הציג הוא פרוטוקול לייצר סוגים שונים של עצב החציוני (MN) נגעים ותיקון בחולדה. בנוסף, הפרוטוקול מראה כיצד להעריך את ההחלמה הפונקציונלית של העצב באמצעות מספר בדיקות התנהגותיות לא פולשנית ומדידות פיזיולוגית.
המטרה העיקרית של החקירה הזאת היא להראות איך ליצור ולתקן סוגים שונים של העצב החציוני (MN) נגעים בחולדה. כמו-כן, מוצגות שיטות שונות להדמיית פיזיותרפיה. אסטרטגיות מרובות מתוקננת משמשות כדי להעריך את ההתאוששות מנוע וחישה באמצעות מודל MN של נגע העצבי היקפי ותיקון, ובכך מאפשר השוואה קלה של התוצאות. מספר אפשרויות כלולות לאספקת סביבה כמו פיזיותרפיה הניתוח לעכברושים שעברו פציעות MN. לבסוף, הנייר מספק שיטה כדי להעריך את ההתאוששות של MN באמצעות מספר בדיקות שאינן פולשני (כלומר, אוחז במבחן, מבחן הפין בדיקה, מבחן הליכה הסולם, מבחן טיפוס החבלים, ניתוח מסלול הליכה), ומדידות פיסיולוגיים (אינפרא אדום תרמוגרפיה, אלקטורגרפיה, גמישות הערכה, מכאן, מודל זה נראה מתאים במיוחד כדי לשכפל תרחיש קליני, הקלה על היווצרות התוצאות של המין האנושי.
למרות שעצב הירך הוא העצב הנלמד ביותר בחקר העצב ההיקפי, ניתוח החולדה מציג יתרונות שונים. לדוגמה, יש שכיחות מופחתת של כינון משותף והמשך של האיבר המושפע במחקרים של הנגע MN. יתרה מזאת, ה-MN אינו מכוסה בהמוני שרירים, והופך את הקרע שלו לקל יותר מזו של העצב השרירי. בנוסף, התאוששות MN נצפתה מוקדם יותר, כי ה-MN קצר יותר מעצב הירך. כמו כן, יש ל-MN נתיב מקביל לעצב הגומד בזרוע. מכאן, העצב האולמד ניתן להשתמש בקלות כמו שתל העצב לתיקון פציעות MN. לבסוף, MN בחולדות ממוקם forelimb, דומה הגפיים העליונות האנושית; בבני אדם, האיבר העליון הוא האתר של רוב נגעים העצב ההיקפית.
נגעים עצביים היקפית להתרחש באופן קבוע כתוצאה של טראומה, זיהום, דלקת כלי דם, חסינות אוטומטית, ממאירות, ו/או הקרנות1,2. למרבה הצער, תיקון עצבי היקפי ממשיך להציג קלינית ומאכזבות לעתים קרובות תוצאות3,4. יש קונצנזוס נרחב כי מחקר בסיסי ומשמעותי בסיסיים עדיין יש צורך לשפר את האפשרות של אלה מושפעים4,5,6,7.
העכברוש מראה דמיון רב לזה של בני אדם8,9 (איור 1). שמקורם מקלעת הזרוע באזור השחי, העצב הזה יורד לתוך ההיבט האמצעי של היד, מגיע אל המרפק, ומסתעף לרוב השרירים בתא הגחוני של האמה. ה-MN מגיע אל היד, שם הוא innervates את השרירים האחרים ואת שני השרירים הlumbrical הראשונים, כמו גם חלק מעור היד של החולדה9 (איור 1).
באמצעות עכברוש MN, ניתן לשכפל בצורה כראוי נגעים עצביים היקפית בבני אדם10,11,12. לעצב זה יש כמה יתרונות מחקר פוטנציאליים ביחס לעצב בשימוש העצבי הגיד. מכיוון ש-MN ממוקם בפורליהבייט של חולדות (בדומה לגפיים העליונות האנושיות), ניתן לפגוע בניסויים עם השפעה קטנה הרבה יותר על רווחתם של החולדה, לעומת העצב הinnervates, המהווה חלק ניכר מאיבר אגן הירכיים13. בנוסף, אצל בני אדם הנגעים הקליניים ביותר מתרחשים הגפיים העליונות, אשר מתאים החולדה של העכברוש10,11,12,14,15,16.
