استئصال الكبد المستهدف: تحفيز موت خلايا الكبد مع ميترونيدازول في يرقات حمار وحشي معدلة وراثيا
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: تشوي ت. ي. وآخرون. استئصال الكبد محددة في حمار وحشي لدراسة تجديد الكبد الصفراوية يحركها. ج. فيس إكسب. (2015)
تصف المقالة استئصال الكبد المستهدف ، وهو طريقة لتحفيز موت خلايا الكبد مع الميترونيدازول في يرقات حمار وحشي معدلة وراثيا. يصف بروتوكول العينة عملية توليد ومعالجة وتقييم استئصال الكبد المستهدف في سمك الحمار الوحشي.
Protocol
1. إعداد الأجنة / اليرقات نقل 100 جنين إلى طبق بتري 100 ملم مع 25 مل من ماء البيض. احتفظ بما لا يزيد عن 100 جنين لكل طبق بتري وربيها عند 28 درجة مئوية. لتثبيط التصبغ، أضف الفينيلثيوريا (PTU) إلى أطباق البتري قبل 10 ساعات بعد الإخصاب (hpf)، ورفع الأجنة / اليرقات حتى 80 حصان. التركيز النهائي ل PTU هو 0.2…
Materials
| 3-amino benzoic acid ethyl ester (Tricaine) powder | Sigma-Aldrich | A5040 | Make 0.4% (15 mM) tricaine stock : Bring 0.4 g tricaine to 100 mL with egg water. Adjust to pH 7. |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich | D8418 | |
| Metronidazole | Sigma-Aldrich | M1547 | |
| N-Phenylthiourea (PTU) | Sigma-Aldrich | P7629 | |
| 100 x 15 mm petri dish | Denville Scientific Inc. | M5300 | |
| egg water | 0.3 g/L of sea salts ‘Instant Ocean’ and 0.5 mM CaSO4 in distilled water. | ||
| epifluorescence microscope | Leica Microsystems | M205FA |
Citar este artículo
Targeted Liver Ablation: Inducing Hepatocyte Death with Metronidazole in Transgenic Zebrafish Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20181, doi: (2023).