標的性肝アブレーション:トランスジェニックゼブラフィッシュ・ラベーでメトロニダゾールによる肝細胞死を誘発する
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:チェ・T・Y、他胆道駆動の肝臓再生を研究するゼブラフィッシュの肝細胞特異的アブレーション.J. ヴィス・エクス(2015)
この記事では、トランスジェニックゼブラフィッシュ幼虫のメトロニダゾールで肝細胞死を誘導する方法である標的肝アブレーションについて説明しています。サンプルプロトコルは、ゼブラフィッシュの標的肝アブレーションを生成、操作、評価するプロセスを記述しています。
Protocol
1. 胚/幼虫の準備 100個の胚を25mlの卵水で100mmのシャーレに移します。シャーレ1個につき100個以下の胚を保管し、28°Cで上げます。 色素沈着を抑制するには、フェニルチオ尿症(PTU)を受精後10時間(hpf)前のシャーレに添加し、80hpfまで胚/幼虫を上げる。PTUの最終濃度は0.2 mMです。注意: PTU は毒性があります。適切な取り扱いガイドラインに従って使用してください?…
Materials
| 3-amino benzoic acid ethyl ester (Tricaine) powder | Sigma-Aldrich | A5040 | Make 0.4% (15 mM) tricaine stock : Bring 0.4 g tricaine to 100 mL with egg water. Adjust to pH 7. |
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich | D8418 | |
| Metronidazole | Sigma-Aldrich | M1547 | |
| N-Phenylthiourea (PTU) | Sigma-Aldrich | P7629 | |
| 100 x 15 mm petri dish | Denville Scientific Inc. | M5300 | |
| egg water | 0.3 g/L of sea salts ‘Instant Ocean’ and 0.5 mM CaSO4 in distilled water. | ||
| epifluorescence microscope | Leica Microsystems | M205FA |
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Targeted Liver Ablation: Inducing Hepatocyte Death with Metronidazole in Transgenic Zebrafish Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20181, doi: (2023).