נייר זה מראה כיצד לייצר סוגים שונים של נגעים MN בחולדה. יתר על כן, דרכים שונות לדמות פיזיותרפיה הניתוח מוצגים. לבסוף, בדיקות להערכת התאוששות תפקודית של MN מתוארים. יש מספר אסטרטגיות סטנדרטיות זמין כדי להעריך את ההתאוששות מנוע החישה באמצעות מודל MN של הנגע ותיקון העצבים ההיקפית, ובכך מתיר השוואה קלה של תוצאות. מודל MN מתאים במיוחד לשכפול התרחיש הקליני, הקלה על היווצרות התוצאות למין האנושי.
נייר זה מציג פרוטוקול כדי ליצור סוגים שונים של נגעים MN ותיקון בחולדה. בנוסף, הוא ממחיש כיצד להעריך את ההתאוששות תפקודית של העצב הזה באמצעות מספר בדיקות התנהגותיות לא פולשנית ומדידות פיסיולוגיים.
בעיקר, כמה מבחנים פונקציונליים המתוארים במאמר זה, כלומר הסולם פועל מבחן הבדיקה חבל, תלויים באופן משמעותי על נכונות העכברוש לבצע את המשימה עם הציפייה של קבלת מזון גמול51,52,53. יש לציין כי זנים עכברוש מסוימים הם יותר קלה להכשרה וביצוע ביצועים מסוג זה של מבחנים51,52,53. לדוגמה, חולדות לואיס לבצע גרוע במבחנים אלה הן בשלב ההכשרה ולאחר מכן51,52,53.
דיור חולדה צריך לאפשר חופש תנועה מספיק בהסכמה עם ההתנהגות הניסיונית הטבעית שלהם, בנוסף לאפשר לבעלי חיים ניסיוניים להכיר כמה מהרכיבים הקיימים במבחנים הפונקציונליים19. לכן, מוצגים בצורות שונות של דיור המאפשר חופש תנועה גבוה יותר. הכלובים הגדולים מותאמים לרכיבי העשרה המשמשים מאוחר יותר במבחנים הפונקציונליים (למשל, חבלים וסולמות).
ניתנים לטעון, אלה מעשיר אלמנטים, כמו גם את הכלובים עם גלגלי ריצה משולבים ואת התחומים אימון הפרט לספק צורה של פיזיותרפיה הניתוח דומה לזה שהוצע לחולים אנושיים מופעל על מערכת העצבים ההיקפית10.
באופן משמעותי, למרות כמה מחברים עורכי דין מבתר את רקמות תת עורית ושרירים fasciae באופן מובהק או חיתוך נקי עם אזמל מספר 15, השימוש של התרמובית כאשר מבתר את המבנים האלה מומלץ למזער את הסיכון של שטף דם לאחר הניתוח.
יצוין כי בדיקות רבות כבר המציאו כדי לבדוק היבטים שונים של תיקון עצבי היקפי בחולדה, כלומר התחדשות סיבי, היעד התאוששות, ושחזור פונקציונלי, כמה מהם הם מעבר לטווח של מחקר זה29,54,55,56. לדוגמה, ניתוח קימטיות29,36,55 והערכת היסטרמומטרית29,36,57 מועסקים באופן נרחב על ידי סופרים מרובים. בנוסף, כמה מבחנים אלה כוללים וריאציות על מנת למקסם את היעילות ו/אוה54. לדוגמה, algisemetry מכנית (כלומר, הערכת התגובות גירויים כואבים מכני) ניתן להעריך בצורה איכותית באמצעות הפילמנט הנתון פון פריי, כפי שמתואר בעיתון הנוכחי, או למחצה באמצעות שימוש ברצף חזק יותר של פון פריי, או אפילו כמותית באמצעות30,54מכשירים אלקטרוניים להחיל לחצים הגוברת עד תגובת ה
באופן דומה, למרות מספר מחברים להשתמש בניתוח מסלול הליכה כדי להעריך את תיקון עצבי forelimb בחולדה, מחברים אחרים טוענים כי נגעים אחד MN לעתים קרובות להיכשל לייצר שינויים הנשתנים ב הדפסים10,58,59. יתר על כן, יש הצהיר כי שינויים אלה עשויים לא להיות פרופורציונלי שחזור שרירים10,60. הנושא הזה בראש, כמה חוקרים דגלו את השימוש בניתוח מסלול הליכה הקדמי בעיקר בעת הערכת התאוששות לאחר ריסוק הנגעים נווה ולא10אחרי שחזורהעצב הסגור 10,50,61.
