هذا الأسلوب ينطوي علي استخدام البيانات التشخيصية السريرية لمرضي سرطان البروستاتا من أجل توجيه إجراءات أخذ العينات ، عندما النسيج البيوانكينج بعد استئصال البروستاتا الجذرية. هذا يتغلب علي القضايا مع أساليب نشرت سابقا حول الكفاءة وتوافر الانسجه الطازجة لمجموعه أوسع من التطبيقات المصب.
الطرق السابقة لأنسجه البروستاتا بيوانكينج ، بعد استئصال البروستاتا الجذري ، وشملت عموما أخذ العينات عشوائي. من أجل زيادة الكفاءة ، وتمكين مجموعه أكبر من التطبيقات المصب ، تم تطوير طريقه أكثر استهدافا لأخذ عينات من انسجه البروستاتا. هنا نستخدم كلا من التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) وبيانات الخزعة لاستهداف مناطق معينه من الجهاز لأخذ العينات. وتشمل هذه الطريقة استخدام جهاز تشريح البروستاتا المنشورة سابقا الذي يزيل شريحة 5 ملم عرضيه من منطقه محدده سلفا من البروستاتا ، تليها أزاله الخزعات 6 ملم لكمه من مناطق محدده مسبقا من هذه الشريحة. ويمكن تخزين هذه العينات المجمدة أو الثابتة لأغراض بيوانكينج ، أو استخدامها طازجه علي الفور مع 70 ٪ من الثقة من محتوي الورم ، بالمقارنة مع 10 ٪ من الثقة نهج أخذ العينات عشوائي. وهذا يتيح استخدام جميع التقنيات القياسية المصب مثل الجينوم ، والبروتينات أو العمل النسيجي ، ولكن أيضا العمل الذي يتطلب الانسجه الطازجة مثل التصوير الانسجه الحية أو الثقافة المجرية السابقة.
الوصول إلى الانسجه البشرية عاليه الجودة سرطان البروستاتا شرط أساسي لقياده البحوث الفعالة في هذا المجال. وهناك عدد من الطرق القائمة لعينه من انسجه البروستاتا بعد استئصال البروستاتا الجذرية للبحوث. عاده ما تنطوي علي استخدام الخزعات لكمه لاتخاذ عينات عشوائية من شريحة جديده ، مجمده أو ثابته من انسجه البروستاتا ، ويؤكد باثر رجعي ما إذا كان الورم موجودا في كل عينه من الدم & يووسين (H & E) كما تقييمها من قبل اخصائي امراض المسالك البولية1،2،3،4،5. وقد قام استعراض حديث بتجميع لمحه عامه عن هذه الأساليب الحالية6. هذه الطرق مفيده لبعض التطبيقات المصب ، حيث يمكن تخزين الانسجه وتقييمها لمحتوي الورم في وقت لاحق ، مثل التحليلات الجينية علي نطاق واسع مثل الاتحاد الدولي لجينوم السرطان (ICGC) وأطلس الجينوم السرطاني (TCGA) 4,7. ومع ذلك ، يمكن تحسين هذه الطرق في إذا كنا لاستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) و/أو البيانات خزعة لاستهداف مناطق معينه من البروستاتا لأخذ العينات. ومن شان ذلك ان يحسن المنهجية بطريقتين ؛ أولا ، عن طريق الحد من عدد عينات الانسجه التي تم جمعها ، وزيادة الكفاءة والحد من الضغط علي أقسام الامراض وتكلفه التخزين ، وثانيا ، من خلال السماح الانسجه الطازجة لاستخدامها علي الفور دون الحاجة إلى تاكيد فوري من محتوي الورم ، لحاله جديده من التقنيات المصب الفن مثل التصوير الانسجه الحية ، الجيل العضوي أو الثقافة المجرية السابقة. وقد أدت هذه الحاجة البحثية إلى تطوير الشعب (المريض عينات البروستاتا للبحث) الأسلوب ، والنتائج من الحالات 84 الاولي التي استخدمت بيوانكيد الناس نشرت مؤخرا8. وقد تم أيضا نشر الاختلاف من هذا الأسلوب مع ثلاثه الابعاد (3d) المطبوعة جهاز التشريح والعفن المريض محدده ، من أجل تسهيل التصوير بالرنين المغناطيسي السابق الجسم الخارجي علي الانسجه قبل وبعد تثبيت9،10.
وتشمل الخطوات الهامه في هذا البروتوكول تحديد منطقه الورم لأخذ العينات ، وقياس البروستاتا ، وأخذ عينات الانسجه. أولا ، قياس التصوير بالرنين المغناطيسي لتحديد المنطقة الصحيحة لأخذ العينات هو المفتاح. نحن نظهر هذه الطريقة في الفيديو المصاحب. ومع ذلك ، نوصي أيضا بتاكيد القياسات مع اخصائي أشعه في الدرجة الاولي. الملاحظات السريرية واضحة التي تشير الباحث نحو منطقه صور التصوير بالرنين المغناطيسي التي تحتوي علي آلافه مؤشر مثاليه. ثانيا ، يجب اجراء قياس البروستاتا مع الرعاية ، وضمان ان يتم عقد الحاكم في زاوية لقياس طول كامل من قاعده إلى قمة ، موازيه لل الامامي من البروستاتا. ثالثا ، ينبغي تاكيد المناطق السرطانية قبل أخذ العينات من خلال الفحص البصري لشريحة الانسجه فيما يتعلق بصوره التصوير بالرنين المغناطيسي الاصليه ، وتحسس الانسجه (في بعض الحالات يمكن ان تشعر منطقه الورم بكثافة أكبر) ، وتقييم لون النسيج بصريا (في بعض حالات الورم سوف تظهر أكثر شاحب من الانسجه الحميدة المحيطة بها).
