في الجسم الحي التصوير والعلاجات العلاجية في الفأر نموذج مثلي من سرطان المبيض
Summary
النماذج الحيوانية مثلي من تكرار الاصابة بسرطان المبيض أفضل الأمراض التي تصيب البشر ، وبالتالي تعزيز فهمنا لتطور السرطان واستجابة الورم للعلاج. نموذج الفأر حقنة من intrabursal luciferase ، معربا عن الخلايا السرطانية في المبيض. إدارة العلاج خلال أنبوب تغذية عن طريق الفم. ويتم رصد نمو الورم عن طريق<em> في الجسم الحي</em> التصوير النظام.
Abstract
ويمثل سرطان الإنسان أفضل واستجابة للعلاج في النماذج الحيوانية مثلي. وتصف هذه الورقة وضع نموذج الفأر مثلي الاصابة بسرطان المبيض ، وعلاج سرطان الفم عن طريق تقديم الأدوية ، ومراقبة سلوك الخلايا السرطانية في الاستجابة للعلاج المخدرات في الوقت الحقيقي باستخدام نظام التصوير في الجسم الحي. في هذا النموذج مثلي ، يتم تطبيق خلايا ورم المبيض معربا عن luciferase موضعيا عن طريق حقنها مباشرة في الجراب الماوس حيث تم تضمينه كل المبيض. عند حقن D – luciferin ، ركيزة من luciferase يراعة ، luciferase – معربا عن خلايا توليد الإشارات تلألؤ بيولوجي. تم الكشف عن هذه الإشارة من قبل نظام التصوير في الجسم الحي ، ويتيح وسيلة غير الغازية لرصد نمو الورم ، والتوزيع ، والانحدار في الحيوانات الفردية. إدارة المخدرات عن طريق الفم بالتزقيم يسمح لحجم الجرعة القصوى 10 مل / كغ من وزن الجسم ليتم تسليمها مباشرة إلى المعدة ويشبه تسليم المخدرات في العلاجات السريرية. ولذلك ، وصفت تقنيات هنا ، ووضع نموذج الفأر مثلي الاصابة بسرطان المبيض ، والتسليم عن طريق الفم من المخدرات ، والتصوير في الجسم الحي ، هي مفيدة لفهم أفضل للسرطان المبيض الإنسان وتحسين العلاج وسوف تستهدف هذه الأمراض.
Protocol
Discussion
سرطان المبيض هو السبب الرئيسي للوفاة بين جميع الأورام الخبيثة الجهاز التناسلي للمرأة 1. ارتفاع معدل الوفيات من هذا المرض يرجع الى حد كبير على التشخيص في وقت متأخر وعدم وجود طرق التشخيص الموثوق 2. وعلاوة على ذلك ، والعلاج الكيميائي التقليدي غالبا ما واجه مقاومة كيميائية والانتكاس من السرطان 3. ولذلك ، مطلوب رواية المداواة لاستهداف هذا المرض بفعالية. في تطوير علاج جديد يستهدف الإنسان بسرطان المبيض ، من المهم جدا لتطوير نموذج حيواني التمثيلية.
نموذج حيواني مثلي له مزايا أكثر من النماذج التقليدية طعم أجنبي (على سبيل المثال تحت الجلد أو الحقن داخل الصفاق من الخلايا السرطانية) في ان 1) وهي منقولة عن موقع الورم الرئيسي للتشكيل ، 2) أنه يمثل موقع مشترك للالانبثاث ، و 3) أنه يوفر لخلايا الورم تفاعل مع المناسبة المكروية 4 ، 5 ، 6 ، 7 ، 8. القوارض وغشاء فريدة جرابي الذي يحيط المبيض والمستمر مع قناة البيض. هذا التشريح فريدة من القوارض يسمح حقن الخلايا السرطانية orthotopically المبيض. Intrabursally حقن الخلايا السرطانية المبيض تتصرف مشابهة لمرض الإنسان ، وبالتالي تزايد داخل غشاء intrabursal ونشر في التجويف البريتوني مع تقدم الورم. حقن الخلايا معربا عن luciferases ستابلي أو البروتينات الفلورية كما يسمح السلوك تتبع الخلايا السرطانية في الوقت الحقيقي. Bioluminescent و / أو الفلورسنت تكنولوجيا التصوير يجعل من الممكن للخلايا الورم الصور مرارا وتكرارا على مدى فترة ممتدة من الزمن ، ودراسة نمو الورم ، والتوزيع ، والانحدار في غير الغازية نحو 9 ، 10 ، 11.
