Sunulan median sinir farklı üretmek için bir protokoldür (MN) lezyonlar ve sıçan da onarım. Ayrıca, protokol çeşitli noninvaziv davranış testleri ve fizyolojik ölçümler kullanarak sinirfonksiyonel kurtarma değerlendirmek için nasıl gösterir.
Bu araştırmanın temel amacı, sıçanda farklı median sinir (MN) lezyonlarının nasıl oluşturulup onarılabildiğini göstermektir. Ayrıca postoperatif fizyoterapisimüle etmek için farklı yöntemler sunulmuştur. Multipl standart stratejiler periferik sinir lezyonu ve onarımı bir MN modeli kullanarak motor ve duyusal iyileşme değerlendirmek için kullanılır, böylece sonuçların kolay karşılaştırılması na izin. MN yaralanması geçiren sıçanlara ameliyat sonrası fizyoterapi benzeri bir ortam sağlamak için çeşitli seçenekler mevcuttur. Son olarak, kağıt çeşitli noninvaziv testler (yani, kavrama testi, pin dikmek testi, merdiven basamak yürüme testi, ip tırmanma testi ve yürüme izi analizi) ve fizyolojik ölçümler (kızılötesi termografi, elektroneuromyography, fleksiyon gücü değerlendirmesi ve fleksör carpi radialis kas ağırlığı tayini) kullanarak MN kurtarma değerlendirmek için bir yöntem sağlar. Bu nedenle, bu model özellikle insan türüne sonuçların ekstrapolasyon kolaylaştıran, bir klinik senaryo çoğaltmak için uygun görünüyor.
Siyatik sinir periferik sinir araştırmalarında en çok çalışılan sinir olmasına rağmen, sıçan MN analizi çeşitli avantajlar sunar. Örneğin, MN lezyon çalışmalarında eklem kontraktürlerinin insidansı ve etkilenen ekstremitenin otosakatlanma sıklığı azalmaktadır. Ayrıca, MN kas kitleleri ile kaplı değildir, onun diseksiyon daha kolay siyatik sinir daha yapma. Buna ek olarak, MN kurtarma daha erken gözlenir, MN siyatik sinir daha kısa olduğu için. Ayrıca, MN kolulnar sinir paralel bir yol vardır. Bu nedenle, ulnar sinir kolayca MN yaralanmaları onarmak için sinir grefti olarak kullanılabilir. Son olarak, sıçanlarda MN ön bacak ta bulunur, insan üst ekstremite benzer; insanlarda, üst ekstremite en periferik sinir lezyonları sitedir.
Periferik sinir lezyonları travma, enfeksiyon, vaskülit, otoimmünite, malignite ve/veya radyoterapi sonucu düzenli olarak ortaya çıkar1,2. Ne yazık ki, periferik sinir onarımklinik öngörülemeyen ve sık sık hayal kırıklığı sonuçları sunmaya devam ediyor3,4. Etkilenen4,5,,6,7‘ nin beklentisini iyileştirmek için hala önemli ölçüde temel ve çevirisel araştırmalara ihtiyaç duyulduğu konusunda yaygın bir fikir birliği vardır.
Sıçan MN insanların büyük benzerlikler gösterir8,9 ( Şekil1). Aksiller bölgede brakiyal pleksus kaynaklanan, Bu sinir kol medial yönü içine iner, dirsek ulaşan, ve önkol ventral bölmesi kasların çoğunluğu na dallanma. MN ele ulaşır, burada thenar kasları ve ilk iki lumbrikal kasları innerve yanı sıra sıçan ın el derisinin bir parçası9 (Şekil 1).
Sıçan MN kullanarak, yeterli insanlarda periferik sinir lezyonları çoğaltmakmümkündür 10,11,12. Bu sinir alışılmış kullanılan siyatik sinir göre çeşitli potansiyel araştırma avantajları vardır. MN sıçanların ön ekstremite sinde yer aldığından (insan üst ekstremitelerine benzer), pelvik ekstremitenin önemli bir kısmını innerve eden siyatik sinirle karşılaştırıldığında, farenin sağlığı üzerinde çok daha küçük bir etkiyle deneysel olarak zarar görebilir13. Ayrıca, insanlarda en klinik lezyonlar üst ekstremite oluşur, hangi sıçan forelimb karşılık gelir10,11,12,14,15,16.