המבדק משמש רבות להערכת ההתאוששות המוטורית של השרירים הנשלטים על-ידי ה-16בלבד,27. כדי להבטיח אחידות והשימוש בנתונים שהתקבלו עם בדיקה זו, החלת הבדיקה אוחז באמצעות מתודולוגיה מבוססת היטב המוצעים על ידי ברלי ואח ‘16 מומלץ. עם זאת, הפרוטוקול הנוכחי שונה בכך שהוא אינו משתק באופן שגרתי את כף היד הנכנסת כדי למנוע לחץ מופרז11,27. יש לציין כי מחברים אחרים, לאחר ששתק את הכפה הבלתי נפגעת, יש לאמוד את הבדיקה המחייבת באמצעות מדידת דינמיות או סולם27,56. עם זאת, הערכה כמותית זו עלולה להיות מושפעת מהכוח שהחוקר מתייחס לזנב החולדה26. יתר על כן, קשה להבדיל בין הכוח שנוצר על ידי השרירים כופף דיגיטלי (רק innervated על ידי MN בחולדה ומטרת מבחן האוחז9) מן הכוח המיוצר על ידי flexors פרק כף היד, הכוללים את כופף שחישורי גומדי אשר מקבל את האינבציה מעצב ulנאר9,10,27. כדי לנסות לעקוף את הביסים הפוטנציאליים האלה, פרוטוקול זה משתמש בקנה מידה סודר דומה לסולם מועצת המחקר הרפואי המשמש בדרך כלל חוזק שרירים כיתה בבני אדם10,11,62. לחילופין, מחברים אחרים תיארו הערכה מפורטת של האוחז בניתוח וידאו ומערכת הבקיע המבוססת על וידאו11,63.
חיסרון פוטנציאלי של שימוש ב-MN בהשוואה לעצב הגיד הוא שכמות מידע גדולה יותר זמינה לגבי העצב האחרון. זה, בתורו, יכול לעשות השוואה של נתונים שהושגו עם MN עם זה של עבודות ניסיוני הקודם יותר קשה46,48,64. בנוסף, את הגודל הקטן של MN לעומת העצב האוטומטי עושה מניפולציה כירורגית יותר מאתגר8,12,27,56,65.
בניגוד למתודולוגיה המתוארת במאמר זה, הערכה אלקטרואויוגרפיה חשמלית ניתן לבצע באמצעות אלקטרודות מונוסולריםעל מוצב בזרוע ואת אזורי51. למרות היותו פחות פולשני, שיטה זו נושאת את הסיכון של בלבול פוטנציאלי בשל האפשרות של גירוי של עצב הגומד באזור הזרוע9,51.
רוב המחברים מסכים כי לא כל הבדיקות המשמשות עכברוש לספק תוצאות concordant, כמו תיקון עצבי היקפי תלוי במערך מורכב של גורמים, המורכב הישרדות תא העצב, התארכות סיבי ו גיזום, synaptogenesis, לשחזר מוצלח של איברי החישה denervated ויחידות מנוע, הפלסטיות המוח7,10,50,66,67.
בסופו של דבר, יש לציין כי אזהרה משמעותית של מודלים מכרסמים היא העצבים היקפיים החולדה הם הרבה יותר קרוב לאיברים הקצה שלהם יש הרבה יותר החוצה אזורים בחתך מאשר מבנים אנושיים הומוולוגי. עם זאת, הבדל גודל זה מבטיח נתונים ניסיוני מהר יותר מכרסמים, ותוצאות הכוללת טוב יותר חולדות בהשוואה לבני אדם צפויים68. אכן, מספר מחברים להזהיר כי הטיפול חייב לשמש כאשר מנסים לשער נתונים ניסיוניים שהתקבלו תיקון עצבי היקפי באמצעות מכרסמים לבני אדם7,69. מודלים של פרימטים נחשבים. ליותר דומים70 אף על פי כן, השימוש שלהם קשור באילוצים מוקאתיים, לוגיסטיות ותקציב71.
