אבלציה ממוקדת בכבד: גרימת מוות Hepatocyte עם Metronidazole בזחלים זברה-דג מהונדס
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: צ’וי T.Y., ואח ‘. אבלציה ספציפית להפטוציטים בזברהפיש לחקר התחדשות הכבד המונעת על ידי המרה. ג’יי ויס אקספ. (2015)
המאמר מתאר אבלציה ממוקדת בכבד, שיטה לגרימת מוות hepatocyte עם metronidazole בזחלים זברה מהונדסים. פרוטוקול המדגם מתאר את תהליך הייצור, המניפולציה וההערכה של אבלציה ממוקדת בכבד בזברה- דג.
Protocol
1. הכנת עוברים/זחלים מעבירים 100 עוברים לתבשיל פטרי 100 מ”מ עם 25 מ”ל של מי ביצה. שמור לא יותר מ 100 עוברים לכל צלחת פטרי ולהרים אותם ב 28 מעלות צלזיוס. כדי לעכב פיגמנטציה, להוסיף phenylthiourea (PTU) לתוך צלחות פטרי לפני 10 שעות לאחר ההפריה (hpf), ולהרים עוברים / זחלים עד 80 hpf. הריכוז הסופי של PTU הוא 0.2 מ”מ….
Materials
| 3-amino benzoic acid ethyl ester (Tricaine) powder | Sigma-Aldrich | A5040 | Make 0.4% (15 mM) tricaine stock : Bring 0.4 g tricaine to 100 mL with egg water. Adjust to pH 7. |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich | D8418 | |
| Metronidazole | Sigma-Aldrich | M1547 | |
| N-Phenylthiourea (PTU) | Sigma-Aldrich | P7629 | |
| 100 x 15 mm petri dish | Denville Scientific Inc. | M5300 | |
| egg water | 0.3 g/L of sea salts ‘Instant Ocean’ and 0.5 mM CaSO4 in distilled water. | ||
| epifluorescence microscope | Leica Microsystems | M205FA |
Citar este artículo
Targeted Liver Ablation: Inducing Hepatocyte Death with Metronidazole in Transgenic Zebrafish Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20181, doi: (2023).