Ablação hepática direcionada: Induzir morte de hepatocito com Metronidazol em Larvas transgênicas de zebrafish
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Choi T.Y., et al. Ablação específica de hepatócito em zebrafish para estudar regeneração hepática movida a biliar. J. Vis. Exp. (2015)
O artigo descreve a ablação hepática direcionada, um método para induzir a morte de hepatocitte com metronidazol em larvas transgênicas de zebrafish. O protocolo amostral descreve o processo de geração, manipulação e avaliação da ablação hepática direcionada em zebrafish.
Protocol
1. Preparação de embriões/larvas Transfira 100 embriões para uma placa de petri de 100 mm com 25 ml de água de ovo. Mantenha não mais do que 100 embriões por placa de petri e elevá-los a 28 °C. Para inibir a pigmentação, adicione fenilhiourea (PTU) nas placas de petri antes das 10 horas pós-fertilização (hpf), e eleve embriões/larvas até 80 hpf. A concentração final de PTU é de 0,2 mM.ATENÇÃO: A TEPT é tóxica. Use de acordo com as diretrizes de manuseio adeq…
Materials
| 3-amino benzoic acid ethyl ester (Tricaine) powder | Sigma-Aldrich | A5040 | Make 0.4% (15 mM) tricaine stock : Bring 0.4 g tricaine to 100 mL with egg water. Adjust to pH 7. |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich | D8418 | |
| Metronidazole | Sigma-Aldrich | M1547 | |
| N-Phenylthiourea (PTU) | Sigma-Aldrich | P7629 | |
| 100 x 15 mm petri dish | Denville Scientific Inc. | M5300 | |
| egg water | 0.3 g/L of sea salts ‘Instant Ocean’ and 0.5 mM CaSO4 in distilled water. | ||
| epifluorescence microscope | Leica Microsystems | M205FA |
Citar este artículo
Targeted Liver Ablation: Inducing Hepatocyte Death with Metronidazole in Transgenic Zebrafish Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20181, doi: (2023).