CRAF-14-3-3 Interaction Analysis in Live Cells Using a BRET-Based Approach

March 01, 2024

Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET) - בדיקה מבוססת למדידת אינטראקציות של CRAF עם 14-3-3 חלבונים בתאים חיים

01:07 min
•

טרנספקציה של תאי 293FT עם מבני ביטוי pCMV5-NanoLuc-CRAF ו-pCMV5-14-3-3ζ-Halo

02:01 min
•

הכנת תאי 293FT הנגועים ב- pCMV5-NanoLuc-CRAF ו- pCMV5-14-3-3ζ-Halo לבדיקת פליטת BRET

03:39 min
•
1Department of Cell and Molecular Pharmacology and Experimental Therapeutics,Medical University of South Carolina, 2Hollings Cancer Center,Medical University of South Carolina, 3Laboratory of Cell and Developmental Signaling, Center for Cancer Research,National Cancer Institute-Frederick

Summary

Automatic Translation

פרוטוקול זה מתאר בדיקה מבוססת BRET למדידת האינטראקציות של קינאז CRAF עם 14-3-3 חלבונים בתאים חיים. הפרוטוקול מתאר שלבים להכנת התאים, קריאת פליטות BRET וניתוח נתונים. מוצגת גם תוצאה לדוגמה עם זיהוי בקרות מתאימות ופתרון בעיות עבור מיטוב מבחן.

Article