Bu kağıt sıçanda farklı tipte MN lezyonlarının nasıl üretilebildiğini göstermektedir. Ayrıca postoperatif fizyoterapisimüle etmek için farklı yollar sunulmaktadır. Son olarak, MN fonksiyonel kurtarma değerlendirmek için testler açıklanmıştır. Periferik sinir lezyonu ve onarımının MN modelini kullanarak motor ve duyusal iyileşmeyi değerlendirmek için birden fazla standart strateji mevcuttur, böylece sonuçların kolay bir şekilde karşılaştırılmasına izin verilir. MN modeli özellikle klinik senaryoyu çoğaltmak için uygundur, insan türüne sonuçların ekstrapolasyonunu kolaylaştırır.
Bu kağıt, sıçanda farklı tipte MN lezyonları oluşturmak ve onarmak için bir protokol sunar. Ayrıca, çeşitli noninvaziv davranış testleri ve fizyolojik ölçümler kullanarak bu sinirin fonksiyonel kurtarma değerlendirmek için nasıl göstermektedir.
Özellikle, bu yazıda açıklanan fonksiyonel testlerin birkaçı, yani Merdiven Koşu Testi ve Halat Testi, önemli ölçüde gıda ödülü51,52,,53elde beklentisi ile görevi gerçekleştirmek için sıçan istekli bağlıdır. Bu testlerin bu tür51,52,53bazı sıçan suşları eğitim ve tekrarlayıcı performans için daha uygun olduğu unutulmamalıdır.53 Örneğin, Lewis sıçanlar eğitim aşamasında ve daha sonra51,52,,53hem de bu testlerde kötü performans .
Sıçan konut, deneysel hayvanların fonksiyonel testlerde mevcut bazı unsurları aşina almak için izin ek olarak, doğal keşif davranışı ile uyum içinde hareket geniş özgürlük izin vermelidir19. Bu nedenle, daha yüksek hareket özgürlüğü sağlayan farklı konut biçimleri gösterilmiştir. Büyük kafesler daha sonra fonksiyonel testlerde kullanılan zenginleştirme elemanları ile kişiselleştirilmiştir (örneğin, halatlar ve merdivenler).
Tartışmalı, bu zenginleştirici elemanların yanı sıra dahil çalışan tekerlekler ve bireysel eğitim küreleri ile kafesler periferik sinir sistemi 10 ameliyat insan hastalara sunulan benzer postoperatif fizyoterapi bir form sağlar10.
Önemli ölçüde, bazı yazarlar deri altı dokuları ve kas fasyasının 15 numara neşter le temiz kesilerek kesilmesini savunsa lar da, postoperatif hematom riskini en aza indirmek için bu yapıları incelerken termokoperliğin kullanılması önerilmektedir.
Bu çok sayıda testler sıçanda periferik sinir onarım farklı yönlerini test etmek için geliştirilmiştir unutulmamalıdır, yani aksonal rejenerasyon, hedef reinnervasyon, ve fonksiyonel kurtarma, bazıları bu çalışmanın kapsamı dışında dır29,54,55,56. Örneğin, kinematik analiz29,36,55 ve histomorfometrik değerlendirme29,36,57 yaygın olarak birden fazla yazar tarafından istihdam edilmektedir. Ayrıca, bu testlerin birkaç verimlilik ve / veya tekrarlanabilirlik54maksimize etmek için varyasyonları içerir. Örneğin, mekanik algisemetri (yani, mekanik ağrılı uyaranlara yanıtların değerlendirilmesi) nitel olarak belirli bir von Frey filament kullanılarak değerlendirilebilir, bu makalede açıklandığı gibi, ya da yarı nicel olarak art arda güçlü von Frey filamentler kullanarak, ya da bir yoksunluk yanıtı gözlenene kadar artan baskılar uygulayan elektronik cihazlar kullanarak30,54.