למרות שעצב הירך הוא העצב הנפוץ ביותר בחקר העצב ההיקפי, העכברוש MN מציג יתרונות רבים. לדוגמה, הנגעים MN משויכים שכיחות קטנה יותר של משותף הקונבציה משותפת של כף היד המושפעת11,12,16,56. באופן משמעותי, כריתת האונה העוקבת אחר העצב העצבי הירך פוגעת ב -11 – 70% מחולדות. דבר זה עשוי להפוך את ההערכות הנוכחיות לבלתי אפשריות למדד האוטומטי14. זה, בתורו, עושה את ההערכה של מספר בעלי החיים הנדרשים להשיג כוח סטטיסטי נתון מסורבל15.
בנוסף, כמו MN הוא קצר יותר מאשר עצב הגיד, התאוששות העצב הוא ציין מוקדם יותר58,72,73,74,75,76. יתרה מזאת, ה-MN אינו מכוסה על ידי מיסות שרירים, מה שהופך את הניתוח שלו לקל יותר מאשר זה של עצב השריר16. בנוסף, יש ל-MN נתיב מקביל לעצב הגומד בזרוע. מכאן, העצב האולנאר יכול בקלות לשמש כשתל עצבי לתיקון מפציעות MN. לבסוף, אצל בני אדם, רוב הנגעים עצביים היקפית להתרחש בגפיים העליונות, אשר תומך עוד יותר את השימוש בעצב זה בחולדה77,78.
לטעון, מכרסמים הם בעלי חיים ניסיוניים הנפוצים ביותר בתחום של תיקון עצבי היקפי48,79. כמוצג, העכברוש MN הוא מודל נוח של הנגע ותיקון העצבים ההיקפית. למעשה, יש מספר אסטרטגיות סטנדרטיות זמין כדי להעריך את ההתאוששות מנוע וחישה, המתיר השוואה קלה יותר של תוצאות36,46,60,80,81,82. רבות מהשיטות הללו אינן פולשניות, ומאפשרות הערכה יומית.
יתר על כן, פיזיותרפיה היא חלק מרמת הטיפול של חולים התאוששות פציעות עצבים היקפית. כפי שמתואר במאמר זה, קיימות מספר אסטרטגיות כדי לספק סביבה מדומה של פיזיותרפיה לאחר חולדות שהוגשו לפציעות MN4,5. מכאן, מודל זה מתאים במיוחד כדי לשכפל את התרחיש הקליני, הקלה על התוצאות של המין האנושי12,27,48,56,58,83.
כפי שמוצג במאמר זה, אסטרטגיות סטנדרטיות מרובות זמינים כדי להעריך את ההתאוששות מנוע החישה במודל MN של החולדה. רוב אלה הם הליכים שאינם פולשנית, המאפשר הערכה תכופה. יתר על כן, כמו רוב הנגעים עצבי היקפי במין האנושי להתרחש בגפיים העליונות, הגדרות הפיזיותרפיה הנזכרת שהוזכרו יכול יותר לחקות התאוששות בהקשר הקליני. ניתן לטעון, זה יכול להקל על היווצרות של תוצאות המין האנושי, בנוסף לאימות השימוש של העצב הזה בחולדה.
The authors have nothing to disclose.
דיוגו קאסאל קיבל מענק מהתוכנית לחינוך מתקדם לרפואה, אשר ממומן על ידי הפונדה Calouste Gulbenkian, fundação שצ, מיניריו דה Saúde e הדיווה הישנה, פורטוגל. המחברים מודים מאוד למר פיליפה פרנקו על האיור באיור 1. המחברים רוצים להודות לעזרה הטכנית של מר אלברטו סוסטינו בצילום ובעריכת הווידאו. לבסוף, המחברים רוצים להודות לגב שרה Marques על עזרתה בהיבטים הלוגיסטיים הנוגעים לרכישת בעלי חיים ואחזקה.