وقد تم تنفيذ هذا البروتوكول بالبالكامل في دوري/UCLH من قبل الباحثين دكتوراه غير السريرية, زميل علم الامراض, الاستشاريين علم الامراض, والفنيين البحوث. وفي تجربتنا ، يمكن استخلاص جميع خطوات البروتوكول في اطار عشر حالات بصرف الاعتبار عن الخلفية التقنية. ومع ذلك ، نوصي بالتدريب من اخصائي الاشعه فيما يتعلق بقياس التصوير بالرنين المغناطيسي والتدريب من طبيب الامراض فيما يتعلق بالتشريح في المقام الأول. يمكن تعديل البروتوكول باستخدام مقبض التقطيع المطبوع ثلاثي الابعاد ، كما تم نشره سابقا في10.
وتشمل القيود المحتملة لهذه التقنية خطر عرقله التشخيص. تشريح البروستاتا هو خطوه رئيسيه ، والتي يمكن ان تعيق علي الدرجات أو معدلات الهامش الإيجابي إذا فعلت بشكل غير صحيح. هناك نوعان من القضايا المحتملة هنا. أولا ، إذا تمت أزاله كل من آلافه المؤشر واستخدامها لتجريب الانسجه الطازجة علي الفور ، لن يتم اجراء التشخيص السريري الروتيني لهذه آلافه والمريض قد يساء تشخيصها بأنها مصابه بسرطان الصف السفلي. ولتجنب ذلك ، ينبغي علي الباحث مناقشه خطه أخذ العينات مع اخصائي الامراض الاستشارية الذي سيراجع القضية بشكل روتيني ، قبل أخذ العينات ، والاتفاق علي عدد ومكان العينات التي سيتم أخذها. قد يتم استبعاد الأورام الصغيرة محليا لهذا السبب. ثانيا ، إذا لم يتم تثبيت كبسوله البروستاتا بشكل صحيح إلى مجلس الفلين قبل التثبيت ، وهذا يمكن ان يسمح الانسجه الداخلية لانتفاخ الخارج اثناء التثبيت ، وتغيير الهوامش الجراحية. وهذا يمكن ان يؤدي إلى هامش إيجابي كاذبه, حيث يظهر الورم المتبقية للاقامه في كبسوله بحته بسبب تشويه الانسجه.
تكمن اهميه هذه التقنية فيما يتعلق بالأساليب الموجودة أساسا مع استهداف الأورام. وقد تم حتى الآن نشر مجموعه من الطرق لأخذ عينات من العينات الجذرية لاستئصال البروستاتا ؛ ومع ذلك ، هذه كلها تعتمد علي نهج أخذ العينات عشوائي كليا أو جزئيا1،2،3،4،5،6،7. استخدام الخزعة وخاصه بيانات التصوير بالرنين المغناطيسي هنا قد تحسنت الكفاءة ، مما يسمح لأخذ العينات المخفضة مع زيادة الثقة في الحصول علي الانسجه السرطانية8.
وتسمح التطبيقات المستقبلية لهذه الطريقة باعتماد مجموعه أوسع من التقنيات النهائية من الأساليب السابقة لأخذ العينات. علي سبيل المثال ، توافر الانسجه الطازجة التي لديها احتمال كبير لان يكون الورم يعني انه يمكن استخدام تقنيات الانسجه الطازجة الأكثر تكلفه و/أو كثيفه العمالة ، حيث ان العديد من العينات غير مطلوبه لضمان وجود الورم. وهذا يمكن ان تشمل وليست مقتصرة علي, السابقة الجسم البيولوجي الثقافة, التصوير بالرنين المغناطيسي السابقة, صور متقدمة وناسخه.
The authors have nothing to disclose.
ويرغب المؤلفون في الاعتراف بسرطان البروستاتا في المملكة العربية البريطانية لتمويل SH تحت مركز التميز البريطاني لسرطان البروستاتا وزمالة السفر الجائزة (TLD-PF16-004) وحصان تحت الابتكار (PG14-018-TR2). وقد حظي هذا العمل بدعم الباحثين في مركز البحوث الطبية الحيوية في مستشفيات المعهد الوطني للبحوث الصحية بجامعه لندن.
6 mm biopsy punch | Fisher Scientific | 13404607 | Disposable biopsy punches for removing 6 mm tissue samples |
Black Ink | Leica Biosystems | 3801753 | Tissue marking & margin dye |
Blue Ink | Leica Biosystems | 3801751 | Tissue marking & margin dye |
Chainmail hand glove | Arco | 1456803 | Chainmail gloves to protect hand during slicing |
Cork board | Fisher Scientific | 12396447 | Cork board for pinning prostate to following sampling procedure |
Needles | SLS (Scientific Laboratory supplies) | SYR6112 | Sterile needles to use to pin tissue to cork board following sampling |
Prostate slicing aparatus | Insitute of Cancer Research, London | NA – must be obtained under MTA | A kit containing the slicer handle, blades, spacer, base, walls and pins |