Benzer şekilde, her ne kadar birkaç yazar sıçanda forelimb sinir onarımını değerlendirmek için yürüyüş yolu analizi ni kullansa da, diğer yazarlar tek MN lezyonlarının sıklıkla pati baskılarında tekrarlanabilir değişiklikler üretemediğini iddia etmektedir10,58,59. Ayrıca, bazı bu değişikliklerin kas kurtarma ile orantılı olmayabilir belirttiler10,60. Bu akılda tutulması, bazı araştırmacılar segmental sinir rekonstrüksiyonu sonra yerine neve lezyonlar ısken sonra iyileşme değerlendirirken esas olarak ön planda yürüyüş parça analizi kullanımınısavundular 10 ,50,61.10
Kavrama Testi yaygın MNtarafındankontrol kasların motor kurtarma değerlendirmek için kullanılır16 ,27. Bu test ile elde edilen verilerin tekdüzeliğini ve tekrarlanabilirliğini garanti etmek için Bertelli ve ark.16 tarafından önerilen köklü metodolojiyi kullanarak Kavrama Testi’nin uygulanması önerilir. Ancak, mevcut protokol rutin aşırı stres11,27önlemek için kontralateral pençe immobilize etmez farklıdır. Ayrıca diğer yazarlar, yaralanmamış pençe immobilizing sonra, nicel bir dinamometre veya ölçek27,56kullanarak Kavrama Testi değerlendirmek unutulmamalıdır. Ancak, bu kantitatif değerlendirme araştırmacı nın fare kuyruğu için uyguladığı güçten etkilenebilir26. Ayrıca, dijital fleksör kasları tarafından üretilen gücü ayırt etmek zordur (sadece sıçanm ve Kavrama Testinesnesitarafından innerve 9 ) bilek fleksörleri tarafından üretilen gücü, ulnar sinirkendiinnervasyon alır fleksör karpi ulnaris içerir 9,10,27. Amacıyla bu potansiyel önyargıları atlatmak için denemek için, Bu protokol yaygın insanlarda kas gücü sınıf için kullanılan Tıbbi Araştırma Konseyi Ölçeği benzer bir ordinal ölçek kullanır10,11,62. Alternatif olarak, diğer yazarlar video analizi ve video tabanlı puanlama sistemi11,63kullanarak kavrama ayrıntılı değerlendirme açıklanmıştır.
Siyatik sinir ile karşılaştırıldığında MN kullanmanın potansiyel bir dezavantajı, ikinci sinir ile ilgili daha büyük miktarda bilgi mevcut olmasıdır. Bu, sırayla, önceki deneysel çalışmaların daha zor46,48,,64ile MN ile elde edilen verilerin karşılaştırma yapabilirsiniz. Ayrıca, Siyatik sinir ile karşılaştırıldığında MN küçük boyutu cerrahi manipülasyon daha zor hale getirir8,12,27,56,65.
Bu yazıda açıklanan metodolojinin aksine, elektronnöromiyografi değerlendirmesi kol ve nar bölgelere yerleştirilen transkutanöz monopolar elektrotlar kullanılarak yapılabilir51. Daha az invaziv olmasına rağmen, bu yöntem kol bölgesinde ulnar sinirin kostimülması olasılığı nedeniyle potansiyel karışıklık riski taşır9,51.
Çoğu yazar sıçanda kullanılan tüm testler sonuçlar sağlamak, periferik sinir onarım faktörlerin karmaşık bir dizi bağlıdır olarak, nöron sağkalım, aksonal uzama ve budama, sinaptogenez, denervated duyu organları ve motor üniteleri başarılı yeniden yakalama ve beyin plastisite7,,10,50,66,67.
Son olarak, kemirgen modellerinin önemli bir uyarı sıçan periferik sinirlerin son organlarına çok daha yakın ve homolog insan yapılarından çok daha küçük kesit alanlarına sahip olduğu unutulmamalıdır. Ancak, bu boyut farkı kemirgenlerde daha hızlı deneysel veri garanti, ve insanlar ile karşılaştırıldığında sıçanlarda daha iyi genel sonuçlar beklenen vardır68. Nitekim, çeşitli yazarlar insanlar7,,69kemirgenler kullanarak periferik sinir onarım elde edilen deneysel verileri tahmin çalışırken bakım kullanılması gerektiği konusunda uyarıyorlar. Primat modelleri daha karşılaştırılabilir olarak kabul edilir70. Yine de, onların kullanımı vexing etik, lojistik ve bütçe kısıtlamaları71ile ilişkilidir.
