यहां, प्रोटोकॉल वर्णन करता है कि मेजबान-रोगज़नक़ इंटरैक्शन का अध्ययन करने के लिए एक ही प्रजाति में उठाए गए प्राथमिक एंटीबॉडी का उपयोग करके डबल लेबलिंग इम्युनोफ्लोरेसेंस कैसे किया जाए। इसके अलावा, यह इस प्रोटोकॉल में एक अलग मेजबान से तीसरे एंटीबॉडी को शामिल कर सकता है। यह दृष्टिकोण किसी भी सेल प्रकार और रोगजनकों में किया जा सकता है।