рака яичников, перорального применения лекарственных средств, и в естественных изображений необходимые методы для лучшего понимания развития и распространения рака яичников и оценки новых терапевтических схем, которые могут в конечном итоге улучшить результат пациента с этой смертельной болезнью.
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ketamine Hydrochloride | Vedco, Inc. | Not Available | ||
| Xylazine Hydrochloride | Lloyd, Inc. | Not Available | ||
| Acepromazine | Vedco, Inc. | Not Available | ||
| D-Luciferin Potassium Salt | Caliper Life Sciences | 122796 |
Riferimenti
- Jemal, A. Cancer statistics. CA Cancer J Clin. 59, 225-249 (2009).
- Lynch, H. T. Hereditary ovarian carcinoma: heterogeneity, molecular genetics, pathology, and management. Mol Oncol. 3, 97-137 (2009).
- Yap, T. A., Carden, C. P., Kaye, S. B. Beyond chemotherapy: targeted therapies in ovarian cancer. Nat Rev Cancer. 9, 167-181 (2009).
- Killion, J. J., Radinsky, R., Fidler, I. J. Orthotopic models are necessary to predict therapy of transplantable tumors in mice. Cancer Metastasis Rev. 17, 279-284 (1998).
- Bibby, M. C. Orthotopic models of cancer for preclinical drug evaluation: advantages and disadvantages. Eur J Cancer. 40, 852-857 (2004).
- Shaw, T. J., Senterman, M. K., Dawson, K., Crane, C. A., Vanderhyden, B. C. Characterization of intraperitoneal, orthotopic, and metastatic xenograft models of human ovarian cancer. Mol Ther. 10, 1032-1042 (2004).
- Greenaway, J., Moorehead, R., Shaw, P., Petrik, J. Epithelial-stromal interaction increases cell proliferation, survival and tumorigenicity in a mouse model of human epithelial ovarian cancer. Gynecol Oncol. 108, 385-394 (2008).
- Connolly, D. C. Animal models of ovarian cancer. Cancer Treat Res. 149, 353-391 (2009).
- Sadikot, R. T., Blackwell, T. S. Bioluminescence imaging. Proc Am Thorac Soc. 2, 537-540 (2005).
- Lehmann, S. Longitudinal and multimodal in vivo imaging of tumor hypoxia and its downstream molecular events. Proc Natl Acad Sci U S A. 106, 14004-14009 (2009).
- Connolly, D. C., Hensley, H. H. Xenograft and Transgenic Mouse Models of Epithelial Ovarian Cancer and Non-Invasive Imaging Modalities to Monitor Ovarian Tumor Growth In Situ: Applications in Evaluating Novel Therapeutic Agents. Current Protocols in Pharmacoogy. 45, (2009).
