경구 전송<em> 리스테리아</em> 오염 된 음식의 섭취를 통해 마우스의
Summary
이 논문은 사용하는 마우스의 경구 감염에 대한 새로운 방법을 설명<em> 리스테리아</em음식> – 오염. 프로토콜은 쉽게 다른 식품 매개 세균성 병원체에 사용하기 위해 적용 할 수 있습니다.
Abstract
L. monocytogenes에 인간의 음식을 매개로 감염을 일으킬 통성 세포 내 세균성 병원균이다. 거의 밀접하게 인간의 질병을 모방 작은 동물 모델의 부족으로 인해 리스테리아 증의 위장 단계에 대한 알려져있다. 이 문서는 L.의 구두 전송을위한 새로운 마우스 모델을 설명 모노 사이토 제네스. 쥐 먹이 L.,이 모델을 사용하여 monocytogenes에 오염 된 빵 감염 (BALB / C / J으로 /) 또는 저항 (C57BL / 6) 마우스 종자의 전신 확산의 정도를 변화 뒤에 위장 감염의 이산 위상을 보유하고 있습니다. 감염의 나중 단계 동안, 담즙 방광과 뇌에 보급이 관찰된다. 리스테리아 증의 식품 매개 모델은 높은 재현성 전문 기술을 필요로하지 않으며, 세균 분리 및 실험실 마우스 종자의 다양한에서 사용할 수 있습니다. 따라서, 그것은 L.에 의해 사용되는 두 독성 전략을 연구하는 이상적인 모델입니다 monocytogenes에 </EM> 장 식민지뿐만 아니라, 침략 음식을 부담 세균 감염에 대한 숙주의 반응을 촉진합니다.
Introduction
리스테리아는 인간의 음식을 매개로 감염을 일으킬 통성 세포 내 세균성 병원균이다. 박테리아는 염장 등 건조 우리의 식품 공급을 보호하는 데 사용되는 프로세스의 많은 저항, 또는 냉동 1,2 감염은 일반적으로 소비하기 전에 가열하지 않는 가공 "바로 먹을 수있는"음식에 연결되어 . L. 여러 이전 발생에서, 소스 monocytogenes에 오염 된 식품이 확인되었으며, 노출 된 개인의 제한된 그룹이 밀접하게 3-6 측정 하였다. 이러한 예에서, 그렇지 않으면 건강한 개인에있는 임상 질환은 가벼운 자기 제한 위장관에서 더 심한 장과 전신 감염이 필요한 입원. L.로 변화 신생아와 노인을 포함하여 면역 손상 개인에 monocytogenes의 감염 심지어 항생제 치료와 함께, 높은 사망률 (25-30%)과 관련되어있다 <s7,8>까지. 약간은 L.의 감염 량에 대해 잘 알려져 있습니다 monocytogenes에, 또는 작은 동물 모델의 부족으로 인해 주로 경구 전송 후 감염에 감수성을 지배하는 호스트 요인이 감염 결과의 recapitulates이 넓은 범위.
리스테리아 증의 가장 널리 사용되는 모델 쥐의 정맥 주사 (IV) 예방 접종이다. IV 모델은 높은 재현성, 그리고 감염 9,10 동안 순진와 메모리 T 세포 반응을 연구에 매우 유용했습니다. IV 모델의 단점은 완전히 감염의 창자 단계를 무시한다는 것입니다. 음식을 매개로 전송 한 후, 창자 점막은 아마도 느려지고 지속적으로 말초 조직에 배포 할 수 있습니다 박테리아의 수를 제한하는 장벽을 제공합니다. 대조적으로, 전체 접종은 정맥 투여 분 이내에 비장과 간에서 찾을 수 있습니다, 그리고 생물이 큰 알약은 타고난 면역 D를 압도 할 수 있습니다이러한 조직에서 efenses. 많은 양 (10 9 -10 11 CFU)는 일반적으로 장내 정착이 10을 달성하기 위해 필요하기 때문에 위관 쥐의 구강 감염은 일반적으로는 그다지 사용됩니다. 또한, 먹이 바늘 위내 (IG) 접종 전신 확산에 앞서 위장 감염의 재현 기간을 생성하지 않습니다. 일부 실험실은 L.보고있다 다른 사람이 48 HPI 11-15까지 더 체계적 확산을 보여 주었다 동안 monocytogenes는이 4-12 시간 후 감염 (HPI)에서 비장과 간을 도달합니다. 이 실험실 간 변동은 식도의 안감에 약간의 외상을 초래할 수있는 IG 접종의 침략 자연의 결과, 그리고 박테리아의 직접 혈류의 침략을 촉진 할 수 있습니다.
우리는 최근 경구 L.의 새로운 마우스 모델을 개발 밀접하게 인간의 질병 16의 모든 단계를 모방 monocytogenes의 감염. 마우스가 연속 조각을 섭취 할 때 감염이 발생식품, 비 외상성 인 과정을, 민화 및 실험실 연구자에 의해 전문 기술을 필요로하지 않습니다. 시간의 이산 시간 (36-48 시간)의 경우, L. 모노 사이토 제네스는 재현성 따라서 창자 점막을 통해시키다 및 주변 조직에 배포하는 리스테리아 병원균에 의해 사용되는 메커니즘의 조사를 허용, 오직 위장관 식민지. 중요한 모델이 감염 호스트 타고난 저항의 차이를 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 이전의 연구에서, 우리는 BALB / C / J 마우스에 의해 /는 L.의 지수 복제, 식품 매개 리스테리아 증에 매우 민감한 것으로 나타났다 창자, 비장, 간 및 담즙 방광 16에서 발생 monocytogenes에. 대조적으로, C57BL / 6 마우스 L. 만 과도 식민지로, 식품 매개 감염에 저항 하였다 monocytogenes는이 조직의 각각에서 발생. 밀접하게 인간의 질병을 모방 식품 매개 모델의 추가 기능은 자연의 보급이다뇌 감염의 나중 단계 (5-7 dpi로) 동안 발생합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
근친 마우스는 하루의 모든 시간에 먹이를 균일하게 수용하지 않습니다, 그리고 오염 된 빵을 먹는 의지는 두 균주의 종류와 생쥐 17 세의 나이에 따라 달라집니다. 우리의 경험에서 6-9 주 이전 B6 생쥐는 하루 중 어느 시간에 먹이를 수용하지만, 그것은 자신의 어두운주기 동안 제공되지 않는 한 BALB 마우스는 일관되게 빵 조각을 먹을 수 없습니다. 어두운 단계가 실험실 직원에 대한 일반 …
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 SEFD에게 수여 국립 보건원 (AI079442 및 AI091918)에서 교부금에 의해 지원되었다
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| Brain Heart Infusion Agar | Difco | BD-241830 | |
| Lithium chloride | Sigma | L9650 | |
| Glycine | Omnipur | 4840 | |
| EDTA | Gibco | 15575-038 | |
| DTT | Sigma | D5545 | |
| Collagenase, type IV | Worthington | LS004089 | |
| DNAse I | Worthington | LS002007 | |
| Diff-Quik | Dade-Behring | B4132-1A | |
| PowerGen 1000 homogenizer | Fisher | 14-261-06 | |
| stainless steel type 304 mesh #80 | Small Parts, Inc. | CX-0080-C | |
| Cytospin | Statspin | M801-22 |
Referenzen
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