Siyatik sinir periferik sinir araştırmalarında en sık kullanılan sinir olmasına rağmen, sıçan MN birden fazla avantaj sunar. Örneğin, MN lezyonlareklem kontraktürler ve etkilenen pençe otomutilation daha küçük bir insidansı ile ilişkilidir11,12,16,56. Önemli ölçüde, siyatik sinir transection sonra ototomi sıçanların% 11-70 afflicts. Bu siyatik indeksi imkansız14gibi mevcut değerlendirmeler yapabilir. Bu, sırayla, belirli bir istatistiksel güç hantal15elde etmek için gerekli hayvan sayısının tahmini yapar.
Buna ek olarak, MN siyatik sinir daha kısa olduğu gibi, sinir kurtarma ergözlenir 58,72,73,74,75,76. Ayrıca, MN kas kitleleri ile kaplı değildir, onun diseksiyon teknik olarak daha kolay siyatik sinir16daha kolay hale. Ayrıca, MN kolulnar sinir paralel bir yol vardır. Bu nedenle, ulnar sinir kolayca MN yaralanmaları onarmak için sinir grefti olarak kullanılabilir. Son olarak, insanlarda, en periferik sinir lezyonları üst ekstremitede meydana, hangi daha sıçan bu sinirin kullanımını destekler77,78.
Tartışmalı, kemirgenler deneysel hayvanlar en yaygın periferik sinir onarım alanında kullanılan48,79. Gösterildiği gibi, sıçan MN periferik sinir lezyonu ve onarım uygun bir modeldir. Aslında, birden fazla standart stratejileri motor ve duyusal kurtarma değerlendirmek için kullanılabilir, sonuçların daha kolay bir karşılaştırma izin36,46,60,80,81,82. Bu yöntemlerin çoğu noninvaziv, günlük değerlendirme için izin.
Ayrıca, fizyoterapi periferik sinir yaralanmaları kurtarma hastaların bakım standardının bir parçasıdır. Bu yazıda gösterildiği gibi, MN yaralanmaları4,,5gönderilen sıçanlara postoperatif fizyoterapi benzeri bir ortam sağlamak için birden fazla strateji vardır. Bu nedenle, bu model özellikle klinik senaryo çoğaltmak için uygundur, insan türüne sonuçların ekstrapolasyon kolaylaştıran12,27,48,56,58,83.
Bu yazıda gösterildiği gibi, sıçan MN modelinde motor ve duyusal iyileşmedeğerlendirmek için birden fazla standart stratejileri mevcuttur. Bunların çoğu sık değerlendirme sağlayan noninvaziv prosedürlerdir. Ayrıca, insan türünde en periferik sinir lezyonları üst ekstremite oluşur gibi, bahsedilen deneysel fizyoterapi ayarları daha aptly klinik bağlamda kurtarma taklit edebilir. Tartışmalı, bu daha sıçanda bu sinirin kullanımını doğrulayan, insan türüne sonuçların ekstrapolasyon kolaylaştırabilir.
The authors have nothing to disclose.
Diogo Casal, Fundação Calouste Gulbenkian, Fundação Champalimaud, Ministério da Saúde e Fundação para a Ciência e Tecnologia, Portekiz sponsorluğunda Ki İleri Tıp Eğitimi Programı’ndan hibe aldı. Yazarlar Şekil 1’dekiaçıklayıcı çizim için Bay Filipe Franco’ya çok müteşekkirdir. Yazarlar, Bay Alberto Severino’nun videonun çekim ve kurgulanmasındaki teknik yardımlarına teşekkür etmek isterler. Son olarak, yazarlar hayvan edinimi ve bakımı ile ilgili tüm lojistik yönleriyle ona yardım için Bayan Sara Marques teşekkür etmek istiyorum.
