Journal
Biochemistry
CRAF-14-3-3 Interaction Analysis in Live Cells Using a BRET-Based Approach

CRAF-14-3-3 Interaction Analysis in Live Cells Using a BRET-Based Approach

March 01, 2024

Biolumineszenz-Resonanz-Energietransfer (BRET)-basierter Assay zur Messung der Wechselwirkungen von CRAF mit 14-3-3-Proteinen in lebenden Zellen

01:07 min
•
394 Views

Transfektion von 293FT-Zellen mit pCMV5-NanoLuc-CRAF und pCMV5-14-3-3ζ-Halo-Expressionskonstrukten

02:01 min
•
24 Views

Vorbereitung von 293FT-Zellen, die mit pCMV5-NanoLuc-CRAF und pCMV5-14-3-3ζ-Halo transfiziert wurden, für den BRET-Emissionsassay

03:39 min
•
30 Views
1Department of Cell and Molecular Pharmacology and Experimental Therapeutics,Medical University of South Carolina, 2Hollings Cancer Center,Medical University of South Carolina, 3Laboratory of Cell and Developmental Signaling, Center for Cancer Research,National Cancer Institute-Frederick

Summary

Deutsch

Automatically Generated

Dieses Protokoll beschreibt einen BRET-basierten Assay zur Messung der Wechselwirkungen der CRAF-Kinase mit 14-3-3-Proteinen in lebenden Zellen. Das Protokoll beschreibt die Schritte zur Vorbereitung der Zellen, zum Ablesen der BRET-Emissionen und zur Datenanalyse. Ein Beispielergebnis mit der Identifizierung geeigneter Kontrollen und der Fehlerbehebung für die Assay-Optimierung wird ebenfalls vorgestellt.

Article