في إنشاء نموذج مثلي ، فمن الأهمية بمكان بسرعة لإزالة الإبرة من الجراب على الحقن. ازالة الاختام المفاجئ للموقع ثقب إبرة ، ويمنع تسرب حقن الخلايا. ومع ذلك ، في الوقت نفسه ، ينبغي للحركة أن يكون لطيف لا لتمزيق الجراب. إذا تسرب يحدث أثناء الحقن ، ويمكن أن يسبب الخلايا إلى البذور في البطن ويحتمل أن نخلط الدراسة ، أي قبل الأوان ينتشر خارج المبيض. في هذا الحدث ، ينبغي أن يسجل الحيوان محددة واتباعها لتطوير مواقع متعددة في ورم في الغشاء البريتوني قبل المعالجة أو التخلص بدلا من التحليلات اللاحقة. قبل أداء بالتزقيم عن طريق الفم ، فمن الأهمية بمكان للتحقق من طول الأنبوب من خلال قياس بالتزقيم من غيض من رأس الحيوان للضلع الماضي. ومن المفيد للاحتفال أنبوب في الأنف والحيوان لا تمرير أنبوب الماضي هذه العلامة. ويمكن إدخال أنبوب الماضية نتيجة هذه العلامة في ثقب في المعدة. تحديد طول الأنبوب له أهمية خاصة مع الحيوانات الأصغر سنا أو الحيوانات وزنها أقل من 20 جرام. عند إدخال الإبرة بالتزقيم أسفل المريء ، ويجب أن يكون هناك أي مقاومة أو النضال من الحيوان. فمن المهم عدم إعطاء الحل أو تعليق سريع جدا لأن هذا يمكن أن يؤدي إلى ارتداد وتسليم في وقت لاحق غير دقيقة حجم الجرعة ، وكذلك إضافة الإجهاد على الحيوان. لتحقيق نتائج مماثلة التصوير من وقت لآخر ، فمن المستحسن أن تبقي في الوقت متناسقة بين حقن الركيزة luciferase والتصوير. يمكن تحديد الفترة الزمنية من خلال اتخاذ سلسلة من الصور بعد الحقن الركيزة ومراقبة حركية الاشارات. وضع نموذج الفأر مثلي الاصابة بسرطان المبيض ، والتسليم عن طريق الفم من المخدرات ، والتصوير في الجسم الحي والتقنيات اللازمة لفهم أفضل للتطور وانتشار سرطان المبيض وتقييم الأنظمة العلاجية التي قد الرواية في النهاية الى تحسين نتائج المريض مع هذا المرض الفتاك.
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ketamine Hydrochloride | Vedco, Inc. | Not Available | ||
| Xylazine Hydrochloride | Lloyd, Inc. | Not Available | ||
| Acepromazine | Vedco, Inc. | Not Available | ||
| D-Luciferin Potassium Salt | Caliper Life Sciences | 122796 |
Riferimenti
- Jemal, A. Cancer statistics. CA Cancer J Clin. 59, 225-249 (2009).
- Lynch, H. T. Hereditary ovarian carcinoma: heterogeneity, molecular genetics, pathology, and management. Mol Oncol. 3, 97-137 (2009).
- Yap, T. A., Carden, C. P., Kaye, S. B. Beyond chemotherapy: targeted therapies in ovarian cancer. Nat Rev Cancer. 9, 167-181 (2009).
- Killion, J. J., Radinsky, R., Fidler, I. J. Orthotopic models are necessary to predict therapy of transplantable tumors in mice. Cancer Metastasis Rev. 17, 279-284 (1998).
- Bibby, M. C. Orthotopic models of cancer for preclinical drug evaluation: advantages and disadvantages. Eur J Cancer. 40, 852-857 (2004).
- Shaw, T. J., Senterman, M. K., Dawson, K., Crane, C. A., Vanderhyden, B. C. Characterization of intraperitoneal, orthotopic, and metastatic xenograft models of human ovarian cancer. Mol Ther. 10, 1032-1042 (2004).
- Greenaway, J., Moorehead, R., Shaw, P., Petrik, J. Epithelial-stromal interaction increases cell proliferation, survival and tumorigenicity in a mouse model of human epithelial ovarian cancer. Gynecol Oncol. 108, 385-394 (2008).
- Connolly, D. C. Animal models of ovarian cancer. Cancer Treat Res. 149, 353-391 (2009).
- Sadikot, R. T., Blackwell, T. S. Bioluminescence imaging. Proc Am Thorac Soc. 2, 537-540 (2005).
- Lehmann, S. Longitudinal and multimodal in vivo imaging of tumor hypoxia and its downstream molecular events. Proc Natl Acad Sci U S A. 106, 14004-14009 (2009).
- Connolly, D. C., Hensley, H. H. Xenograft and Transgenic Mouse Models of Epithelial Ovarian Cancer and Non-Invasive Imaging Modalities to Monitor Ovarian Tumor Growth In Situ: Applications in Evaluating Novel Therapeutic Agents. Current Protocols in Pharmacoogy. 45, (2009).