Acetaminophen | Amazon | https://www.amazon.com/Childrens-Tylenol-grape-flavor-ages/dp/B0051VVVZG | |
Acland clamps | Fine Science Tools | 00398 V | http://www.merciansurgical.com/aclandclamps.pdf |
Acland Single Clamps B-1V (Pair) | Fine Science Tools | 396 | http://www.merciansurgical.com |
Biogel Surgical Gloves | Medex Supply | 30465 | https://www.medexsupply.com |
BSL Analysis | BIOPAC Systems | https://www.biopac.com/ | |
Castroviejo needle holders | Fine Science Tools | 12565-14 | http://s-and-t.ne |
Clamp applicator | Fine Science Tools | CAF-4 | http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf |
Constante voltage stimulator | BIOPAC Systems | STM200 | https://www.biopac.com/product/constant-voltage-stimulator-unipolar-pulse/ |
Cutasept skin disinfectant | Bode Chemie | http://www.productcatalogue.bode-chemie.com/products/skin/cutasept_f.php | |
Dafilon 10-0 | G1118099 | http://www.bbraun.com/cps/rde/xchg/bbraun-com/hs.xsl/products.html?prid=PRID00000816 | |
Derf Needle Holders 12 cm TC | Fine Science Tools | 703DE12 | http://www.merciansurgical.com |
Dry heat sterilizer | Quirumed | 2432 | http://www.quirumed.com/pt/material-de-esterilizac-o/esterilizadores |
Dynamometer | SAUTER | FH5 | https://www.sauter.eu/shop/en/measuring-instruments/force-measurement/FH-S/ |
Electroneuromiography setup | BIOPAC Systems | MP36 | https://www.biopac.com/product/biopac-student-lab-basic-systems/ |
Ethilon 5-0 | W1618 | http://www.farlamedical.co.uk/ | |
FLIR Software | FLIR | ||
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved | Fine Science Tools | 11052-10 | http://www.finescience.de |
Graph paper | Ambar | ||
Heat Lamp HL-1 | Harvard Apparatus | 727562 | https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613 |
Heparin Sodium Solution (Heparin LEO 10000IU/ml) | Universal Drugstore | http://www.universaldrugstore.com/medications/Heparin+LEO/10000IU%2Fml | |
High-Temperature Cautery | Fine Science Tools | AA03 | http://www.boviemedical.com/products_aaroncauteries_high.asp |
Homeothermic Blanket System with Flexible Probe | Harvard Apparatus | 507220F | https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613 |
Infrared camera | FLIR | E6 | http://www.flir.eu/instruments/e6-wifi/ |
Instrapac – Adson Toothed Forceps (Extra Fine) | Fine Science Tools | 7973 | http://www.millermedicalsupplies.com |
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT | Fine Science Tools | EA7613-11 | http://www.merciansurgical.com |
Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution | Sigma- Aldrich | K113 | https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/k113?lang=pt®ion=PT |
Lacri-lube Eye Ointment 5g | Express Chemist | LAC101F | http://www.expresschemist.co.uk/lacri-lube-eye-ointment-5g.html |
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT | Fine Science Tools | EA7652-14 | http://www.merciansurgical.com |
Meloxicam | Recropharma | Mobic | https://www.recropharma.com/product-pipeline/meloxicam |
Methylene Blue solution | Sigma- Aldrich | https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product | |
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 | Fine Science Tools | JF-5 | http://www.merciansurgical.com |
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 | Fine Science Tools | JFA-5b | http://www.merciansurgical.com |
Micro retractor | Fine Science Tools | RS-6540 | http://www.finescience.de |
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight | Fine Science Tools | 67 | http://www.merciansurgical.com |
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 | Fine Science Tools | D-5a.2 | http://www.merciansurgical.com |
Monosyn 5-0 | 15423BR | http://www.mcfarlanemedical.com.au/15423BR/SUTURE-MONOSYN-5_or_0-16MM-70CM-(C0023423)-BOX_or_36/pd.php | |
Normal saline for irrigation | Hospira, Inc. | 0409-6138-22 | http://www.hospira.com/en/search?q=sodium+chloride+irrigation%2C+usp&fq=contentType%3AProducts |
Operating microscope | Leica Surgical Microsystems | http://www.leica-microsystems.com/products/surgical-microscopes/ | |
Skin Skribe Surgical Skin Marker | Moore Medical | 31456 | https://www.mooremedical.com/index.cfm?/Skin-Skribe-Surgical-Skin-Marker/&PG=CTL&CS=HOM&FN=ProductDetail&PID=1740&spx=1 |
Snacks | Versele-Laga | Complete Crock-Berry | http://www.versele-laga.com/en/complete/products/complete-crock-berry |
Straight mosquito forcep | Fine Science Tools | 91308-12 | http://www.finescience.de |
Surgical drapes | Barrier | 800430 | http://www.molnlycke.com/surgical-drapes/ |
Veet Sensitive Skin Hair Removal Cream Aloe Vera and Vitamin E 100 ml | Veet | http://www.veet.co.uk/products/creams/creams/veet-hair-removal-cream-sensitive-skin/ |