Acetaminophen | Amazon | https://www.amazon.com/Childrens-Tylenol-grape-flavor-ages/dp/B0051VVVZG | |
Acland clamps | Fine Science Tools | 00398 V | http://www.merciansurgical.com/aclandclamps.pdf |
Acland Single Clamps B-1V (Pair) | Fine Science Tools | 396 | http://www.merciansurgical.com |
Biogel Surgical Gloves | Medex Supply | 30465 | https://www.medexsupply.com |
BSL Analysis | BIOPAC Systems | https://www.biopac.com/ | |
Castroviejo needle holders | Fine Science Tools | 12565-14 | http://s-and-t.ne |
Clamp applicator | Fine Science Tools | CAF-4 | http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf |
Constante voltage stimulator | BIOPAC Systems | STM200 | https://www.biopac.com/product/constant-voltage-stimulator-unipolar-pulse/ |
Cutasept skin disinfectant | Bode Chemie | http://www.productcatalogue.bode-chemie.com/products/skin/cutasept_f.php | |
Dafilon 10-0 | G1118099 | http://www.bbraun.com/cps/rde/xchg/bbraun-com/hs.xsl/products.html?prid=PRID00000816 | |
Derf Needle Holders 12 cm TC | Fine Science Tools | 703DE12 | http://www.merciansurgical.com |
Dry heat sterilizer | Quirumed | 2432 | http://www.quirumed.com/pt/material-de-esterilizac-o/esterilizadores |
Dynamometer | SAUTER | FH5 | https://www.sauter.eu/shop/en/measuring-instruments/force-measurement/FH-S/ |
Electroneuromiography setup | BIOPAC Systems | MP36 | https://www.biopac.com/product/biopac-student-lab-basic-systems/ |
Ethilon 5-0 | W1618 | http://www.farlamedical.co.uk/ | |
FLIR Software | FLIR | ||
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved | Fine Science Tools | 11052-10 | http://www.finescience.de |
Graph paper | Ambar | ||
Heat Lamp HL-1 | Harvard Apparatus | 727562 | https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613 |
Heparin Sodium Solution (Heparin LEO 10000IU/ml) | Universal Drugstore | http://www.universaldrugstore.com/medications/Heparin+LEO/10000IU%2Fml | |
High-Temperature Cautery | Fine Science Tools | AA03 | http://www.boviemedical.com/products_aaroncauteries_high.asp |
Homeothermic Blanket System with Flexible Probe | Harvard Apparatus | 507220F | https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku3_10001_11051_39108_-1_HAI_ProductDetail_N_37610_37611_37613 |
Infrared camera | FLIR | E6 | http://www.flir.eu/instruments/e6-wifi/ |
Instrapac – Adson Toothed Forceps (Extra Fine) | Fine Science Tools | 7973 | http://www.millermedicalsupplies.com |
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT | Fine Science Tools | EA7613-11 | http://www.merciansurgical.com |
Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution | Sigma- Aldrich | K113 | https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/k113?lang=pt®ion=PT |
Lacri-lube Eye Ointment 5g | Express Chemist | LAC101F | http://www.expresschemist.co.uk/lacri-lube-eye-ointment-5g.html |
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT | Fine Science Tools | EA7652-14 | http://www.merciansurgical.com |
Meloxicam | Recropharma | Mobic | https://www.recropharma.com/product-pipeline/meloxicam |
Methylene Blue solution | Sigma- Aldrich | https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product | |
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 | Fine Science Tools | JF-5 | http://www.merciansurgical.com |
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 | Fine Science Tools | JFA-5b | http://www.merciansurgical.com |
Micro retractor | Fine Science Tools | RS-6540 | http://www.finescience.de |
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight | Fine Science Tools | 67 | http://www.merciansurgical.com |
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 | Fine Science Tools | D-5a.2 | http://www.merciansurgical.com |
Monosyn 5-0 | 15423BR | http://www.mcfarlanemedical.com.au/15423BR/SUTURE-MONOSYN-5_or_0-16MM-70CM-(C0023423)-BOX_or_36/pd.php | |
Normal saline for irrigation | Hospira, Inc. | 0409-6138-22 | http://www.hospira.com/en/search?q=sodium+chloride+irrigation%2C+usp&fq=contentType%3AProducts |
Operating microscope | Leica Surgical Microsystems | http://www.leica-microsystems.com/products/surgical-microscopes/ | |
Skin Skribe Surgical Skin Marker | Moore Medical | 31456 | https://www.mooremedical.com/index.cfm?/Skin-Skribe-Surgical-Skin-Marker/&PG=CTL&CS=HOM&FN=ProductDetail&PID=1740&spx=1 |
Snacks | Versele-Laga | Complete Crock-Berry | http://www.versele-laga.com/en/complete/products/complete-crock-berry |
Straight mosquito forcep | Fine Science Tools | 91308-12 | http://www.finescience.de |
Surgical drapes | Barrier | 800430 | http://www.molnlycke.com/surgical-drapes/ |
Veet Sensitive Skin Hair Removal Cream Aloe Vera and Vitamin E 100 ml | Veet | http://www.veet.co.uk/products/creams/creams/veet-hair-removal-cream-sensitive-skin/ |